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不同益生菌组合的降解效果及其对肉牛生产性能的影响探究

2021-03-04 425 上传者：管理员

摘要：该试验模拟瘤胃菌群环境筛选益生菌研制出肉牛复合益生菌，试验表明，该复合益生菌可显著提高饲料干物质降解率、菌体蛋白含量、产气量、总挥发性脂肪酸浓度；显著降低NH3-N浓度，瘤胃液pH稳定。犊牛按精料0.1%添加肉牛复合益生菌制作全混合日粮饲喂，能增强粗纤维、木质素、粗蛋白的消化能力，提高采食量10%以上，缓解酸中毒，降低腹泻率70%，粪便细腻无过料臭味轻，犊牛体尺、胸围、体高、日增重等生产性能显著提高，屠宰检测无药残，经济效益提高10%。

关键词：
全混合日粮
干物质降解率
总挥发性脂肪酸浓度
生产性能
肉牛复合益生菌
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肉牛强度育肥存在饲料消化不全、酸中毒、秸秆利用率低和药残等问题，养殖业减药行动推动了科研部门潜心研发替抗减抗新型微生态制剂促进养牛业发展。益生菌作为对宿主有益的活性微生物逐渐应用于食品领域。如何简便易行地利用益生菌发酵秸秆生产低成本牛饲料，关系节粮养牛业高效发展。本课题优选出最佳肉牛复合益生菌组合，确定了精补料中最佳添加比例。

1、材料与方法

1.1材料

1.1.1益生菌

根据农业部兰州兽药研究所有关研究，选择可用于生产微生态制剂的微生物，即酵母菌、芽孢杆菌、粪肠球菌、双歧杆菌、乳酸杆菌和乳酸链球菌六种微生物。国家肉牛体系临沂实验站团队与德州学院、江西农业大学联合筛选出酵母菌、乳酸粪肠球菌、芽孢杆菌三种益生菌进行优选组合。

1.1.2不同的益生菌组合

经不同组合比例按一定工艺研制四种肉牛复合益生菌组合，代号分别为I、II、III、IV。采用体外培养方法，研究不同饲用复合益生菌组合对鲁西黄牛改良的利杂牛瘤胃体外发酵的影响，体外培养试验设5个组，不添加益生菌的基础日粮为对照组，4个试验组分别添加I、II、III和IV号复合益生菌，在精补饲料中添加量均为180mg/kg。

表1肉牛复合益生菌组合

1.1.3试验动物及日粮组成

选用2头体重为276±13kg安装有永久性瘤胃瘘管的健康利杂黄牛，以供瘤胃液的采集测试。试验期间每天饲喂2次（8时和18时），自由饮水。TMR（全混合日粮）饲料为玉米-豆粕-青贮玉米秸日粮，按肉牛1.3倍维持需要配制，精粗比为59:41，基础日粮组成和营养水平见表2。

表2基础日粮组成及营养水平

1.1.4体外培养试验检测

产气量的测定：每隔0.5h记录注射器抽取的的气体量，记录完后排干净，累计培养24h的总产气量。瘤胃液pH的测定：培养24h后立即用微电脑PH-EC-TDS测定仪（青岛翌宏仪器有限公司）直接测定。瘤胃液NH3-N浓度的测定：参照冯宗慈比色法进行测定[1]。瘤胃液菌体蛋白（MCP）的测定：取经预处理去除原虫和饲料大颗粒的上清液20ml，以16000r/min离心28min，弃去上清液，沉淀的细菌部分加入15ml10%三氯乙酸溶液，混匀，再以4000r/min离心13min，取沉淀物加入5%氢氧化钠溶解，然后稀释至40ml。此稀释液又经4000r/min离心15min，取上清液在紫外分光光度计上用280nm和260nm波进行比色，应用下面公式求得细菌蛋白质含量：细菌蛋白含量（mg/ml)=(1.45×D280-0.74×D260）×稀释倍数。瘤胃液挥发性脂肪酸（VFA）浓度的测定：按照赛默飞气相色谱法进行测定[2]。采用Excel软件和Spss16.0软件对实验数据进行单因素方差分析和多重比较显著性检验。

1.1.5数据分析

不同肉牛复合益生菌组合体外培养产气量、pH、MCP含量、NH3-N浓度和干物质降解率。

1.2方法

一组肉牛（24头）饲喂不同含量II号复合益生菌育肥添加试验。

1.2.1试验动物选择及实验设计

沂水县宗盛牛场，选择出生日期3个月以上、体重相近且健康的犊牛24头，采用单因子随机设计，分成4个试验组，每组6头牛。2018年9月1日开始，试验期30d，饲养环境一致。

1.2.2试验动物日粮及饲养管理

所有试验犊牛试验期每日人工哺乳牛奶1kg，饲喂相同基础日粮，优质苜蓿干草3kg，精料2kg。分4组，3个试验组分别按精料量添加0.05%、0.10%、0.20%的II号肉牛复合益生菌，接种拌料35～45℃发酵3d饲喂，对照组不添加，饲喂2次/d，自由饮水。精料主要营养成分见表3。

表3精料主要营养成分

1.2.3测定生产性能指标

测定指标：分别测定试验犊牛开始、试验结束日早晨空腹称重，测定体尺指标。

1.2.4测定腹泻频率

每日饲喂时观察犊牛粪便和尿，根据以下标准评分记录腹泻情况。腹泻频率（%）=（腹泻头数×腹泻天数）/（试验头数×正式期天数）×100；粪便指数=粪便评分之和/总头数[3]；试验期内每日对每头犊牛粪便进行打分，当犊牛粪便评分>2时记为一个腹泻日，粪便评分为4时，按照牛场治疗方案进行治疗，每头犊牛腹泻一天记腹泻一次。评分标准：1分：无腹泻，正常粪便，呈条形或柿饼状，稍有粪味；2分：轻度腹泻，软粪松软能成形，粪臭轻；3分：中度腹泻，粪便糊粥状不成形，酸臭味，粪水无分离；4分：严重腹泻，粪便稀液状不成形，粪水有分离，酸臭难闻。

2、结果

2.1不同的益生菌组合体外培养降解效果

(1）筛选试验表明，添加肉牛复合益生菌能够稳定瘤胃内环境，促进瘤胃发酵功能改善。从生化指标分析以II号肉牛复合益生菌组合（50%酵母菌+25%乳酸粪肠球菌+25%芽孢杆菌）效果最佳。（2）由表4可见，添加I、II、III、IV肉牛复合益生菌组合和对照组的培养液pH值均在正常范围内。添加I、II、III肉牛复合益生菌组合的24h总产气量比对照组有显著的提高（P<0.05），各处理组间差异不显著（P>0.05），但II号肉牛复合益生菌组合的产气量最高为170.40ml;I、II号肉牛复合益生菌组合产生的微生物蛋白含量极显著高于其它组（P<0.01），其中II号肉牛复合益生菌组合的微生物蛋白含量最高达270.38mg/100ml，而且显著高于I、III、（P<0.05）。（3)I、II、III肉牛复合益生菌组合产生的氨态氮浓度极显著低于对照组和第IV号组合（P<0.01),IV号组合显著低于对照组（P<0.05);II、III号肉牛复合益生菌组合的干物质降解率极显著高于对照组（P<0.01）。（4）瘤胃液挥发性脂肪酸浓度：对照组、I、II、III、IV总VFA浓度（mmol/L）分别为139.65±0.17、144.38±0.97、146.01±0.62、145.88±0.11、140.71±0.13,II组显著高于对照组（P<0.05）。

表4不同肉牛复合益生菌组合制剂试验结果

表5不同II号肉牛复合益生菌添加量对犊牛生长与生产性能的影响

2.2II号复合益生菌对犊牛生长与生产性能的影响

育肥试验开始时各组犊牛体尺、体重指标各组差异不显著（P>0.05），由表5可知，饲喂复合益生菌精料后，0.05%组与对照组差异不显著（P>0.05),0.1%组和0.2%组体高极显著高于对照组（P<0.01），显著高于0.05%组（P<0.05);0.1%组和0.2%组胸围显著高于对照组（P<0.05）。试验期0.1%组日增重最高，显著高于对照组（P<0.05），高出0.23kg/d，其次0.2%组和0.05%菌组，0.05%组较对照组增重率提高17.30%。试验结束后0.1%组和0.2%组体重同样显著高于对照组（P<0.05），其它各组之间差异不显著（P>0.05）。实验表明，添加0.1%的II号肉牛复合益生菌（50%酵母菌+25%乳酸粪肠球菌+25%芽孢杆菌）可显著提高犊牛瘤胃消化率和全消化道消化率，粪便细腻松软无臭味[4]。

2.3止泻效果

整体来看，本次选择的试验期各组腹泻发生的概率都不高。由表6可知饲喂不同含量II号肉牛复合益生菌精料组对抑制犊牛腹泻的影响，各组均有腹泻，但腹泻程度有一定的差别，其中对照组腹泻频率和粪便评分最高，0.1%组最低。

表6II号肉牛复合益生菌不同添加量犊牛腹泻率及其评分结果

3、讨论

II号肉牛复合益生菌显著提高了肉牛瘤胃分解利用秸秆饲料的消化率，产生大量的菌体蛋白、代谢产物、维生素、小分子肽和活性酶，有利于反刍兽新月单胞菌及其培养物的增殖，将乳酸降解成丙酸和乙酸，益生菌能与病原菌竞争瘤胃和肠道内定殖位点，抑制病原微生物。屠宰检测无药残。杨东英教授指出乳酸菌在体内产生的弱酸环境对致病性大肠杆菌、沙门氏菌、葡萄球菌等均有不同程度的抑制作用。枯草芽孢杆菌活菌制剂具有治疗犊牛和生产奶牛细菌性肠道疾病的作用，观察期间未发现动物不良反应。本试验结果显示，添加不同含量肉牛复合益生菌对犊牛腹泻都有很好的抑制作用，在低成本牛料生产中降低饲料成本9%，进一步拉动了节粮型秸秆养牛业高效发展。下一步将利用II号肉牛复合益生菌研发肉牛生物发酵饲料，更加方便快捷地推广应用该项技术成果。

4、结论

(1）创新模拟瘤胃菌群环境运用筛选益生菌的原理与技术优选出肉牛复合益生菌组合（50%酵母菌+25%乳酸粪肠球菌+25%芽孢杆菌）。饲料干物质降解率、MCP含量、产气量和总VFA浓度显著提高；显著降低NH3-N浓度，瘤胃液pH值稳定。（2）犊牛按精补料添加0.1%肉牛复合益生菌能增强瘤胃消化粗纤维、木质素、粗蛋白的能力，缓解酸中毒，对犊牛降低腹泻都有很好的抑制作用，粪便细腻无过料臭味轻，可显著提高犊牛生长发育性能，体尺、胸围、体高、日增重显著提高。日增重提高0.24kg/d，腹泻率降低70%，增强了抗病力。（3）肉牛复合益生菌提高了非常规粗饲料的利用率，提高经济效益10%以上，干物质排放量减少3.5%，屠宰检测无药残。该成果将促进饲料生产新旧动能转换和节粮养殖业增效。

参考文献：

[1]冯宗慈.通过比色测定瘤胃夜氨氮含量方法的改进[J].内蒙古畜牧科学,1993(4):17.

[2]刘明珠､曲明仁.不同复合益生菌对锦江黄牛瘤胃体外发酵的影响[J].饲料工业,2013(5):16-17.

[3]娄玉杰.外源微生物菌剂对牛粪堆肥过程中养分及腐熟度动态变化规律的研究[A].国家肉牛牦牛产业技术体系论文集[C].2017:101-102

[4]张志国.添加益生菌对全混合日粮发酵品质的影响[J].中国畜牧兽医,2017(12):27-28.

左秀丽,左振华,左秀峰,徐浩,左可吉.不同益生菌组合的降解效果及其对肉牛生产性能的影响[J].山东畜牧兽医,2021,42(02):1-3+6.