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DAB2IP稳定细胞系的构建及其对结直肠癌HT29细胞侵袭迁移能力的影响

  • 作者:来森艳  胡发涌  吴维  李国东  李小兰  曹小年
  • 单位:华中科技大学同济医学院附属同济医院

摘要:

目的构建DAB2IP高表达的结直肠癌HT29稳定细胞系,检测其对HT29细胞侵袭及迁移能力的影响。方法将携带DAB2IP基因序列的pcDNA3.1质粒转染HT29细胞,24 h后加入适量浓度的G418筛选(10μg/mL),两周后,通过实时定量PCR(qPCR)和Western blot方法检测DAB2IP mRNA水平和蛋白水平,验证DAB2IP的高表达;进一步,通过Transwell及划痕实验检测DAB2IP对HT29细胞侵袭及迁移能力的影响;最后,通过Western blot方法检测其对E-cadherin和vimentin蛋白的表达,初步探讨DAB2IP影响HT29细胞侵袭迁移能力的机制。结果经G418筛选后,DAB2IP的mRNA和蛋白水平均较对照组明显升高;高表达DAB2IP能够明显抑制HT29细胞的侵袭及迁移能力,差异具有统计学意义(P<0.001);高表达DAB2IP能够促进HT29细胞E-cadherin蛋白的表达,抑制vimentin蛋白的表达。结论成功筛选出DAB2IP高表达的HT29稳定细胞系,高表达DAB2IP能够通过抑制细胞上皮间质转化过程从而抑制HT29细胞侵袭及迁移能力。

  • 【基   金】:
  • 国家自然科学基金青年基金项目(编号:81301899)
  • 国家自然科学基金青年基金项目(编号:81702264)
  • 【关键词】:
  • DAB2IP
  • HT29细胞
  • 侵袭及迁移
  • 上皮间质转化

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实用肿瘤学杂志

期刊名称:实用肿瘤学杂志

期刊人气:2034

期刊详情

主管单位:哈尔滨医科大学

主办单位:黑龙江省肿瘤医院

出版地方:黑龙江

专业分类:医学

国际刊号:1002-3070

国内刊号:23-1212/R

邮发代号:14-159

创刊时间:1986年

发行周期:双月刊

期刊开本:大16开

见刊时间:10-12个月

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