摘要:旨在为甘油二酯(DAG)在健康管理和疾病预防中的优化应用提供参考,通过饲喂雄性C57BL/6J系SPF级小鼠高脂高糖饲料建立肥胖小鼠模型,将肥胖模型组小鼠随机分为3组,分别以玉米油、40%DAG玉米油和80%DAG玉米油替代高脂高糖饲料中的猪油,饲喂16周,研究DAG食用油对肥胖小鼠体质量、血脂、肝脏功能的影响。结果表明:不同浓度的DAG食用油均能有效抑制小鼠体质量增加,减少白色脂肪积累,降低血清总胆固醇、甘油三酯及低密度脂蛋白胆固醇水平,同时提升高密度脂蛋白胆固醇水平,减少肝细胞脂肪变性,减轻小鼠肝脏损伤,还可以降低小鼠血清中葡萄糖含量,而且40%DAG食用油展现出相对于80%DAG食用油更优的效果。综上,DAG食用油可有效改善肥胖小鼠脂质代谢和肝脏功能,且在长期干预策略中,40%DAG食用油可能是更佳的选择。
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肥胖是全球性的公共卫生问题,与多种慢性疾病的风险增加有关,包括心血管疾病、2型糖尿病、高血压等[1]。糖尿病是以高血糖为特征的代谢性疾病,长期高血糖会导致多种并发症,如心脏病、肾病、视网膜病变和神经病变[2]。因此,控制体质量和改善胰岛素敏感性对于预防上述疾病至关重要。
甘油二酯(DAG)是食用油脂中除三酰基甘油(TAG)外存在最多的天然组分,同时也是人体内油脂代谢的中间产物[3],近年来受到了广泛关注。大量研究表明,DAG具有减肥[4]、降低血脂[5-7]、改善血糖[8-10]、降低血压[11]等功效。鉴于这些健康效益,DAG已被开发成为一种新型的健康食用油,在日本等地得到了广泛应用和推广。在中国,也有一些科研团队成功研发出DAG食用油产品[12-16]。
然而,目前关于DAG含量与健康效益之间关系的系统研究较少。本研究旨在通过数据分析和对比,探讨含有不同浓度DAG(40%与80%)的食用油在连续服用过程中健康效益变化,特别是在抑制体质量、降低血脂及血糖等方面的功效,以期为DAG在健康管理和疾病预防中的优化应用策略提供理论支持。
1、材料与方法
1.1实验材料
玉米油、40%DAG玉米油(DAG含量40%)、80%DAG玉米油(DAG含量80%),长寿花食品股份有限公司;雄性C57BL/6J系SPF级小鼠(5周龄,初始体质量无显著差异),斯贝福(苏州)生物技术有限公司;小鼠饲料,由南通特洛菲有限公司定制;总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)试剂盒,上海康朗生物科技有限公司;血糖试剂盒(GOPOD酶法),苏州格锐思生物科技有限公司。
高速离心机、电子天平、一次性注射器、分光光度计、涡旋混合器等。
1.2实验方法
1.2.1肥胖模型建立
60只5周龄小鼠给予普通饲料,在温度(23±2)℃、湿度(60±5)%、光照12h(8:00—20:00)的动物房内,自由进食、饮水,每3d更换一次垫料条件下适应喂养1周后,随即从中随机选取一定数量的小鼠,分为空白组和肥胖模型组,其中空白组小鼠继续饲喂普通饲料(脂肪供能占比10%),肥胖模型组小鼠饲喂高脂高糖饲料〔其中脂肪(猪油)供能占比45%,蔗糖供能占比13%〕,实验期间每周称量小鼠的体质量,以监控小鼠体质量的变化。经过6周的喂养后,肥胖模型组小鼠的空腹体质量相比空白组的高20%,说明肥胖模型建立成功。
1.2.2动物分组与给药
将肥胖模型组小鼠按空腹体质量随机分为3组,分别为TAG组、40%DAG组和80%DAG组,每组15只,其中TAG组饲喂用玉米油替代猪油的高脂高糖饲料,40%DAG组饲喂用40%DAG玉米油替代猪油的高脂高糖饲料,80%DAG组饲喂用80%DAG玉米油替代猪油的高脂高糖饲料。空白组小鼠(1.2.1中饲喂6周的)继续饲喂普通饲料。连续饲喂16周。
1.2.3监测指标分析
实验期间,每日监测小鼠的进食量,每4周固定时间点称量小鼠体质量,并进行尾静脉采血(采血前小鼠禁食8h),采用血糖试剂盒对小鼠血液中的葡萄糖(GLU)含量进行测定。
实验结束后,小鼠禁食不禁水12h,摘眼球取血,脱颈椎处死,取小鼠的3个主要白色脂肪垫(腹部、附睾和肾周),同时摘取肝脏。所取血液离心后取血清,使用试剂盒检测血清中的TG、TC、LDL-C、HDL-C含量,以及AST和ALT活性。称取所取白色脂肪垫质量。摘取的肝脏用棉球去除多余血液称其质量后,放入液氮速冻,随后转移至-80℃冰箱中贮存待组织病理学观察。
1.2.4肝脏组织病理学观察
小鼠肝脏固定于4g/100mL多聚甲醛溶液中24h,石蜡包埋制作切片,苏木精-伊红(H&E)染色后,利用光学显微镜分析病理特征并采集图像。
1.2.5数据处理实验结果
以“平均值±标准偏差”表示,组间差异采用一元方差分析,然后采用SPSS23.0软件进行显著性检验,显著性水平最小以p<0.05记。采用GraphPadPrism8.02软件作图。
2、结果与讨论
2.1不同浓度的DAG食用油对体脂的影响
不同浓度的DAG食用油对小鼠体质量与进食量的影响如图1所示,对小鼠白色脂肪质量的影响如表1所示。
由图1可知,3组肥胖模型小鼠的初始体质量相近,不存在显著差异,说明实验分组合理。在实验周期内,各组小鼠体质量呈现出不同的变化趋势。在0~12周内,TAG组小鼠体质量增长速度较快,而40%DAG组和80%DAG组小鼠体质量增长速度较慢且较为接近;在12~16周,TAG组小鼠体质量仍保持较高增长速度,而80%DAG组小鼠的体质量增速也提升,超过了40%DAG组,但仍低于TAG组。整体来看,40%DAG组在整个实验期间对肥胖小鼠体质量增加的抑制作用相对稳定且较为明显,这表明在长期连续服用过程中,40%DAG食用油在抑制肥胖小鼠体质量增加方面效果可能更好。由图1还可知,各组小鼠的平均日进食量并没有明显差异,表明小鼠体质量变化与摄食量无关,进一步支持DAG可能通过调节脂质代谢或能量消耗发挥作用[17]。
图1不同浓度的DAG食用油对小鼠体质量与进食量的影响
表1不同浓度的DAG食用油对小鼠白色脂肪质量的影响
由表1可知,40%DAG组和80%DAG组小鼠的附睾、肾周和腹部白色脂肪的质量均显著低于TAG组的,40%DAG组与80%DAG组小鼠的白色脂肪质量虽然不具有显著差异,但是40%DAG组的白色脂肪质量均低于80%DAG组的。上述结果说明,40%DAG食用油在减少肥胖小鼠白色脂肪积累方面有更显著的效果。
2.2不同浓度的DAG食用油对血脂的影响
不同浓度的DAG食用油对小鼠血脂(TC、TG、HDL-C、LDL-C含量)的影响见图2。
由图2可知,40%DAG组小鼠的TC、TG和LDL-C含量均显著低于TAG组的,说明40%DAG食用油对降低这些不良血脂指标有积极影响。80%DAG组小鼠的TC、TG和LDL-C含量也显著低于TAG组的,但降低幅度不如40%DAG组的,尤其是在LDL-C和TC方面,虽其含量低于TAG组的,但显著高于40%DAG组的。与TAG组相比,40%DAG组和80%DAG组小鼠的HDL-C含量均显著提升。综上,不同浓度的DAG食用油对血脂调控的影响有所不同,就降低肥胖小鼠血脂而言,长期服用40%DAG食用油可能是一个比服用80%DAG食用油更为有效的营养干预手段。
图2不同浓度的DAG食用油对小鼠血脂的影响
2.3不同浓度的DAG食用油对肝脏的影响
2.3.1对肝脏病理形态的影响
通过对小鼠肝脏进行H&E染色,研究了不同浓度的DAG食用油对小鼠肝脏病理形态的影响,结果如图3所示。
图3不同浓度的DAG食用油对小鼠肝脏病理形态的影响
由图3可知:空白组小鼠肝细胞整体结构正常,而TAG组小鼠肝细胞表现出特征性的脂肪变性,肝脏内脂滴大量积聚,有炎症细胞浸润;相比于TAG组,DAG组小鼠肝细胞形态显著改善,脂肪变性显著减少;尽管40%DAG组和80%DAG组都显示了对肝细胞脂肪变性和肝脏损伤的缓解作用,但40%DAG组小鼠的肝细胞形态更接近空白组,这表明较低浓度的DAG食用油可有效减轻肥胖小鼠的肝脏问题。此外,40%DAG组还表现出较轻的炎症细胞浸润现象,这进一步证明了其在保护肝脏免受肥胖相关损害方面的有效性。综上,40%DAG食用油可能是治疗肥胖相关肝脏疾病的理想选择。
为了进一步评估DAG对肝脏的影响,测定了各组小鼠的肝脏质量,结果如表2所示。
表2不同浓度的DAG食用油对小鼠肝脏质量的影响
由表2可知:与空白组相比,TAG组小鼠的肝脏质量显著增加,这与组织学观察到的肝细胞脂肪变性程度一致;与TAG组相比,DAG组小鼠的肝脏质量均出现下降趋势,这与组织学观察到的肝细胞脂肪变性减少相符;40%DAG组小鼠的肝脏质量降低幅度大于80%DAG组的,说明40%DAG食用油在减轻肥胖小鼠肝脏负担方面效果较优。
2.3.2对肝细胞损伤的影响
在肝脏病理生理学中,ALT和AST作为敏感的肝细胞损伤标志物,其活性升高通常反映肝细胞损伤或炎症,其活性下降则反映肝细胞损害减轻或肝功能改善。测定了各组小鼠血清中AST和ALT活性,以考察不同浓度的DAG食用油对小鼠肝细胞损伤(AST、ALT活性)影响,结果见图4。
图4不同浓度的DAG食用油对小鼠肝细胞损伤的影响
由图4可知,相较于TAG组,40%DAG组和80%DAG组小鼠ALT和AST活性均降低,且40%DAG组的ALT和AST活性降低幅度高于80%DAG组的,说明40%DAG食用油和80%DAG食用油都能够在一定程度上有效减轻肝脏损伤,且40%DAG食用油的效果优于80%DAG食用油的。
2.3.3对肝脏糖代谢的影响
鉴于肝脏在血糖调控中的核心作用,通过测定各组小鼠血清中葡萄糖(简称“血糖”)含量,探究不同浓度的DAG食用油对小鼠肝脏糖代谢(葡萄糖含量)的影响,结果见图5。
图5不同浓度的DAG食用油对小鼠肝脏糖代谢的影响
由图5可知:与空白组相比,随着饲喂时间的推移,TAG组小鼠血糖含量不断增加,40%DAG组和80%DAG组小鼠的血糖含量则总体呈下降趋势;DAG组小鼠血糖含量高于空白组的,但始终低于TAG组的,提示DAG可能具有降低血糖的作用。在前12周,40%DAG组小鼠的血糖含量高于80%DAG组的,但12周以后,40%DAG组小鼠的血糖含量低于80%DAG组的。因此,在本实验条件下,长期服用40%DAG食用油可能具有更为理想的降低肥胖小鼠血糖的效果。
3、结论
对比饲喂不同浓度DAG食用油的肥胖小鼠模型,揭示了40%DAG食用油在多方面的显著益处,如有效抑制小鼠体质量增加,减少白色脂肪蓄积,并在调节血脂、改善肝脏损伤、减轻肝脏脂肪累积、调控血糖方面展示了优势。为了更准确地评估不同浓度的DAG食用油对血脂、血糖控制的影响,需要进行更多的研究和比较,另外,鉴于动物实验与人体实际情况存在的差异,未来还需进一步开展临床研究以验证DAG对人体健康的实际效果和适宜剂量。
参考文献:
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文章来源:程芳园,杨新月,刘晓鹏,等.不同浓度DAG食用油对肥胖小鼠代谢调控及肝脏功能的影响[J].中国油脂,2025,50(08):88-91+111.
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期刊名称:中国油脂
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