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从舌色探讨胰岛素抵抗型大鼠脾虚湿盛证特点

2025-02-10 82 上传者：管理员

摘要：目的：通过建立胰岛素抵抗型大鼠模型，比较胰岛素抵抗型大鼠和正常大鼠舌色，分析胰岛素抵抗型大鼠是否具有脾虚湿盛证特点。方法：将22只SD大鼠随机分为模型组和正常组。模型组大鼠通过喂养高脂饲料和增加环境湿度的方法创建胰岛素抵抗型大鼠模型，并模拟中医舌诊观察大鼠舌色，确定以淡白、淡红、红、深红、淡紫、深紫定性分析舌色，得出每只大鼠不同时间段的舌质颜色。按颜色梯度分级对舌色评分，设淡白1分、淡红2分、红3分、深红4分、淡紫5分、深紫6分，得出了舌色的定量数据。结果：通过对大鼠空腹血糖和空腹胰岛素数据进行分析，得出在第6周时，胰岛素抵抗大鼠造模成功；在大鼠舌色观察中发现，造模初期大鼠的舌色相对于正常组大鼠颜色更淡，以淡白、淡红为主，造模中期的大鼠舌色有变红的趋势，后期模型组大鼠舌色以淡红为主。结论：通过喂养高脂饲料和增加环境湿度方法创建的胰岛素抵抗型大鼠，可能经历了湿热、脾虚2个阶段，所以舌色也由淡舌转变为红舌，最后变为淡红，这符合过食肥甘厚腻易造成脾虚湿盛的临床现象。

关键词：
大鼠
胰岛素抵抗
脾虚湿盛证
舌色
葡萄糖摄取
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胰岛素抵抗是指各种原因使胰岛素促进葡萄糖摄取和利用效率下降，机体代偿性分泌过多胰岛素产生高胰岛素血症，以维持血糖的稳定［1］。胰岛素抵抗易导致代谢综合征和2型糖尿病，而胰岛素抵抗导致的长期慢性高血糖，可致使眼、神经、肾脏和心血管等组织和器官产生损害而出现一系列并发症，严重危害人体健康。曾建平［2］提出脾虚湿盛是导致老年人2型糖尿病胰岛素抵抗发生发展的根本病机，孟金金［3］也认为糖尿病前期最常见病机为脾虚湿盛，如以口中发甜为主症的脾瘅，即由于过食甘美肥味，导致内热中满蓄积于脾，脾气上溢于口，从而出现口甘之症状，日久可转发为消渴病。由于现代人过食肥甘厚味及气候的异常变化等原因，所以脾虚和湿浊痰饮在人体中很常见。所以结合临床实践，模拟临床现象，本实验通过饲喂高脂饲料和增加环境湿度的方法建立胰岛素抵抗模型［4］，观察模型组大鼠是否具有脾虚湿盛证的特点，通过内外湿因素是否能够构建脾虚湿盛证大鼠模型，并观察大鼠舌色情况，按评分标准对舌色进行统计，进而为相关的动物实验研究提供依据和参考。

1、材料和方法

1.1动物分组

与饲养22只SD雄性大鼠，体重为（160±20）g，由江西中医药大学实验动物科技中心提供［SCXK（赣）2018-0003］。适应性喂养1周后，随机分为模型组和正常组，各11只，分别喂养高脂饲料（60%脂含量）和普通饲料（10%含脂量）。以质量份数计，普通饲料具体配方：氯化胆碱0.1~0.3份、玉米20~30份、小麦30~40份、蜜糖酵母2~3份、磷酸氢钙1.5~2.5份、石粉0.8~1.2份、生长预混料1份、食盐0.2~0.4份、油2~3份、豆粕15~25份、鱼粉4~6份、酪蛋白8~12份；所述的高脂饲料，含脂量为60%；以质量份数计，具体配方：氯化胆碱0.1~0.3份、玉米20~30份、小麦30~40份、蜜糖酵母2~3份、磷酸氢钙1.5~2.5份、石粉0.8~1.2份、生长预混料1份、食盐0.2~0.4份、油2~3份、豆粕15~25份、鱼粉4~6份、酪蛋白8~12份，另添加黄油12~18份、猪油10~16份、胆固醇0.8~1.2份。所以高脂饲料是在正常维持饲料的基础上，添加黄油、猪油和胆固醇而得。动物饲养于江西中医药大学实验动物科技中心屏障系统大鼠房间［SYXK（赣）2017-0004］，自由进食与饮水，保持环境相对湿度（53±3）%，维持环境昏暗安静。

1.2体重和胰岛素抵抗指数的测定

［5］每周采集体重数据1次，隔4周采集血液1次，并按照相应的胰岛素试剂盒上操作流程检测，其检测仪器为多功能酶标仪（Spark 10M，瑞士Tecan）。胰岛素抵抗指数测定具体操作过程：大鼠禁食12 h后眼眶采血1 mL，于4℃、3 000 r/min离心10 min，分离血清，检测空腹血糖（FPG）及空腹胰岛素（FINS）含量。计算胰岛素抵抗指数=FPG×FINS/22.5。

1.3舌色信息的采集

在屏障系统房间里，大鼠适应采集环境1周，再正式开始舌色的采集。为使大鼠舌体更多地暴露在相同灯光背景下，用灌胃针在大鼠的上下牙齿上使力，使大鼠的嘴张开，吐出舌头，记录舌面的颜色深浅，以及大鼠的粪便情况、体重、食量、精神状况、毛发等，根据结果判断胰岛素抵抗大鼠模型是否具有脾虚湿盛证特点。

1.4评分方法

经过对大鼠舌色的观察及分析后，对舌面色泽深浅进行定量分级，初步拟定舌背面色泽深浅分级计分方法。舌背面色泽深浅分级如下：淡白1分、淡红2分、红3分、深红4分、淡紫5分、深紫6分。继而按舌色分为淡白舌组（1分）、红舌组（2~4分）、紫舌组（5~6分）。见图1。淡白淡红红深红淡紫深紫图1舌色图

2、结果

2.1胰岛素抵抗型大鼠造模第6周模型组大鼠的胰岛素抵抗指数明显大于正常组大鼠（P<0.05），说明第6周胰岛素抵抗大鼠模型造模成功。见表1、图2。正常组模型组

图2脾虚大鼠与正常大鼠的舌色图

2.2舌色在6次舌色观察中发现，造模第4周时，模型组大鼠舌色以淡舌为主，正常组以红舌为主，见表2，且模型组与正常组的舌色评分差异有统计学意义（P<0.05）。而随着高脂饲料的持续喂养，模型组大鼠舌色由初期的淡舌逐渐变为红舌，在造模后期，随着胰岛素抵抗型大鼠模型的建模成功，舌色又由红变为淡红。见表3、图3。

表2第4周不同舌色大鼠数量

表1 2组胰岛素抵抗指数比较

表3 2组大鼠不同时间舌色评分比较

图3 2组大鼠舌色分数随时间变化的趋势

3、讨论

中医对于舌的研究由来已久，从殷墟出土的甲骨文中就曾有“贞疾舌”的记载［6］，且对于脾虚证候，中医以舌淡苔少为表征，而湿热证，则表现为舌红苔腻［7］。陈小野等［8］研究发现，用耗气破气的方法创建脾虚大鼠模型以舌淡嫩，苔少为主。中医的“脾”相当于西医解剖学的脾脏和胰脏。脾主运化相当于胰腺的内、外分泌功能，脾通过升清营养周身的脏腑器官，相当于胰腺内分泌功能，实现其作用的物质基础则是胰岛素［9］。所以脾虚患者很大程度上有胰岛素抵抗，且通过健脾化痰可以改善由胰岛素抵抗造成的高血糖症［10-12］。有学者也认为胰岛素抵抗的常见病机为脾虚湿盛［2-3］，所以本研究在参考尹军祥等［13］关于血瘀证大鼠模型的舌色评价标准后，结合脾虚证［8, 14-17］、湿热证［18］和舌色［19］的相关研究，旨在研究以高脂饲料喂养和提高环境湿度的方法创建胰岛素抵抗型大鼠模型是否具有脾虚湿盛证特点。在对胰岛素抵抗型大鼠模型的舌色评定后发现，通过喂养高脂饲料和增加环境湿度的方法建立胰岛素抵抗型大鼠模型，可能产生了湿热和脾虚，因为造模中期模型组大鼠舌色变红，而色红者为热也，且点刺增多也说明了热象的产生［7］。这符合中医所说的“过食肥甘厚腻者，易生湿热”［20］，且在初期时，模型组和正常组舌色差异较大（P<0.05）。后期模型组大鼠舌色转为淡红，并结合中医临床症状，观察模型组大鼠体型、精神、毛色、反应、活动、饮食量、二便等情况［21］，发现模型组大鼠大便溏、便次增多，所以使用高脂饲料喂养大鼠和增加环境湿度的方法建立胰岛素抵抗型大鼠模型可能具有脾虚湿盛证特点。而后期随着大鼠年龄的增长，正常大鼠的舌色可能也因体质的衰退而出现虚证，所以模型组和正常组舌色都趋向于淡红（P>0.05）。在关于大鼠舌象观察的相关实验，一般是将大鼠麻醉后，再进行观察，而无相关实验排除麻醉剂本身对于大鼠舌象的影响［22］。所以结合临床实际情况，并且为了排除麻醉剂对舌象观察的影响，本实验采取活体动态望舌法［23］，即在进行环境适应和抓拿脱敏后，在未进行麻醉的情况下对大鼠进行舌象的采集。且在实验过程中，不同标准的照明体光源可使舌诊资料采集出现偏差，采用统一的光源进行舌色的望诊研究可以减少这方面的误差［24］。所以尽可能在昏暗的环境中，使用一个固定光源，以防误差太大。由于老鼠是在夜间活动，夜间老鼠更加兴奋，所以避免在夜间观察舌色，这样有利于活体老鼠的捉拿。对于大鼠舌色的观察发现，大鼠的舌色会随着情志的变化出现应激性的变紫，如惊恐、害怕等。所以需要实验员熟练捉拿大鼠，并且动作温和，发现舌色异常时，让大鼠休息片刻，待大鼠平静后再进行观察，以免产生较大的误差。·

参考文献:

[2]曾建平.中药降糖增敏汤治疗老年2型糖尿病胰岛素抵抗(脾虚湿盛证)的临床研究[D].济南:山东中医药大学, 2015.

[3]孟金金.健脾祛湿方治疗糖尿病前期(脾虚湿盛证)的临床研究[D].合肥:安徽中医药大学, 2023.

[4]左心真,王蒙蒙,董晓. 2型糖尿病小鼠模型的建立[J].青岛农业大学学报(自然科学版), 2022, 39(4): 259-264.

[5]曾国威,盛译萱,李冰涛,等.葛根芩连汤对糖尿病前期预防研究[J].中药新药与临床药理, 2019, 30(12): 1449-1453.

[6]甄雪燕,王利敏,梁永宣.舌诊开山之作《敖氏伤寒金镜录》[J].中国卫生人才, 2013(9): 88-89.

[7]陈家旭,邹小娟.中医诊断学[M]. 3版.北京:人民卫生出版社,2016: 248.

[8]陈小野,邹世洁.大鼠虚证模型舌象的病理规律[J].贵阳中医学院学报, 2001, 23(3): 54-57

.[9]何丹丹.健脾化痰活血法治疗2型糖尿病胰岛素抵抗的临床研究[D].南京:南京中医药大学, 2017.

[10]张永涛.论脾与2型糖尿病胰岛素抵抗的关系[J].河南中医,2001, 21(6): 3-5.

基金资助:国家自然科学基金项目(81760787,82460857);江西省教育厅科技项目(GJJ 2200926);江西省中医药中青年骨干人才项目(赣中医药科教字[2021]2号);江西省卫生健康委员会科技计划项目(202131054,202131047);江西中医药大学校级科技创新团队发展计划项目(CXTD22007);

文章来源:张雅莉,曾治君,周云,等.从舌色探讨胰岛素抵抗型大鼠脾虚湿盛证的特点[J].江西中医药大学学报,2025,37(01):98-101.