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慢病毒介导的microRNA-19b表达对鼻咽癌细胞凋亡及Wnt/β-catenin信号的影响

  • 作者:王申  金建平  夏兵华  常涛
  • 单位:苏州市第九人民医院耳鼻咽喉科

摘要:

目的研究慢病毒介导的microRNA-19b(miR-19b)表达对鼻咽癌细胞凋亡及Wnt/β-catenin信号的影响。方法实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测鼻咽癌组织及人永生化鼻咽上皮细胞系NP69和鼻咽癌细胞系HONE1、5-8F和CNE1中mi R-19b表达。构建mi R-19b抑制表达(mi R-19b inhibitor)、mi R-19b过表达和无意义序列(Scrambled)的慢病毒载体(mi R-19b mimics),并设定空白组,转染鼻咽癌细胞系HONE1,q RT-PCR检测慢病毒转染细胞后细胞中mi R-19b的表达;MTT法检测慢病毒转染细胞24、48和72 h后的细胞活力;流式细胞仪检测慢病毒转染细胞48 h的细胞凋亡率;Western blotting检测Ki-67、p53、β-连环蛋白(β-catenin),Cyclin D1和C-myc的蛋白表达。结果 miR-19b在鼻咽癌组织及细胞中表达升高(P <0.05)。Scrambled组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05),与空白组比较,mi R-19b inhibitor组mi R-19b的表达降低,miR-19b mimics组mi R-19b的表达升高(P <0.05);与空白组比较,miR-19b inhibitor组在48和72 h的细胞活力降低,而mi R-19b mimics组在48和72 h的细胞活力升高(P <0.05);与空白组比较,mi R-19b inhibitor组细胞凋亡率及p53的表达升高,Ki-67、β-catenin、Cyclin D1和C-myc的表达降低,mi R-19b mimics组细胞凋亡率及p53的表达降低,Ki-67、β-catenin、Cyclin D1和C-myc的表达升高(P <0.05)。结论抑制mi R-19b表达可降低鼻咽癌细胞活力,诱导细胞凋亡及下调Wnt/β-catenin信号通路,而过表达miR-19b则反之。

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期刊名称:中国现代医学杂志

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期刊详情

主管单位:中华人民共和国教育部

主办单位:中南大学,卫生部肝胆肠外科研究中心

出版地方:湖南

专业分类:医学

国际刊号:43-1225/R

国内刊号:1005-8982

邮发代号:42-143

创刊时间:1991年

发行周期:半月刊

期刊开本:大16开

见刊时间:4-6个月

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