摘要：

目的建立串联质谱(MS/MS)检测极长链酰基肉碱(VLCAC)和溶血磷脂酰胆碱(LPC)的方法,初步探讨VLCAC和LPC对X-连锁肾上腺脑白质营养不良病(X-ALD)的诊断价值。方法选取被明确诊断为X-ALD的患儿10例和行遗传代谢性疾病筛查的正常新生儿3 530名。收集所有对象的滤纸干血片样本,使用含稳定同位素内标[2H3-二十六碳酰基肉碱(2H3-C26)和2H4-二十六碳溶血磷脂酰胆碱(2H4-C26:0-LPC)]的溶剂萃取滤纸干血片样本中的VLCAC和LPC(非衍生化法),直接采用MS/MS检测二十碳酰基肉碱(C20)、二十二碳酰基肉碱(C22)、二十四碳酰基肉碱(C24)、二十六碳酰基肉碱(C26)、二十碳溶血磷脂酰胆碱(C20:0-LPC)、二十二碳溶血磷脂酰胆碱(C22:0-LPC)、二十四碳溶血磷脂酰胆碱(C24:0-LPC)和二十六碳溶血磷脂酰胆碱(C26:0-LPC)。对建立的MS/MS方法进行方法学评价(精密度、准确度、线性)。采用偏最小二乘法分析各项指标对疾病的贡献度。采用受试者工作特征(ROC)曲线评估各项指标诊断X-ALD的效能。结果低水平C26和C26:0-LPC的批内变异系数(CV)分别为4.16%和7.75%,批间CV分别为8.29%和9.17%;高水平C26和C26:0-LPC的批内CV分别为5.57%和8.68%,批间CV分别为7.45%和8.11%。准确度为93.25%～104.94%。C26和C26:0-LPC实测值与预测值之间的决定系数(r2)分别为0.996和0.994。除C20、C24:0-LPC/C20:0-LPC、C24:0-LPC/C22:0-LPC、C26:0-LPC/C20:0-LPC外,其他指标正常对照组与X-ALD组差异均有统计学意义(P<0.05)。C26、C26/C22比值和C26:0-LPC对疾病的贡献度最高(偏回归系数分别为0.175 3、0.130 0和0.079 2)。ROC曲线分析结果显示,C26和C26/C22比值诊断X-ALD的敏感性均为100%,特异性均为100%,曲线下面积(AUC)均为1.0;C26:0-LPC诊断X-ALD的敏感性为100%,特异性为72.9%,AUC为0.972。结论非衍生化MS/MS检测VLCAC和LPC有较高的精密度和准确度,C26或可作为诊断X-ALD的生物标志物。