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苗药豆布托（刺梨根）治疗寒邪客胃型胃溃疡大鼠的效果及机制研究

2025-07-08 73 上传者：管理员

摘要：目的探究刺梨根治疗寒邪客胃型胃溃疡的作用及机制。方法将SPF级雄性Wistar大鼠按照随机数表法分为三组，分别为A组（对照组）、B组（模型组）以及C组（治疗组），每组3只。采用冰乙酸浆膜下注射法制备大鼠胃溃疡模型，建模完成后开始给药，C组（治疗组）给予每天2 m L/100 g刺梨根煎液灌胃处理，1次/天，连续灌胃14 d。观察每组大鼠的整体精神状态、活动情况、毛发光泽和粪便性状等。给药结束后1天，处死动物，取材外周血以及胃黏膜组织。观察新鲜胃黏膜样本，计算胃黏膜溃疡指数及溃疡抑制率，并通过石蜡包埋后，HE染色观察胃黏膜病理组织变化。用ELISA法测定血清表皮生长因子（EGF）、白细胞介素-6(IL-6)水平。结果治疗组大鼠一般状态优于模型组。与对照组相比，模型组胃黏膜层结构相对完整，腺体局部排列紊乱，出现不同程度的黏膜水肿糜烂，上皮细胞疏松脱落，可见大量炎性细胞浸润；IL-6水平升高，EGF水平降低。加入刺梨根煎液干预后，大鼠胃黏膜层、固有层、肌层结构相对完整，固有腺体排列较整齐，未见明显的炎性细胞浸润；溃疡指数降低，IL-6水平降低，EGF水平升高，差异具有统计学意义（P <0.05）。结论刺梨根可以通过调控EGF、IL-6水平，起到调节攻击因子与保护因子的平衡来保护胃黏膜的作用。

关键词：
刺梨根煎液
寒邪客胃
白细胞介素-6
胃溃疡
血清表皮生长因子
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胃溃疡（gastric ulcer，GU）是胃肠系统常见疾病之一，以中上腹部慢性、周期性、节律性疼痛为主，并伴有泛酸、嗳气、恶心和呕吐等症状。其病情相对复杂，病程较长，严重者甚至会引发出血、穿孔、幽门梗阻和癌变等并发症，对人类健康造成威胁［1，2］。现代医学治疗主要是通过使用抑制胃酸分泌药物（H2受体拮抗剂和质子泵抑制剂），降低对胃黏膜的损害［3］，促进溃疡面的修复，可取得立竿见影的效果。虽然疗效突出，但有一定的药物副作用（头痛、腹泻、阳痿、男性乳腺发育等），且复发率高［4，5］。与之相比，苗药在治疗本病方面具有独特的优势。

刺梨根早在《本草纲目拾遗》便有记载，为蔷薇科植物刺梨的根，分布于贵州、湖北、甘肃等地。其味甘酸，性平，归脾、胃、肝、肾四经。具有健胃、消食、止泻等功效［6］。资料显示，刺梨不仅具有多种药理作用，如抗氧化、抑菌、脏器保护、防辐射等，还对胃溃疡起到一定的治疗作用［7］。因此，本研究拟采用冰乙酸浆膜下注射法［8］模拟寒邪客胃型胃溃疡大鼠模型，观察血清IL-6、EGF水平，来探讨刺梨根对胃溃疡的治疗作用及机制。

1、材料与方法

1.1实验动物

SPF级雄性Wistar大鼠9只，8～10周龄，购自云南大学，许可证编号SCXK（滇）2021-0001。于室温20～26℃、相对湿度50%～70%、12小时明暗交替的环境中饲养，通风良好，颗粒饲料喂养，自由饮水。

1.2实验药材

刺梨根煎液［100 g刺梨根（由贵州中医药大学第一附属医院药房提供）水煎60 min后，滤出药液；药渣再次加水煎60 min，将两次煎液合并后浓缩至200 mL（每1 mL含药量0.5 g），在4℃环境下保存备用］。

1.3仪器与试剂

1.3.1实验器材与设备-

80℃超低温冰箱（澳柯玛股份有限公司，型号：DW-86L630）、电子天平（杭州万特衡器有限公司，型号：WT10001）、分析天平（常州市幸运电子设备有限公司，型号：JA203P）、纯水仪（宁波丹斯波顿环保科技责任有限公司，型号：CM-RO-C2）、离心机（湖南湘立科学仪器有限公司，型号：XL5A）。

1.3.2主要试剂

生理盐水（广州裕源药业有限公司，500 mL/瓶）、多聚甲醛（天津市光复科技发展有限公司500 g/瓶）、水合氯醛（成都市科隆化学品有限公司，250 g/瓶）、PBS粉末（北京索莱宝科技有限公司，2 L/袋）、冰乙酸（天津市风船化学试剂科技有限公司，500 mL/瓶）。

1.4动物模型处理

所有大鼠适应性饲养1周后开始建模。造模前大鼠禁食不禁水24 h，戊巴比妥钠溶液5 mL/kg腹腔注射麻醉后，将大鼠仰卧位固定、开腹，于胃窦前壁胃壁肌层与浆膜层之间注入100%冰乙酸0.03mL，覆盖网膜，缝合腹膜、腹壁各层组织和皮肤。

1.4.1动物分组及处理

将大鼠分为3组，每组3只，其中A组为正常组，不作任何处理；B组为模型组，建立胃溃疡模型后不给予治疗；C组为治疗组，建立胃溃疡模型后给予刺梨根治疗。

1.4.2模型给药

建模完成后开始给药，C组（治疗组）给予每天2 mL/100 g刺梨根煎液灌胃处理，1次/天，连续灌胃14 d。

1.4.3标本采集及处理

给药结束后1天，将大鼠麻醉后打开腹腔，分离腹主动脉，采用一次性采血针进行腹主动脉采血，采集的血液在室温静置后放入4℃离心机进行离心，取上清液-80℃保存。沿胃大弯剪开胃，展开铺平，冲洗胃内壁，观察胃黏膜大体标本情况。

1.5观察指标与检测方法

1）病理观察：使用生理盐水冲洗胃组织，将胃内容物冲出后，将胃取出并放入4%多聚甲醛4℃保存，用作后续病理观察；2）溃疡指数［9］：溃疡指数为游标卡尺测量的溃疡的最大长径和最大短径的乘积；3）溃疡抑制率：溃疡抑制率=（1-给药组溃疡面积/模型组溃疡面积）×100%；4）血清表皮生长因子（Epidermal growth factor，EGF）、白细胞介素-6（interleukine-6，IL-6）含量测定：采用ELISA法按试剂盒说明书步骤操作。

1.6统计学处理

采用统计软件SPSS 27.0进行数据分析。计量资表1溃疡指数及溃疡抑制率比较（x-±s）组别例数溃疡指数（mm2）溃疡抑制率（%）对照组3模型组3 84.6±4.97治疗组3 71.4±13.31 15.57%料采用（x-±s）表示，组间比较采用方差分析。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1大鼠一般状态

对照组大鼠精神状态良好、反应灵活、毛发光泽、大便正常。模型组大鼠造模后蜷卧恶动、毛发失去光泽、大便稀溏。治疗组大鼠治疗前也出现蜷卧恶动、大便或干或软，但刺梨根煎液灌胃后大鼠状态有所好转，表现出较模型组更为灵活的反应。

2.2病理分析

对照组（图1）胃黏膜层、固有层、肌层结构完整，固有腺体排列整齐，未见明显的炎性细胞浸润。与对照组相比，模型组（图2）胃黏膜层结构相对完整，腺体局部排列紊乱，出现不同程度的黏膜水肿糜烂，上皮细胞疏松脱落，可见大量炎性细胞浸润。与模型组相比，治疗组（图3）胃组织结构相对完整，固有腺体排列整齐，未见明显的炎性细胞浸润。由此说明刺梨根对胃溃疡有明显的治疗作用。

2.3溃疡指数比较

及溃疡抑制率与模型组相比，治疗组的溃疡指数明显降低（结果见表1）。

表1溃疡指数及溃疡抑制率比较

2.4 EGF、IL-6含量变化

与对照组相比，治疗组IL-6水平升高，EGF水平下降；与模型组相比，治疗组IL-6水平降低，EGF水平升高（结果见表2）。

表2 EGF、IL-6含量

图1对照组（左放大倍数100X，右放大倍数200X）

图2模型组（左放大倍数100X，右放大倍数200X）

图3治疗组（左放大倍数100X，右放大倍数200X）

3、讨论

胃溃疡属中医“胃脘痛”范畴，胃脘痛是胃气滞郁、气血不畅所致病证，主要表现为上腹胃脘部近心窝处经常发生疼痛。多见于西医的急慢性胃炎、胃及十二指肠溃疡、功能性消化不良等疾病。中医对胃脘痛的辨证分型有诸多见解。中华中医药学会脾胃病分会［10］将本病分为八个证型，其中就包括寒邪客胃证。《素问·至真要大论》中记载：“夫百病之生，皆生于风、寒、暑、湿、燥、火。”脾胃同居中焦，为气血生化之源，气机升降之枢纽，而寒性收引，易阻滞气机，使胃气失和而发生疼痛［11］。如《素问·举痛论》道：“寒气客于肠胃之间，膜原之下，血不能散，小络急引，故痛。”所以治法主要是温胃散寒，理气止痛［12］。

据《苗族医学》记载，刺梨性热，味酸、微涩，属热药，入冷经。功效为健脾消食、收敛止泻、生津，常用于牙痛、口腔溃疡及小儿消化不良等病的治疗［13］。资料显示，其化学成分主要为黄酮类、五环三萜类、维生素类、微量元素类、有机酸类，其他类成分主要为氨基酸、无机盐、SOD、PRRT等［14］，具有抗氧化、抗菌、防辐射及对胃溃疡的修复等药理作用［7］。郑波等［15］用刺梨汁进行干预治疗胃溃疡大鼠的实验数据表明，刺梨汁能提升胃液酸度、SOD活性、PGE2浓度，从而降低胃蛋白酶活性、MDA含量和溃疡指数，提示刺梨汁对胃黏膜有一定的修复作用。该团队后期实验还表明刺梨汁能显著升高大鼠的活动指数，降低溃疡面积，对乙酸性胃溃疡大鼠的治疗也有一定效果［16］。综上表明，刺梨根对胃黏膜具有良好的修复作用。

在生理情况下，胃黏膜具有完善的自我保护和修复机制，目前认为，只有当某些因素如Hp感染、大量服用非甾体抗炎药、急性应激等损害这一机制时，才可能导致胃酸和胃蛋白酶对胃黏膜的侵蚀，进而引起溃疡［3，17］。EGF是胃肠黏膜重要的修复因子。在正常情况下，EGF能促进营养的摄取吸收，胃上皮细胞的增殖、分化等；但当胃受到损伤时，EGF能保护上皮细胞，修护受损的胃黏膜，并且EGF还具有抑制胃酸分泌的作用［18］。IL-6是一种生物活性多肽物质，可调控T细胞活化与凋亡，是慢性炎症反应的重要环节，与中性粒细胞分泌TNF-α等细胞因子，共同参与胃黏膜炎症损伤［19］。由上可知，胃黏膜损伤时，EGF起到保护作用，而IL-6参与其炎症反应，对胃黏膜造成损害，起到攻击因子作用。

为了探讨刺梨根对寒邪客胃型胃溃疡大鼠的作用及其机制，本研究通过冰乙酸浆膜下注射法模拟寒邪客胃型胃溃疡大鼠模型，结果显示，治疗组大鼠比模型组大鼠一般状态好，HE染色结果提示，与模型组相比，治疗组大鼠胃黏膜损伤得到修复，无明显炎性细胞浸润；溃疡指数明显低于模型组，且溃疡抑制率为15.57%。ELISA结果显示，与对照组相比，模型组IL-6水平升高，EGF水平下降；与模型组对比，治疗组IL-6水平明显降低，EGF水平明显升高。结果表明，刺梨根可能通过调控EGF、IL-6水平，起到调节攻击因子与保护因子的平衡来保护胃黏膜的作用。

参考文献:

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[7]范春雪,邓玉林,张亚玺,等.刺梨药理活性研究进展[J].生命科学仪器,2021,19(2):14-21.

[8]王英.冰乙酸性大鼠胃溃疡模型制作方法比较[J].实用诊断与治疗杂志,2007(7):505-506.

[9]张敏,黄颖雪,李玮,等.加格略(重楼)蒸制前后抗胃溃疡药效研究[J].贵州科学,2020,38(5):35-39.

基金资助:贵州中医药大学大学生创新创业训练计划“苗药豆布托(刺梨根)对寒邪客胃型胃溃疡大鼠的作用及机制研究”[贵中医大创合字(2022)134号];

文章来源:王加丽,姚窕,陈俊芬,等.苗药豆布托(刺梨根)治疗寒邪客胃型胃溃疡大鼠的效果及机制研究[J].基层中医药,2025,4(07):108-112.