摘要:目的研究子宫内膜异位症Treg细胞上调的原因。方法选41例子宫内膜异位症患者,其中16例术前经过GnRH-a治疗的为治疗组,另25例术前未经治疗的为未治疗组,同时选25例子宫肌瘤患者为对照组,通过采血、腹腔液取样,用化学发光、流式细胞和ELISA方法检查化验,观察治疗组、未治疗组和对照组的基础雌二醇水平、腹腔液Treg细胞百分比及与Treg细胞诱导有关的IL-10、TGF-β、PGE-2炎症因子水平。结果经GnRH-a治疗后,治疗组的基础雌二醇下降显著,相比于治疗组治疗前、未治疗组及对照组,差异有统计学意义(P=0.00)。未治疗组Treg细胞百分比明显升高,相比于治疗组治疗后、对照组,差异有统计学意义(P<0.01);与Treg细胞诱导有关的TGF-β、PGE-2在未治疗组显著增高,相比于对照组、治疗组治疗后,差异有统计学意义(P=0.00)。IL-10在治疗组、未治疗组、对照组中的差异无统计学意义(P>0.05)。结论子宫内膜异位症经GnRH-a治疗后,Treg细胞及TGF-β、PGE-2炎症因子水平下降,提示患者腹腔存在炎症,Treg细胞的上调可能与其诱导的炎症因子的升高有关。
子宫内膜异位症的发病机制有多种学说,其中免疫抑制因素也受到关注。近年来国内外研究发现,多数子宫内膜异位症患者的腹腔液和病灶均有调节性T细胞(Treg)升高的现象[1,2,3,4,5],认为免疫抑制参与了子宫内膜异位症的发生发展,Treg细胞升高形成免疫抑制,降低了机体清除盆腔异位细胞的能力,进而导致子宫内膜异位症的发生发展[6]。但是我们认为,子宫内膜异位症表现为炎症性疾病,患者腹腔表达许多炎症因子,Treg细胞上调可能是继发于炎症的免疫调节事件,与其诱导的炎症因子的升高有关。因此在本研究中,我们以子宫内膜异位症的巧克力囊肿患者为研究对象,以Treg细胞为免疫抑制的观察指标,比较经GnRH-a治疗和未经GnRH-a治疗患者腹腔液Treg细胞及与Treg细胞诱导有关的炎症因子水平,观察Treg细胞与其诱导的炎症因子的关系。现将结果报告如下。
1、资料与方法
1.1 一般资料
以2019年收治的41例子宫内膜异位症患者为研究对象,巧克力囊肿大小5~7cm,其中16例术前经GnRH-a治疗、3个周期后来院手术的为治疗组,另25例未经GnRH-a治疗直接手术的为未治疗组,2组的囊肿大小、CA125、分期情况见表1。同时选25例子宫肌瘤患者为对照。纳入对象均排除心、肝、肾、内分泌疾病和盆腔感染疾病,近3个月未服用激素类药物。本研究通过医院伦理委员会批准。
1.2 主要试剂及仪器
雌二醇检测试剂盒为雅培公司产品,流式细胞仪为BD公司产品,Treg细胞检测试剂盒购自Bio-Science公司(内含抗人FITC-CD4和PE-Foxp3单抗,及配套的固定透膜和透膜缓冲试剂),IL-10、TGF-β、PGE-2ELISA试剂盒购自南京森贝伽生物科技有限公司。
1.3 治疗方法
术前经GnRH-a亮丙瑞林治疗的子宫内膜异位症患者,在月经周期的1~5天(28天为1个周期),第1次皮下注射亮丙瑞林3.75mg,部位为上臂或臀部,每1周期给药1次,剂量同第1次,连续给药3个周期。
1.4 检测方法
1.4.1 腹腔液取样
术前经GnRH-a治疗的子宫内膜异位症患者3个周期后入院手术,未经GnRH-a治疗的子宫内膜异位症和子宫肌瘤患者月经干净2~7天后入院手术,术中取腹腔液。
1.4.2 雌二醇和IL-10、TGF-β、PGE-2检测
雌二醇采用电化学发光免疫法检测,IL-10、TGF-β、PGE-2采用ELISA检测,相关操作按说明书进行。
1.4.3 Treg细胞检测
腹腔液离心取沉淀细胞,用1mlPBS悬浮,取100μL加入测定管,加10μLFITC-CD4抗体,再加1ml固定透膜液,混匀,室温避光孵育40min,离心去上清,用透膜缓冲液100μL重悬,加10μLPE-Foxp3抗体,混匀,室温避光孵育30min,离心去上清,用200μLPBS重悬上机检测。
1.5 统计方法
用SPSS19.0软件中的方差分析、T检验、卡方分析和Kruskal-Wallis秩和分析进行统计检验,P<0.05为差异具有统计学意义。
2、结果
2.1 治疗组治疗前后、未治疗组、对照组的基础雌二醇水平
月经第3天的雌二醇值为基础水平,血清化学发光免疫检测显示,治疗组治疗后、治疗组治疗前、未治疗组、对照组的基础雌二醇分别为(11.6±4.9)ng/L、(34.8±8.7)ng/L、(39.4±12.4)ng/L、(33.7±9.5)ng/L(图1)。治疗组治疗后的基础雌二醇值相比治疗前明显下降,差异有统计学意义(t=9.29,P=0.00),表明子宫内膜异位症患者经药物治疗后,基础雌二醇的水平显著下降,达到了药物绝经状态。治疗组治疗前、未治疗组和对照组的基础雌二醇差异无显著性(P>0.05)。
2.2 治疗组治疗后、未治疗组、对照组腹腔液Treg细胞百分比
流式细胞检测显示,治疗组治疗后、未治疗组、对照组的Treg细胞百分比分别为2.94±0.83、5.32±1.16、2.05±0.59(图2),未治疗组的Treg细胞百分比较对照组和治疗组高,差异有统计学意义(P<0.01),表明子宫内膜异位症上调了Treg细胞。使用GnRH-a治疗后,治疗组雌二醇下降,同时Treg细胞百分比下降,提示雌二醇水平与Treg细胞百分比有关。治疗组治疗后和对照组的Treg细胞百分比差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。
2.3 治疗组治疗后、未治疗组、对照组腹腔液IL-10、TGF-β、PGE-2炎症因子水平
子宫内膜异位症患者腹腔液中存在许多炎症因子[7,8],经GnRH-a治疗后Treg细胞下调,我们认为这可能和诱导Treg细胞的IL-10、TGF-β、PGE-2的下降有关,因此离心取腹腔液的上清,进一步实施了IL-10、TGF-β、PGE-2的检测。ELISA显示,IL-10在治疗组治疗后、未治疗组、对照组中的水平分别为18.26±4.53ng/L、19.23±5.64ng/L、20.56±5.21ng/L,TGF-β在治疗组治疗后、未治疗组、对照组中的水平分别34.01±12.89ng/L、75.14±16.86ng/L、25.32±10.26ng/L,PGE-2在治疗组治疗后、未治疗组、对照组中的水平分别22.49±4.65ng/L、50.26±6.51ng/L、16.34±6.43ng/L(图3),统计显示,未治疗组与治疗组治疗后、对照组相比,TGF-β、PGE-2明显更高,差异有统计学意义(P=0.00),而IL-10在三者间差异不明显,无统计学意义(P>0.05)。
3、讨论
子宫内膜异位症是一种妇科常见病,发病机制尚不清楚,可能与腹腔内环境有关,其中免疫因素的作用受到关注。研究发现[1,2,3,4,5],多数子宫内膜异位症患者的腹腔液和病灶常伴Treg细胞的升高。
Treg细胞是机体重要的免疫抑制细胞,通过分泌IL-10、TGF-β等细胞因子,或和T效应细胞直接接触,发挥免疫抑制功能。研究认为[6]子宫内膜异位症患者病灶的Treg细胞升高,会形成局部免疫抑制,降低清除盆腔异位细胞的能力,进而导致子宫内膜异位症的发生发展。
但是我们认为,异位子宫内膜是由在位子宫内膜逆流而来,是机体的正常组成部分,子宫内膜在妊娠期间得到了母体激素的有效刺激,接触了自身免疫细胞,形成了免疫耐受,用局部的免疫抑制解释子宫内膜异位症的发生发展可能不合理。
GnRH-a是治疗子宫内膜异位症的药物,其机制是抑制垂体促性腺激素的分泌,导致卵巢分泌的性激素减少,造成体内低雌激素状态。结果显示,子宫内膜异位症患者确实上调了Treg细胞,未治疗组相比于对照组,Treg细胞百分比明显升高,但经过GnRH-a治疗后,伴随雌二醇的下降,治疗组的Treg细胞百分比也明显降低,而且,诱导Treg细胞的TGF-β、PGE-2的炎症因子也出现下降,因此我们认为子宫内膜异位症患者腹腔存在炎症,Treg细胞的上调可能与其诱导的炎症因子的升高有关。
研究发现,子宫内膜异位症表现为炎症性疾病,患者腹腔表达TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、VEGF、TGF-β、PGE-2等许多炎症因子[7,8]。对于炎症因子出现的原因,我们认为这与异位内膜出血引起的炎症有关,异位内膜出血后囊壁压力增大,反复形成破裂口,破裂后的囊内容物刺激腹膜和卵巢,形成炎症,周期性出血强化了这一作用,并一直持续,形成了永不愈合的伤口(此话原本是用来描述肿瘤的[9],用来描述子宫内膜异位症可能更合适)。
然而,炎症激活之后,机体会实施免疫调节[10],免疫抑制相伴发生,形成抗炎反应抑制炎症,炎症和抗炎相继出现、相伴发生,Treg细胞作为典型的免疫抑制抗炎细胞,这可能是子宫内膜异位症激活炎症后,Treg细胞随后上调的原因。
这一现象也见于肿瘤,研究显示肿瘤虽存在免疫抑制,但在使用免疫调节的CTLA-4、PD-1治疗后,只有少数患者有效,多数患者疗效不明显[11,12,13],这一结果提示免疫抑制和肿瘤发生有一定关系,但关系可能不充分,究其原因,我们认为这可能也和免疫调节有关,肿瘤组织因为血管生长不协调,特别是生长较快的恶性肿瘤,不能及时供应营养,会出现缺氧或坏死,引起损伤性炎症,如出现TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IL-10、VEGF、TGF-β等[14,15],炎症激活后实施免疫调节,免疫抑制出现,免疫抑制细胞继发性聚集,但这种免疫抑制细胞的聚集在肿瘤发生之后。肿瘤发生与免疫抑制之间的因果关系不充分,这可能是肿瘤在解除免疫抑制后,因多数肿瘤来源于自身,突变负荷量不大,肿瘤抗原不强,免疫治疗效果不明显的原因。
使用GnRH-a治疗子宫内膜异位症,雌激素下降,子宫内膜萎缩或凋亡,无周期性出血,炎症反应减弱,同时,抗炎反应也减弱,Treg细胞开始下降,这可能是使用GnRH-a治疗后,Treg细胞下降的原因。
综上所述,我们认为子宫内膜异位症Treg细胞的上调可能是继发于炎症的免疫调节事件,与其诱导的炎症因子有关。
参考文献:
[4]吴晶晶,陈雄,黄娟.RORyt、Foxp3在子宫内膜异位症组织中的表达及意义[J].山东医药,2015,41(55):77-78.
[5]李素红,冯春蝶,付秀虹Treg细胞及Foxp3在子宫内膜异位症患者的表达及临床意义[J].中国计划生育和妇产科,2014,4(6):43-46.
[6]丰有吉,沈铿.妇产科学[M].第1版,北京:人民卫生出版社,2005:361.
[10]曹雪涛,何维.医学免疫学[M].第3版,北京:人民卫生出版社,2015:240-250.
文章来源:朱义保,吴斐,万磊.子宫内膜异位症Treg细胞上调的机制研究[J].实用癌症杂志,2022,37(04):528-531.
分享:
细菌性阴道病(BV)是一种育龄期女性常见的阴道感染性疾病,我国健康体检妇女BV患病率约为11%,在妇科门诊中可达36%~60%,而该病可导致患者早产、不孕或引发其他阴道疾病,需及时就医治疗。BV常见临床表现为白带异常、外阴瘙痒及分泌物恶臭等,但部分患者也可能无明显临床症状。
2024-03-27子宫内膜异位症是育龄妇女常见病,发病率高达10%~15%,中国有近5 000万子宫内膜异位症患者。子宫内膜异位症病程漫长,严重危害女性身心健康,是一个世界范围内的健康问题。在过去的十数年,子宫内膜异位症的诊治理念不断更新发展,对子宫内膜异位症最大的认识变革是:子宫内膜异位症是一种慢性疾病,需要像高血压及糖尿病一样,进行长期管理。
2024-03-27卵巢储备功能减退(diminished ovarian reserve,DOR)指的是育龄妇女因为卵母细胞的数量减少和(或)质量降低,造成卵巢功能不足,进而导致女性生育能力的降低。在临床上,多会出现月经频发或稀发、经量时多时少、不孕等症状[1]。近年来,DOR在临床上的患病率逐年增高,并有向年轻群体发展的趋势。如果不加以治疗,该病可在1~6年发展为卵巢早衰[2]。
2024-03-25多囊卵巢综合征(PCOS)是一种具有高度异质性的卵巢功能障碍综合征,是无排卵性不孕的主要原因,在临床上以雄激素过高的临床或生化表现、持续无排卵及卵巢多囊改变为特征,常伴有卵泡发育异常、肥胖及胰岛素抵抗(IR)。其发病机制涉及下丘脑-垂体-卵巢轴调节功能异常、高雄激素血症与胰岛素抵抗以及与氧化应激存在不可分割的联系。
2024-03-13慢性宫颈炎是常见妇科疾病,属于妇科生殖器炎症的一种,致病原因较多。这类疾病大多是由于急性宫颈炎治疗不彻底,病原体持续感染所致。在急性宫颈炎未完全治愈的情况下,病原体隐藏在子宫颈管黏膜内,形成慢性炎症,这种情况在分娩、流产、手术损伤宫颈后常见。
2024-02-21子宫内膜异位症,是一种子宫内膜样组织在宫腔外引起局部炎症性反应的慢性疾病,常见临床表现为慢性盆腔疼痛、充血性痛经、不孕、疲劳等。全球约5%~10%的育龄妇女患有子宫内膜异位症,人数高达1.76亿,约30%~50%的患者患有不孕症,50%~60%的患者存在盆腔疼痛。
2024-02-08盆腔器官脱垂是中老年女性常见疾病,如不及时治疗,可严重影响患者的生活质量。
2024-02-02神经纤维瘤病是一类累及多系统的肿瘤易感性单基因遗传病,主要分为1型神经纤维瘤病(neurofibromatosis type 1,NF1;以下斜体NF1代表基因,NF1代表1型神经纤维瘤病)和2型神经纤维瘤病。其中NF1是一种相对常见的遗传病,其患病率高达三千到四千分之一[1]。NF1的诊断标准最初在1987年提出[2],强调临床表现但未将基因检测纳入诊断标准。2021年,NF1诊断标准修订版发布,增加了遗传学检测结果作为主要诊断标准之一[3]。
2024-02-02输卵管是最常见的宫腔以外妊娠部位,通常发生于输卵管壶腹部。输卵管妊娠导致的急腹症是女性最常见的病症之一,严重威胁女性的身体健康及生命安全[1,2]。关于输卵管妊娠的相关研究主要集中于临床保守治疗方面的探索,但其发生机制目前仍未可知[3]。本研究组在临床病理诊断工作中发现,在输卵管子宫内膜异位症患者中,异位的子宫内膜腺体HNF1β呈阳性表达,而其旁的正常输卵管上皮缺失表达。
2024-02-02绒毛膜下血肿(subchorionic hematoma,SCH)是指绒毛膜与底蜕膜发生分离出血,使血液积聚在二者之间形成血肿。1985年,MANTONI等[1]根据超声结果首次提出了此概念,其超声声像图可表现为新月形、三角形或不规则形的高回声或低回声区[2]。
2024-01-25人气:13856
人气:12903
人气:12744
人气:12604
人气:11405
我要评论
期刊名称:现代妇产科进展
期刊人气:4191
主管单位:中华人民共和国教育部
主办单位:山东大学
出版地方:山东
专业分类:医学
国际刊号:1004-7379
国内刊号:37-1211/R
邮发代号:24-104
创刊时间:1989年
发行周期:月刊
期刊开本:大16开
见刊时间:一年半以上
影响因子:1.510
影响因子:0.000
影响因子:1.240
影响因子:0.891
影响因子:1.479
400-069-1609
您的论文已提交,我们会尽快联系您,请耐心等待!
你的密码已发送到您的邮箱,请查看!