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饥饿条件下敲低SphK1通过调控自噬抑制结肠癌细胞的增殖

  • 作者:林兰  朱丽叶  罗世波  吴江妮  刘诗权
  • 单位:广西医科大学第二附属医院消化内科

摘要:

目的:探讨在营养缺乏的肿瘤微环境中,敲低鞘氨醇激酶1(SphK1)后调控的自噬对人结肠癌RKO细胞增殖的影响及其机制。方法:Western blot检测正常结肠黏膜细胞ncm460和结肠癌RKO细胞SphK1表达、细胞外信号调节激酶(ERK)信号通路和自噬水平差异;用平衡盐溶液EBSS以不同干预时间(0 h、2 h、4 h、6 h)处理结肠癌RKO细胞,选取自噬激活最明显的时间进行后续实验;采用慢病毒siRNA-NC和siRNA-SphK1转染结肠癌RKO细胞;在EBSS干预4 h模拟营养缺乏的肿瘤微环境下,用CCK8和Western blot分别检测对照组(NC-RKO)和低表达SphK1组[SphK1(-)-RKO]细胞的存活率和SphK1、p-ERK和自噬水平的变化;再以ERK抑制剂u0126(10μmol/L)、自噬抑制剂3-MA(10 mmol/L)处理NC-RKO细胞,用CCK8和Western blot分别检测各组细胞的存活率和p-ERK、自噬水平的变化。结果:与正常结肠黏膜细胞ncm460相比,结肠癌细胞中SphK1、p-ERK、自噬水平均增加;在营养缺乏的肿瘤微环境下,低表达的SphK1抑制细胞的存活率,降低p-ERK、自噬水平;u0126和3MA处理后抑制NC-RKO细胞的增殖活性,降低自噬水平,u0126处理能够降低p-ERK的表达,而3MA处理后p-ERK无明显改变,差异均有统计学意义(P<0. 05)。结论:在营养缺乏的肿瘤微环境中,抑制SphK1能有效抑制结肠癌细胞的增殖,其机制可能是通过调控ERK信号通路而抑制自噬来实现的。

  • 【基   金】:
  • 国家自然科学基金资助项目(No.81460380)
  • 广西自然科学基金资助项目(No.2017GXNSFAA198019)

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期刊名称:广西医科大学学报

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期刊详情

主管单位:广西医科大学

主办单位:广西医科大学

出版地方:广西

专业分类:医学

国际刊号:1005-930X

国内刊号:45-1211/R

邮发代号:48-178

创刊时间:1971年

发行周期:月刊

期刊开本:大16开

见刊时间:4-6个月

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