摘要:以华容大叶芥菜(HLLM)和高菜(Brassicajunceavar.integlifolia,BJVI)为原料,测定和分析比较其自然发酵过程中的主要化学成分。结果表明:BJVI中的水分、脂肪、蛋白质、维生素C、氨基酸态氮和磷的质量分数高于HLLM的,HLLM中的可溶性总糖、总酸、膳食纤维、钙、铁的质量分数高于BJVI的;新鲜HLLM的硫代葡萄糖苷总量高于新鲜BJVI的,新鲜HLLM和BJVI中硫代葡萄糖苷总量分别为50.23、46.38μmol/g,茎皮、叶柄、茎髓、叶片中的硫代葡萄糖苷总量依次减少;自然发酵过程中,HLLM和BJVI中的可溶性总糖、膳食纤维、蛋白质、脂肪、维生素C质量分数和硫代葡萄糖苷总量都随发酵时间的延长而下降,总酸和氨基酸态氮含量则随发酵时间的延长而增加;新鲜HLLM和BJVI中分别鉴定出7、11种主要的挥发性成分,其中异硫氰酸烯丙酯相对含量最高,分别为92.83%和85.98%;HLLM和BJVI经过发酵后产生大量挥发性成分,共鉴定出酯类、醇类、醛类、酸类、酮类、烃类、腈类、酚类、多硫化合物和其他化合物10类,共93种化合物,异硫氰酸烯丙酯相对含量明显下降。可见,新鲜HLLM和BJVI化学成分比较全面,硫代葡萄糖苷总量较高,具有较高的食用和应用价值;发酵HLLM和BJVI的风味独特、味道醇厚。
芥菜(Brassicajuncea(L.)Czern.etCoss.)属于十字花科芸薹属1年生草本植物[1]。华容大叶芥菜(HLLM)是湖南省华容县的优选芥菜品种,其主要特点为植株叶脉和叶片呈绿色,叶柄宽厚,质地脆嫩。高菜(Brassicajunceavar.integlifolia,BJVI)属于叶用芥菜宽柄芥变种,叶片宽大,叶脉呈紫色[2]。芥菜作为中国的特色蔬菜,分布在长江以南各省。目前,湖南省华容县已是全国最大的叶用芥菜生产基地。2019年,华容全县芥菜种植面积达3万hm2,并形成了芥菜加工产业集群,其芥菜产品热销国内外[3,4]。
芥菜叶富含叶绿素、β–胡萝卜素、抗坏血酸、钾、钙、膳食纤维、黄酮类和硫代葡萄糖苷(简称硫苷,GSL)等营养和生物活性物质[5,6]。近年来,芥菜的植物化学及其功能成分的研究引起了科学界的广泛关注,但多数集中在发酵工艺优化和挥发性物质分析[7,8,9],发酵过程中的理化指标及其品质分析[10,11,12],矿物质[13]、氨基酸[14,15,16]、总黄酮[17,18]含量分析等,尚无HLLM和BJVI的主要化学成分及其在发酵过程中的变化规律的系统研究。本研究中,以新鲜及不同发酵时期的HLLM和BJVI为原料,测定和分析比较其水分、可溶性总糖、脂肪、蛋白质、维生素C、氨基酸态氮、膳食纤维、总酸、矿物质元素(钙、铁、磷)的质量分数及GSL总量;采用顶空固相微萃取结合气相色谱–质谱联用技术(HS–SPME–GC–MS)对自然发酵过程中HLLM和BJVI中的挥发性成分进行鉴定分析,旨在为探索新鲜和发酵芥菜的营养价值和合理利用芥菜资源提供依据。
1、材料与方法
1.1材料
供试新鲜HLLM和BJVI来自湖南省华容县芥菜基地。
1.2方法
1.2.1样品处理
鲜样处理。采摘后的HLLM和BJVI清洗去除表面污泥,擦去多余水分,用自封袋包装好后,于–80℃超低温冰箱保存,用于测量水分、钙、铁、磷、总酸、维生素C的质量分数。
干样处理。将HLLM和BJVI洗净后,分别选取整株、叶片(指不包含叶柄的叶子部位)、叶柄、茎皮和茎髓切成小段,分别真空冷冻干燥后用高速中药粉碎机粉碎,过孔径0.25mm筛,装袋密封,于–80℃超低温冰箱保存,用于测量可溶性总糖、脂肪、蛋白质、氨基酸态氮、膳食纤维的质量分数和GSL总量。
发酵样品处理。采摘后的HLLM和BJVI清洗去除表面污泥,晾干,整棵放入发酵桶,每铺1层菜便撒1层盐(盐的质量为鲜菜质量的15%),菜和盐铺撒好后用重物压住,进行自然发酵。发酵周期70d。每隔10d取1次样。取样后与新鲜芥菜同样处理。
1.2.2主要营养成分和GSL总量的测定
参照文献[19,20,21,22,23,24]的方法,测定芥菜样品中的水分、可溶性总糖、脂肪、蛋白质、氨基酸态氮、维生素C、膳食纤维、总酸、钙、铁、磷的质量分数和GSL总量。
1.2.3挥发性成分的测定
参照文献[7]的方法,利用HS–SPME–GC–MS(7890B–5975CGC–MS联用仪为Agilent的产品,SPME装置手柄、固定搭载装置50/30μmDVB/CAR/PDMS萃取头为Supelco的产品)测定芥菜样品中挥发性成分的相对含量。
1.3数据处理
试验数据运用Excel2007整理,利用SPSS19.0进行统计分析,采用LSD进行差异显著性检验。
2、结果与分析
2.1新鲜HLLM与BJVI中的主要营养成分和GSL
由表1和表2可知,新鲜HLLM和BJVI中都含有丰富的营养成分;BJVI中的水分、脂肪、蛋白质、维生素C、氨基酸态氮和磷的质量分数高于HLLM的;HLLM中的可溶性总糖、总酸、膳食纤维、钙、铁的质量分数及GSL总量高于BJVI的;茎皮、叶柄、茎髓、叶片中GSL总量依次减少。
表1新鲜HLLM与BJVI中的矿物质质量分数及GSL总量
表2发酵过程中HLLM与BJVI中的主要营养成分质量分数和GSL总量
2.2HLLM与BJVI发酵过程中主要营养成分和GSL的变化
HLLM与BJVI发酵过程中主要营养成分和GSL的变化情况列于表2。除含水量外,同一发酵时间,2种芥菜发酵样品中的营养成分高低与新鲜芥菜中的一致,BJVI中的脂肪、蛋白质、维生素C、氨基酸态氮的质量分数高于HLLM的;HLLM中的可溶性总糖、总酸、膳食纤维的质量分数高于BJVI的。
在发酵过程中,HLLM和BJVI中的含水量都呈现下降趋势,发酵初期(0~20d)下降速度较快,到后期下降较缓。其主要原因:在发酵初期,外界盐浓度较高,导致细胞失水,含水量下降快;发酵后期,当芥菜细胞内外盐浓度达到平衡,渗透压下降,水分转移少,含水量下降缓慢。两者的可溶性总糖、膳食纤维、脂肪的质量分数在发酵期间都呈现下降趋势。其主要原因:糖类在微生物发酵作用下转化为有机酸或二氧化碳、乙醇、乳酸等,还有其他的生化反应过程也可能导致可溶性总糖的下降;发酵期间由于微生物的存在,一些膳食纤维可被微生物利用降解而产生短链脂肪酸及烷烃类物质,脂肪被分解产生一些脂肪酸等香味物质,从而导致了膳食纤维和脂肪质量分数的整体下降。两者的蛋白质质量分数在发酵期间都呈现缓慢下降趋势,这是由于在微生物的作用下,蛋白质降解为氨基酸态氮及其他香味成分,但由于高盐条件对微生物及蛋白酶起到一定的抑制作用,蛋白质质量分数下降速度较缓。两者的维生素C质量分数在发酵期间都呈现下降趋势,发酵70d后,2种芥菜中维生素C的损失率接近85%。发酵过程芥菜中水分的流失及光、热、氧化反应等都是引起芥菜中的维生素C损失的原因。
HLLM和BJVI中的总酸和氨基酸态氮质量分数在发酵期间都呈现上升趋势。在自然发酵过程中,由于乳酸菌的作用,随着其产酸能力的不断增强,总酸量也不断增加。氨基酸态氮的变化主要有2个方面的影响:一是由于蛋白酶及微生物的作用,将蛋白质降解,从而导致氨基酸态氮量逐渐增加;二是氨基酸同时也作为微生物的营养成分被利用而逐渐减少。
发酵10、20、30d时,BJVI中GSL总量高于HLLM的,其他发酵时间段的HLLM中GSL总量高于BJVI的,两者的GSL总量在发酵期间都呈下降趋势。发酵70d后,2种芥菜中GSL总量下降接近85%。发酵期间芥菜GSL总量下降的可能原因:一是芥菜采摘及处理过程中受到的机械损伤,会导致芥菜中的GSL与黑芥子酶结合,GSL降解为异硫氰酸酯、异硫氰酸盐、腈类化合物等挥发性物质;二是加盐腌制,芥菜中部分GSL在盐溶液中发生化学降解;三是发酵初期,芥菜温度升高,造成部分GSL的降解损失;四是微生物及其代谢产物可能引起部分GSL降解损失。
2.3HLLM与BJVI发酵过程中挥发性物质的变化
HLLM和BJVI在发酵过程中共鉴定出93种挥发性成分,分别为酯类、醇类、酮类、酸类、腈类、醛类、酚类、烃类、多硫化合物及其他化合物,共10类(表3),其中,除发酵70d的BJVI外,酯类化合物异硫氰酸烯丙酯(AITC)的相对含量均最高;挥发性化合物的种类和相对含量因芥菜品种和发酵阶段不同有很大差别。
表3发酵过程中HLLM与BJVI中主要挥发性化合物的相对含量和种类
新鲜HLLM中共鉴定出7种主要的挥发性成分,其中酯类化合物5种,分别是AITC(92.83%)、2–苯基乙基异硫代氰酸酯(1.25%)、3–丁烯基异硫氰酸酯(1.19%)、甲基丁基异硫氰酸酯(0.49%)、异硫氰酸仲丁酯(0.34%);醇类化合物1种,即3–己烯–1–醇(1.44%);腈类化合物1种,即丁烯腈(0.12%)。挥发性化合物的种类随发酵时间延长不断变化,至60d时,挥发性化合物种类增至最多,达31种,增加的主要化合物为醇类、腈类、醛类化合物;但发酵到70d时,挥发性化合物的种类降至22种,其相对含量也降至50.25%,尤其是AITC大量减少。
新鲜BJVI中共鉴定出11种主要的挥发性成分,其中酯类化合物5种,分别是AITC(85.98%)、3–丁烯基异硫氰酸酯(1.25%)、异硫氰酸–2–苯乙酯(1.30%)、甲基丁基异硫氰酸酯(0.48%)、异硫氰酸异丁酯(0.11%);醇类化合物2种,分别是苯乙醇(0.05%)、叶醇(1.57%);腈类化合物1种,即3–苯基丙腈(0.07%);醛类化合物1种,即葵醛(0.04%);多硫化合物2种,分别是二甲基二硫(0.08%)和二甲基三硫(0.07%)。首先,挥发性化合物的种类随发酵时间延长不断增加,至40d时,化合物种类增至最多,达40种,增加的主要化合物为酯类、醇类、腈类、醛类、烃类化合物,之后挥发性化合物的种类随发酵时间延长逐渐减少,70d时降至36种,其相对含量也降至69.32%,尤其是AITC大量减少。
发酵过程中,HLLM和BJVI中酯类物质的相对含量均随发酵时间延长呈递减的趋势,发酵至70d时,其相对含量分别减少了65.95和76.70个百分点,两者的酯类化合物种类差别不大,但HLLM中酯类物质的相对含量均高于BJVI的。发酵初期以AITC为主,其次是3–丁烯基异硫氰酸酯;发酵中后期,由于芥菜中GSL的酶解及微生物产生生化反应等,AITC相对含量减少,产生了异硫代氰酸丁酯、邻苯二甲酸二乙酯、2–甲基丁酸乙酯、十三烷酸甲酯、十六酸乙酯等酯类物质,赋予了发酵芥菜更丰富的酯类香味成分。
发酵过程中,由于微生物酵母菌的参与,醇类化合物的产生不可或缺,发酵50~70d时,2种芥菜中醇类化合物的相对含量和种类均保持在较高水平。70d时,HLLM中醇类化合物的总相对含量为8.98%,主要为苯乙醇(4.35%)、3–己烯–1–醇(1.14%)和3–甲基–1–丁醇(1.27%)等;而BJVI中醇类化合物的总相对含量高达20.31%,主要为苯乙醇(8.29%)、叶醇(2.07%)、异戊醇(2.12%)、顺–2–戊烯醇(2.20%)、2–甲基–1–丁醇(1.46%)、正戊醇(3.73%)等。醇类化合物在发酵过程中占有比较重要的部分,尤其在发酵后期,醇类物质还与有机酸反应生成具有香味的酯类化合物。
HLLM和BJVI发酵过程中产生的酮类化合物相对较少,主要有反式β–紫罗兰酮、4–哌啶酮、2–氮己环酮、1–乙酰基–4–哌啶酮、1–戊烯–3–酮。酮类化合物是具有甘草气味的微生物代谢产物,但酮类化合物不稳定,在发酵后熟过程中可能会形成相应的酸和醇,酮类化合物种类和相对含量都会减少,发酵到70d时,BJVI中未检出酮类化合物。
2种芥菜发酵过程中检测出的挥发性酸类化合物均较少。HLLM发酵前期主要检出3–羟基邻氨基苯甲酸、乙酸、乙二酸,而在发酵后期未检出酸类化合物;BJVI发酵过程中产生的酸类化合物主要是2–甲基丁酸,虽相对含量较低,但整个发酵过程中呈现递增趋势,发酵至70d时,2–甲基丁酸相对含量为0.84%。酸类化合物是发酵芥菜中的一种重要滋味成分,但大部分都是以有机酸呈现,而挥发性酸含量通常较少。
HLLM与BJVI发酵过程中腈类化合物相对含量和种类总体呈现递增趋势,其中苯代丙腈是2种发酵芥菜中都检出的腈类化合物,发酵至70d时,BJVI中苯代丙腈相对含量高达5.14%。除此之外,HLLM发酵过程中还检测出丁烯腈、3–丁腈、2–丁腈,BJVI发酵过程中还检测出4–(甲硫基)丁腈、3–苯基丙腈、4–甲基戊腈。
发酵过程中2种芥菜的醛类化合物不断变化,发酵至60d时,HLLM和BJVI中醛类化合物相对含量分别为5.70%和13.13%,都各自包含了11种不同的化合物,其中壬醛相对含量较高,HLLM和BJVI中分别为1.80%和4.71%,还有癸醛、庚醛、苯甲醛、苯乙醛、2–己烯醛、丙烯醛等共同为芥菜贡献甜香风味。
BJVI发酵过程中酚类化合物的相对含量随发酵时间延长而呈递增趋势。除发酵10d外,BJVI中酚类相对含量均高于HLLM的。BJVI中主要有4–乙基愈创木酚、4–乙烯基愈创木酚、对乙基苯酚,HLLM中主要有2–甲氧基–4–乙烯基苯酚和2–乙基苯酚,这些酚类化合物主要是带有苯环的芳香酚,具有香辛料和草药的香气。
HLLM与BJVI发酵过程中烃类化合物随发酵时间延长呈不规则变化。发酵开始至50d时,BJVI中烃类化合物的相对含量较HLLM中的高,主要以苯乙烯、2,2–二甲基丁烷为主。烃类物质具有特殊的香气,但由于香气阈值较高,对发酵芥菜风味的贡献较小。
发酵过程中2种芥菜中的多硫化合物相对含量都较低,共有4种,主要有二甲基二硫、二甲基三硫,其中二甲基二硫具有蔬菜香,二甲基三硫具有大蒜味和焦香,对发酵芥菜的风味影响较大。
除发酵30、40d外,BJVI中其他化合物的相对含量和种类均较HLLM中高,主要以杂环化合物为主,包括5–甲基噻唑、2–甲基噻唑、1,3,5–三嗪、2–乙基–2–唑啉、2–正丙基呋喃、2,3–二氢苯并呋喃等,其中吡嗪、呋喃等具有坚果香味,对芥菜整体风味的形成具有协同作用。
3、结论与讨论
HLLM和BJVI是湖南省华容县腌制蔬菜加工的主要原料。本研究中,分析了HLLM和BJVI自然发酵过程中的主要化学成分,HLLM与BJVI中含有蛋白质、糖类、维生素C和矿物质等营养成分,其含量基本与刘独臣等[18]报道的四川叶用芥菜的主要营养成分一致。BJVI中水分、脂肪、蛋白质、维生素C、氨基酸态氮和磷的质量分数高于HLLM的;HLLM中可溶性总糖、总酸、膳食纤维、钙、铁的质量分数高于BJVI的。
GSL是植物的一种含硫次生代谢产物,可通过酶降解、热降解和化学降解3种降解途径生成具有鲜、香、苦、辣风味的异硫氰酸酯等降解产物,是十字花科蔬菜风味和气味形成的重要前体物质,也是十字花科蔬菜的重要生物活性成分。本研究中,HLLM的GSL总量高于BJVI的,新鲜HLLM、BJVI整叶中GSL总量分别为50.23、46.38μmol/g,均高于孙秀波等[25]报道的芥菜中GSL总量(32.17μmol/g),也高于大部分十字花科蔬菜的GSL总量(白菜类32.26μmol/g、萝卜类20.82μmol/g),但低于甘蓝类的GSL总量(295.24μmol/g)。HLLM和BJVI不同部位的GSL总量存在差异,茎皮、叶柄、茎髓、叶片中GSL总量依次减少。GSL及其降解产物具有多种生物活性,如抗癌[26]、抗炎[27]等。基于HLLM和BJVI中含有较高的GSL及其降解产物,HLLM和BJVI不仅是风味独特的蔬菜,还是具有一定保健功能的蔬菜,可作为制备GSL及其降解产物的重要原料。可见,HLLM和BJVI具有较高的食用和应用价值。
本研究中,HLLM和BJVI发酵过程中可溶性总糖、蛋白质、膳食纤维、脂肪、维生素C质量分数和GSL总量都随发酵时间的延长而下降。HLLM和BJVI发酵70d后,维生素C质量分数和GSL总量下降接近85%,而总酸和氨基酸态氮质量分数则随发酵时间的延长而增加。这是由于微生物的发酵作用和芥菜自身的生化反应,使部分物质在发酵过程中降解并转化成其他成分,如:可溶性总糖被微生物利用转化为有机酸;蛋白质分解后质量分数降低,而其降解产物氨基酸态氮质量分数增加[28];烯丙基硫代葡萄糖苷等大分子硫苷降解后GSL总量降低。
本研究中,新鲜HLLM中共鉴定出7种挥发性成分,分别是异硫氰酸烯丙酯(92.83%)、2–苯基乙基异硫代氰酸酯(1.25%)、3–丁烯基异硫氰酸酯(1.19%)、甲基丁基异硫氰酸酯(0.49%)、异硫氰酸仲丁酯(0.34%)、3–己烯–1–醇(1.44%)及丁烯腈(0.12%)。这与陈艳等[29]检测出新鲜HLLM中挥发性成分5种(异硫氰酸烯丙酯、3–丁烯基异硫氰酸酯、苯乙酸苯乙酯、异硫氰酸苯乙酯、壬醛)的报道略有差异,可能是样品或样品处理差异的原因。新鲜BJVI中共鉴定出11种挥发性成分,分别是异硫氰酸烯丙酯(85.98%)、3–丁烯基异硫氰酸酯(1.25%)、异硫氰酸–2–苯乙酯(1.30%)、甲基丁基异硫氰酸酯(0.48%)、异硫氰酸异丁酯(0.11%)、苯乙醇(0.05%)、叶醇(1.57%)、3–苯基丙腈(0.07%)、葵醛(0.04%)、二甲基二硫(0.08%)和二甲基三硫(0.07%)。可见,HLLM和BJVI由于品种不同,其挥发性成分存在差异,但异硫氰酸烯丙酯是新鲜HLLM和BJVI中的主要挥发性成分。这是由于未采收的芥菜中烯丙基硫代葡萄糖苷含量很高;采收后,在自身酶的作用下,烯丙基硫代葡萄糖苷就会立刻降解,产生大量异硫氰酸烯丙酯[30,31,32]。
HLLM和BJVI发酵后会产生大量挥发性成分。本研究中,从新鲜和发酵的HLLM和BJVI中共鉴定出10类共93种挥发性成分,比陈艳等[29]报道的多,但挥发性成分种类一致,包括酯类、醇类、醛类、酸类、酮类、烃类、腈类、酚类、多硫化合物和其他化合物,发酵丰富了芥菜的风味。HLLM和BJVI在自然发酵过程中挥发性成分种类整体呈先增加后减少的趋势,而挥发性成分的相对含量整体呈下降的趋势。这是由于发酵前期微生物的发酵作用和芥菜自身的生化反应比较活跃,许多大分子物质降解或转化为小分子物质,从而形成大量挥发性风味物质;发酵后期微生物的发酵作用和芥菜自身的生化反应减缓,而小分子挥发性风味物质又不断挥发。具体的挥发性风味物质在发酵过程中种类和相对含量的变化不尽相同,HLLM和BJVI挥发性酯类物质相对含量整体分别减少了65.95和76.70个百分点,其中异硫氰酸烯丙酯相对含量分别减少70.11和74.66个百分点。这是由于发酵过程中芥菜中烯丙基硫代葡萄糖苷总量减少,其降解产物异硫氰酸烯丙酯也大量减少,这也是芥菜发酵后辛辣味明显下降的主要原因。HLLM和BJVI发酵过程中产生了腈类化合物苯代丙腈,这与文献[7,10]中报道的一致。腈类化合物强烈的香气对发酵芥菜的风味贡献较大,主要通过异硫氰酸酯类化合物的降解反应生成[10]。挥发性醇类、酚类、酸类和腈类物质的相对含量整体呈增加的趋势,它们是形成发酵芥菜独特风味的重要物质。
新鲜HLLM和BJVI营养成分比较全面,GSL总量较高,是风味独特、具有一定保健功能的蔬菜,也是加工发酵蔬菜和制备GSL及其降解产物的重要原料,具有较高的食用和应用价值。HLLM和BJVI经发酵后产生了酯类、醇类、醛类、酸类、酮类、烃类、腈类、酚类、多硫化合物和其他化合物10类挥发性风味物质,辛辣味物质异硫氰酸烯丙酯明显下降。发酵芥菜风味独特、味道醇厚,其保健作用有待进一步研究。
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2024-01-07城市污泥是城市生活、生产等污水通过厌氧、好氧、沉降、脱水等处理过程中产生的副产物,既含有大量有机质、氮、磷等营养成分,又含有重金属、有机污染物和病原菌等有害物质[1]。随着经济的快速发展、人口的迅速增加和城市化进程的推进,污泥产量日益增加。城市污泥属于二次污染物,人们常采用直接填埋、干燥后焚烧利用其热能、热解产生有机组分再利用[2]等方法进行处理。由于城市污泥含有有机质、氮、磷等营养成分,将其发酵堆肥进行利用是目前污泥资源化利用最普遍的方法。
2024-01-05庄浪县属陇东黄土高原丘陵沟壑区,是甘肃省典型的旱作农业区。玉米是庄浪县的主要粮食作物之一,常年播种面积在1.28万hm2以上,总产粮食16.4万t, 是本县农民收入的重要来源。近年来,随着庄浪县牛产业的发展及所需饲草量的逐年增加,为了筛选出更适合陇东旱地梯田粮饲兼用型玉米品种的问题迫在眉睫。
2024-01-05大豆(Glycine max)原产于中国,已有5 000年栽培历史。国家统计局发布2022年大豆产量2 028万t,比上年增产23.7%,但自给率仍然不足。大豆产量的提高需要靠群体生产,合理密植。不同的种植密度会影响大豆的株型、冠层和群体结构进而影响大豆的产量。株高、节间长度和数量、叶柄长度和叶柄夹角作为大豆株型结构的重要组成部分,对于大豆冠层的分布,建立一个合适的群体冠层结构至关重要(Reinhardt,Kuhlemeier,2002;Wilcox,Sediyama,1981;Wang et al.,2
2023-12-28人气:6547
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期刊名称:南京农业大学学报
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主管单位:中华人民共和国教育部
主办单位:南京农业大学
出版地方:江苏
专业分类:农业
国际刊号:1000-2030
国内刊号:32-1148/S
邮发代号:28-53
创刊时间:1956年
发行周期:双月刊
期刊开本:大16开
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