目的:构建弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒,并观察其在小鼠胚胎成纤维细胞系NIH3T3细胞中的表达。方法:采用聚合酶链反应(PCR)法分别扩增弓形虫SAG1和GRA1基因片段,导入质粒载体pc DNA3. 1(+),构建真核表达重组质粒pc DNA3. 1(+)-SAG1和pc DNA3. 1(+)-GRA1,继而构建重组质粒pc DNA3. 1(+)-SAG1-GRA1;设pc DNA3. 1(+)-SAG1-GRA1为实验组、pc DNA3. 1(+)为对照组分别转染NIH3T3细胞,采用免疫荧光染色法鉴定其在NIH3T3细胞中的表达。结果:限制性内切酶双酶切及DNA测序分析结果显示,插入pc DNA3. 1(+)的片段分别为1 008 bp、570 bp和1 578 bp,与预期的SAG1、GRA1和SAG1-GRA1复合基因分子大小相当、序列一致;免疫荧光染色法结果显示,转染重组质粒pc DNA3. 1(+)-SAG1-GRA1的NIH3T3细胞内观察到较强的绿色荧光,而转染pc DNA3. 1(+)的NIH3T3细胞内未见绿色荧光。结论:成功构建了弓形虫SAG1-GRA1复合基因真核表达重组质粒pc DNA3. 1(+)-SAG1-GRA1,且该重组质粒携带的SAG1-GRA1复合基因在NIH3T3细胞中获得表达。
贵州医科大学学报目录
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期刊名称:贵州医科大学学报
期刊人气:3284
主管单位:贵州医科大学
主办单位:贵州医科大学
出版地方:贵州
专业分类:医学
国际刊号:1000-2707
国内刊号:52-1164/R
邮发代号:66-48
创刊时间:1958年
发行周期:月刊
期刊开本:大16开
见刊时间:7-9个月
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