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江西省部分地区近3年鸡新城疫抗体水平调查与分析
摘要：【目的】为了解江西省养禽场的鸡新城疫病毒（NDV）免疫抗体水平状况。【方法】对2020—2022年来自江西省宜春市、上饶市、抚州市、九江市、赣州市5地区的部分养禽场1153份血清样本进行NDV抗体检测。【结果】江西省部分地区养禽场的NDV抗体阳性率91.5%。其中，宜春市、上饶市、九江市、赣州市的新城疫抗体阳性率分别为：94.7%、95.6%、88.5%、71.9%，均好于国家农业农村部规定的70%要求；仅抚州市阳性率69.4%。2020—2022年3年来江西省5市NDV免疫抗体阳性率呈现上升趋势；春、冬两季鸡群抗体阳性率较低；江西省5市各地NDV抗体平均效价均在4 Log2以上，多分布于6 Log2～9 Log2。【结论】近年来江西省家禽NDV免疫抗体水平比较高，而且呈逐步上升趋势。
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【研究意义】新城疫（Newcastie disease,ND）最早于1926年在印度尼西亚的爪哇岛（Java）和英格兰的新城（Newcastleupon-Tyne）发现[1,2]，是由新城疫病毒（NDV）引起的鸡和多种禽类急性、热性、败血性的高度接触性传染病[3]。ND作为我国原农业农村部规定的一类动物疫病，凭借其传播速度快、感染率和致死率高，被列为重要病毒性疾病[4]。2002—2003年在加利福尼亚州的NDV爆发导致300万只鸟的销毁和超过1.6亿美元的财务损失[5]。江西省是家禽饲养大省之一，其饲养量居全国第12位，2020年末，全省家禽业产值高达330亿元，占畜牧业总产值的30%左右[6]。因此，做好新城疫防控工作对于江西省来说意义非凡。目前来说还没有针对新城疫的特效药物，主要是靠疫苗免疫[7]。虽然对于该病各地区已经形成了较为完善的免疫程序，但了解该病在江西的防控水平和程度是完整防疫程序中不可或缺的一部分，其中，衡量该病防控水平最关键的指标就是鸡群抗体阳性率的高低。疫苗接种应根据农业农村部制定的免疫方案进行，所使用的疫苗应符合农业农村部规定的来源要求，ND免疫抗体阳性率应高于70%[8]。【前人研究进展】为控制鸡ND的流行，几十年来我国一直以疫苗预防为主进行防控，并取得较理想效果。但仍不时有慢性ND的出现，为此我国各地对该病一直进行血清抗体检/监测，整体趋势较好。苏琪[9]报道西安市2011—2015年3 465份血清样品中，NDV抗体合格率均在70%以上，五年间其合格率分别为：94%、94%、92%、97%、89%、93%。刘华栋[10]报道了山西2007—2016年的NDV抗体变化，发现山西地区鸡ND抗体呈波动式上升。王银[11]报道了2017—2019年四川省宜宾市鸡新城疫免疫抗体情况，1 808份血清样品合格率81.89%、平均血凝抑制价（HI)5.8 Log2;2017—2019年合格率分别是75.96%、81.66%、95.51%。陈国权[12]报道了贵州2015—2018年鸡ND免疫抗体合格率90.48%。程圣芳[13]报道了安徽省六安市2014—2019年2 679份鸡血清NDV抗体水平合格率96.57%。可见不同地区免疫抗体水平差异仍比较大，但基本都在国家要求的群体合格率70%以上。综上研究可见，ND免疫效果各地相差仍比较大，但最近数年，江西省家禽ND免疫抗体检测少见报道。【本研究切入点】为了解江西省近年来的商品鸡场ND免疫抗体情况，笔者针对近来年收集的江西省主要养禽场商品鸡血清样品，进行ND免疫水平调查分析，对江西省ND的防控具有现实意义。【拟解决的关键问题】通过对近几年江西省部分地区商品鸡血清进行采集，检测其新城疫免疫抗体；对检测数据分年份、季节和地区等情况开展分析，以期为江西省对新城疫的防控提供参考资料。
1、材料
1.1 血清样品
本试验所用血清样本为2020—2022年来自江西省宜春市、上饶市、抚州市、赣州市、九江市的部分养禽场送检血清，5地市38批1 153份血清样本。
1.2 主要仪器与试剂
各量程单道可调微量移液器，德国爱本德公司产品；LRH-250F型恒温培养箱，上海一恒科学仪器有限公司产品；MH-2型微量振荡器，其林贝尔公司产品；NDV抗体检测试剂盒，国华科技生物公司产品；1%鸡红细胞悬液，由实验室采自青年健康公鸡新鲜血液配制，现配现用。
2、方法
2.1 血凝试验（HA)
微量法HA试验：取96孔U型血凝板，用微量移液器在第1排1～12孔内加入30μL生理盐水，更换枪头。吸取30μL抗原液加入第1孔，反复吹吸3～5次混匀，从第1孔吸取30μL加入第2孔，反复吹吸3～5次混匀后吸取30μL加入第3孔，如此进行倍比稀释至第11孔，从第11孔吸取30μL弃去，第12孔不加作阴性对照孔。然后在1～12孔依次分别加入30μL的生理盐水和60μL体积为1%的鸡红细胞悬液。震荡混匀，20～25℃室温静置10～15 min，观察结果。
结果判定：在生理盐水对照孔内出现正确结果的情况下，将板倾斜45°，观察血凝板。能使红细胞完全凝集的病毒最高稀释度为该病毒的血凝价，此效价为1个血凝单位（HAU）。
2.2 4单位抗原的配制
根据测得的抗原血凝效价，抗原效价值除以4即为稀释倍数，用生理盐水将抗原液稀释为4单位抗原液[14]。
2.3 微量β法HI试验：
在96孔U型血凝板的第1～11孔内加入30μL生理盐水，吸取30μL待检血清加入第1孔，依次倍比稀释至第10孔，再从第10孔弃去30μL混合液。第12孔加入60μL生理盐水，第1～11孔均加入4 HAU抗原液30μL，混匀，37℃恒温箱静置15～30 min，第11孔为4 HUA对照，第12孔为生理盐水对照。取出后每孔加入60μL 1%的鸡红细胞悬液，混匀，室温静置30 min，观察结果。
结果判定：以完全抑制4个HAU抗原的血清最高稀释倍数作为HI滴度。阳性对照血清的结果符合HI要求，阴性血清效价低于2 Log2，试验成立[15,15]。被检样品HI效价不高于2 Log2时判为阴性；HI效价等于3 Log2时为疑似，可疑样品重检1次；HI效价不低于4 Log2时判为阳性，认为抗体合格[16,16]。
3、结果与分析
3.1 不同地市养禽场抗体阳性率
本次共调查江西省内宜春、上饶、抚州、九江、赣州5地市，检测具体结果见表1。所调查的5市阳性率由高到低依次排序为：上饶市、宜春市、赣州市、九江市、抚州市，高至94.7%，低至69.4%，差异明显，且可看出，在本次调查抽样中，除抚州市外的其余4个市均达到且高于农业农村部规定的70%阳性率。
表1 江西省不同地市养禽场NDV免疫抗体调查结果
3.2 不同年份抗体阳性率
本次调查中，江西省5个地市2020—2022年共取样1 153份，其中2020年200份，2021年683份，2022年270份，具体调查结果见表2。其中，以抽样批次最多及跨度最大的上饶市为例比较了2020—2022年调查结果，见表3。2020—2022年江西省所抽样抗体阳性率呈上升趋势，且3年来的阳性率均达90%以上。其中上饶市2020—2022年抗体阳性率均在90%以上，且上升趋势明显，2022年抽样抗体阳性率高达98.33%。
表2 2020—2022年5区NDV免疫抗体调查结果
表3 上饶市2020—2022年5区NDV免疫抗体调查结果
3.3 不同季节抗体阳性率
根据新城疫的发病特点可知，新城疫多发于气候多变的季节。因此，调查分析不同季节鸡群新城疫抗体水平特点，有助于实际生产经营中免疫流程的完善。将本次调查中样本依气象划分法[17,17]，分为春、夏、秋、冬四季，得出结果见表4。
由表4可见，不同季节鸡群抗体水平阳性率有差异。其中春季阳性率最低（85.3%），夏季阳性率最高（95.8%）。春、冬季两季鸡群抗体阳性率相对低于其他季节。
表4 NDV抗体水平在不同季节的阳性率调查结果
3.4 5市中不同抗体效价分布
抗体阳性率是衡量群体免疫水平的指标，而抗体效价是衡量个体抗体水平高低的指标，本次所调查的江西5市抗体效价分布结果见表5和表6。可见，NDV抗体效价（Log2）分布情况：宜春市样本多分布于6～8，上饶市样本多分布于7～9，抚州市样本多分布于5～7，九江市样本多分布于4～6，赣州市样本抗体多分布于8～10。江西省5地市总体抗体效价（Log2）多分布于6～9。
表5 江西省5市NDV抗体效价分布结果
表6 江西省5市NDV抗体效价分布比例
5地市部分养禽场NDV抗体效价均值调查结果见表7。可见5地市部分养禽场NDV抗体效价均值均大于4 Log2。其中最高是赣州市（8.40 Log2），最低的是抚州市（4.85 Log2）。虽然NDV抗体群体阳性率在69.40%，但其NDV抗体水平均值也在4 Log2以上。
表7 江西省5市NDV抗体效价均值
4、结论与讨论
新城疫是OIE列为必须报告的动物疫病，广泛分布于许多国家。新城疫病毒主要感染家鸡，也可以感染其他家禽和野鸟，经常可从鸽和野生鹦鹉体内分离到强毒力的病毒。虽然水禽和海鸟对其有较强抵抗力，但近年来其发病率在逐渐增加，如鸭、鹅的新城疫常有报道，并可作为带毒者。故本病一直是养禽业重点防范的疫病，本病的防疫也一直是养殖者关注的重点。
目前国内鸡新城疫的疫情相对稳定，但疫苗防控仍是控制本病的关键[18,19]。在各地长期的全面疫苗免疫普及下，鸡新城疫基本得到有效控制。这从全国各地的调查结果来看，鸡群中NDV免疫抗体水平均较高可以得到证实[20,21]。
本次调查中的江西省5地市中宜春市、上饶市、九江市、赣州市的新城疫抗体水平超过了国家标准要求，尤其是宜春市和上饶市的抗体阳性率远超出国家规定水平，可以看出这2市新城疫免疫防控工作比较优秀。而抚州市的新城疫抗体阳性率虽稍低，也接近70%，这说明抚州市的新城疫免疫防控工作还需进一步加强。近3年来江西省5地市综合抗体阳性率呈现上升趋势，这说明近年来鸡群对新城疫的防控工作进步明显。通过对不同季节的江西省5地市综合抗体阳性率调查结果可知，春、冬两季鸡群抗体阳性率较低，而且仍有个别鸡群的NDV抗体水平不够理想，各地市的样本抗体效价水平分布不一，值得注意。
在未来的防疫工作中，各地应重视这一特点，在多变的季节可采取调整免疫程序或加强饲养管理控制环境因素等措施，来保障防控工作的顺利进行。在实际免疫防控工作中应重视群体，全面地系统地开展各项新城疫防控工作是今后努力的方向，争取拥有更广的防控工作覆盖面。
目前HI试验因为操作简便，HI抗体能够大体反映体液免疫中抗体的出现和消长规律，具有一定的代表性，故通常采用HI效价对免疫效果时行监测和评价。但事实上，鸡体内形成对新城疫有抵抗力的因素很多，包括与体液免疫有关的HI抗体、中和抗体、沉淀抗体，与细胞免疫有关的各种因子，与非特异性免疫有关的干扰素、补体和特异性免疫效应细胞等等，都可影响鸡群的免疫力。因此，提高鸡群对新城疫的免疫力最终要落实在良好的饲养管理上。
本次调查结果显示，江西省宜春市、上饶市、九江市、赣州市、抚州市部分养禽场的NDV免疫抗体阳性率分别为：94.7%、95.6%、88.5%、71.9%、69.4%；除抚州市外均达到了国家要求的70%。平均NDV抗体HI价分别为：7.41 Log2、8.22 Log2、5.13 Log2、8.40 Log2、4.85 Log2，都在4 log2之上。5地市NDV免疫抗体总体阳性率91.5%，平均HI效价为7.49 Log2，均超过国家标准。
2020—2022年，江西省5地市养禽场NDV免疫抗体总体阳性率分别为：90.00%、91.22%、93.33%，均在90%以上，并呈上升趋势；春、夏、秋、冬四季NDV免疫抗体水平分别为：85.3%、95.4%、94.2%、91.1%，表明春、冬两季的抗体阳性率稍低，可能与天气变化影响家禽的免疫力有关。
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基金资助:江西省引进培养创新创业高层次人才“千人计划”项目(jxsq2018102118);
文章来源:温小惠,高晓玲,许小康等.江西省部分地区近3年鸡新城疫抗体水平调查与分析[J].生物灾害科学,2023,46(04):478-483.
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