摘要:猫传染性腹膜炎(FIP)是猫冠状病毒(FCoV)的特异性位点突变引起的。超过95%的患有FIP的猫在诊断后的几天到几个月内死于疾病,历史上使用了各种治疗方法,但最近开发的抗病毒药物GS-441524在治疗FIP方面显示出了希望,显示患有传染性腹膜炎的猫对治疗有积极反应。为探究GS-441524在临床应用效果,北京市天空之城宠物医院接诊一例疑似患有FIP的猫,对其进行实验室检测,应用临床症状、血液生化、B超探查、细胞涂片、RT-PCR检测,确诊之后对其应用此药物,按2mg·kg-1给药,连续12周,进行治疗分析。结果表明:患猫应用腺苷核苷类似物GS-441524药物,体温正常,明显腹水减少,体重增加,食欲加强,血液指标趋于正常,异常炎症反应得到控制。笔者对此这次诊疗结果做出以下总结:GS-441524对猫传染性腹膜炎有很好疗效,并为抗病毒药物的临床实验提供数据性,希望将来能够大量应用于治疗猫FIP的临床中。
猫传染性腹膜炎(FIP)是一种致命疾病,发生于世界各地的家庭饲养及野生动物。FIP是由猫冠状病毒(FCoV)特异性位点突变而来的,猫冠状病毒(FCoV)发生在2个不同的病理类型,可以区分其生物学行为,但不是其形态。一些作者[1,3,4]对这2种病理类型使用不同的名称,尽管二者都属于同一病毒物种。猫肠冠状病毒(FECV)在多猫环境中非常普遍,并且具有高度的传染性———几乎100%的猫从脱落的猫的粪便中接触到FECV就会受到感染。然而感染大多是无症状的,或只引起轻度和短暂的腹泻[2]。相反,猫传染性腹膜炎病毒(FIPV)不是通过粪便—口腔途径传染的,而是由一小部分感染猫的无毒性FECV突变而产生的,然后导致致命疾病猫传染性腹膜炎(FIP)[5,6,7]。临床症状有厌食症、嗜睡、体重减轻、发热等,眼部和神经体征,如步态异常或精神异常,都是非特异性[2,8,9]。目前尚不清楚哪些确切的基因携带导致FIPV发展的突变。由于使用新药物治疗猫的FIP有希望的结果已经发表,GS-441524是能够直接阻断病毒的复制,来达到治疗目的。目前这一类药物在市场上未商品化,须向国外进口,国内对于这个药物的研究暂时空白,据调查,在临床上此药物价格昂贵,难以大量应用在临床中,主人在没有宠物保险下很难付得起费用。对此,只向此药物的临床结果做研究,为以后研究GS-441524药物在临床试验中奠定基础,也希望能够使费用降低,普遍应用于临床,挽救猫传染性腹膜炎的疾病。
1、案例情况
乔巴,美国短毛猫,2个月,雄性,未绝育,主人从猫舍购买到家中饲养28d,家中无其它宠物,临床检查食欲不振、嗜睡、眼睛游离,被毛色泽光亮,脊柱明显,体温39.5℃,体重1.3kg,腹部触诊波动感明显,腹围增大,疑似猫传染性腹膜炎,进行实验室检查。
2、实验室检测结果与诊断
2.1血常规及血液生化
血常规结果见表1;血液生化指标结果见表2。由表1可见,乔巴淋巴细胞数参考值范围,血红蛋白、平均血红蛋白浓度、红细胞、红细胞压积明显低于参考值,该结果有贫血的现象,可能跟最近食欲不佳、伴有病毒感染导致。由表2可见,总蛋白(TP)偏高,白球比A/G=0.5<0.8,这一指标有效判定患有FIP风险较高,进行了实验室RT-PCR检测。
表1血常规检查报告
表2血液生化检查报告
2.2腹部B超超声波检查与腹水穿刺
腹部超声显示(见图1),腹部回声增强,腹水大量,未见腹腔肠系淋巴结明显增大;膀胱内未见明显异常影像;左肾与右肾表面不光滑,皮质回声不均,髓质环征,肾周有不均质回声结构。均未见肾盂积液;肝脏回声均匀,胆囊内未见明显异常回声;脾脏回质均匀。
腹水穿刺出来的液体呈黄绿色粘稠状(见图2),进行细胞学检查,呈大量单核巨噬细胞,无其它细胞,李凡他试验结果呈阳性(见图3)。
图1腹部超声影像
图2腹水
图3李凡他试验
2.3RT-PCR检测
RT-PCR检测(见图4、图5)出含有猫冠状病毒,经过序列对比,未发现明显存在的特异性位点突变,患有猫传染性腹膜炎(FIP)风险一般。
图4猫冠状病毒
图5猫传染性腹膜
综合以上结果诊断,A/G比小于0.8,对诊断猫传染性腹膜炎有很大指导作用,B超检测含有腹水,淋巴结肿大,RT-PCR检测出猫冠状病毒。
3、治疗方案
3.1用药疗程
由于乔巴生化检测总蛋白低且患有贫血症状,先进行输液疗法,主人每天带过来输液,在进行输液4d后,乔巴精神好转,食欲增强,4d后结束输液,并在此期间使用核苷类似物GS-441制剂,按4mg·kg-1给药,每天持续给药,连续12周,前4周每周检查1次,后续症状减缓改为每月检查1次,观察用药疗效。(无明显异常)在给药期间患猫(除了前4d静脉滴注)均在家中注射药物。
3.2用药疗效对比
3.2.1患猫体重变化
从连续给药之后,前4周每周称重1次,后续症状减缓改为每月称重,表3为采集的体重变化,由于为幼猫,时间长些才能够看出来体重的增加,从就诊的1.3kg增至2.8kg,并且腹部明显缩小,有紧实感。
表3患猫用药后每周、月平均体重的变化
3.2.2患猫每次复查血液的血常规及生化指标
连续给药之后,每次血液血常规复查的结果,由表4可见,白细胞总数在逐渐下降恢复至正常范围内,中性粒细胞数也有所下降,到第3周后明显趋于正常水平,平均血红蛋白浓度持续增高,红细胞在用药之后恢复到正常水平。血液中的细胞数在连续给药12周趋于正常范围。
连续给药后,每次复查血液生化的结果,由表5可见,主要可见白球比逐渐从0.5上升至正常水平,其它指标均在正常范围。
表4患猫用药后每周、月血常规检查报告
表5患猫用药后每周、月血液生化检查报告
3.2.3患猫每次复查B超检查结果
从表6结果可见,患猫腹水逐渐减少,腹膜回声逐渐恢复正常,淋巴结肿大恢复正常。
表6患猫每月B超检查结果
4、讨论
猫患有传染性腹膜炎时,常有2种类型,干性和湿性,患有干性传染性腹膜炎的猫在诊断上较湿性困难,实验室检测只能采取患猫的粪便进行PCR检测,但这样的检测结果准确率只有5%可能性,确诊干性FIP的猫,临床特征表现为前期暴瘦,食欲并不减退,嗜睡,但体重仍然没有增加,腹腔没有积液,血液检查会出现高球蛋白症,淋巴数和粒细胞数减少,可能存在氮质血症(在没有积液的猫中更常见)或肝脏酶活性增加[10]。患有湿性FIP的猫,主要特征腹围增大,食欲不振,嗜睡,血液常伴有贫血,白球比<0.8,低白蛋白血症(在有积液的猫中更常见)、高胆红素血症(在有积液的猫中更常见),以及根据器官受累情况,RT-PCR显示阳性,李凡他实验显示阳性[11]。在本次病例中,患猫没有表现出高胆红素症,肝脏指标正常,其它指标均表现出患有湿性腹膜炎的风险,确诊为猫传染性腹膜炎。
在之前很长一段时间对于这种疾病并无任何药物可以缓解并救治,文献中通常为如何确诊、如何检查,对于治疗无任何效果,近2a出现2种药物,3C类蛋白酶抑制剂GC376和核苷类似物GS-441524在治疗猫传染性腹膜炎中有显著疗效[12,13,14]。国外学者研究利用GS-441524药物治疗猫传染性腹膜炎的显示有神经症状的疗效[15],对4例神经FIP的研究采用5mg·kg-1的剂量治疗,治疗时间和随后的剂量根据临床反应增加。剂量为5mg·kg-1,SC,1次/d,持续12~14周,足以治疗2例受影响较轻的神经FIP病例。但在临床受影响最严重的猫中,以5mg·kg-1剂量重复疗程只会改善临床症状,一旦停止治疗,临床症状就会迅速消退。这种治疗失败促使病例4的剂量从5mg·kg-1逐步上升到10mg·kg-1。体外50%有效浓度(EC50)的GS-441524,以防止病毒细胞病变的作用,在0.8μM,完全抑制病毒复制在10μM和部分抑制在1μM[15]。可见GS-441524这种药物临床上还是可以应用,这将在治疗FIP中迈出重大一步。
本病例在这12周里,只有在前4d进行营养液补充输液,除维持肝脏指标的口服药物之外未使用其它任何生物制剂,只注射了GS-441524,在第2周就明显控制住贫血,腹水减少,各项指标趋于正常,平日饮食也是高蛋白食物,此次效果明显可见,但用药时长以及停药之后如何护理避免复发还有待进一步研究。
王丽新,吴丰,刘海超,胡格,陈大鹏.一例应用腺苷核苷类似物GS-441524对猫传染性腹膜炎进行抗病毒治疗分析[J].农业与技术,2020,40(24):118-122.
基金:国家重点研发专项资助项目(项目编号:2017YFD0501501)
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