藤石松Lycopodiastrum casuarinoides (Spring)Holub又名“舒筋草”，为石松科藤石松属的单种属植物，生于海拔100～3 100 m的林下、林缘、灌丛下或沟边，主要分布于热带与亚热带地区，在我国华东、华南、华中及西南大部分省区广泛分布，能祛风除湿、舒筋活血，主治跌打损伤、风湿关节痛、月经不调等[1,2]。石松碱类化合物是从石松科、石杉科及其近缘亲属植物中分离得到的一类具有生源相同、结构相似且骨架丰富多样的生物碱，其基本骨架结构一般由16个碳原子的吡啶环或吡啶酮环构成[3]。近年来，石松生物碱因其具有奇特的化学结构和丰富多样的生物活性（如乙酰胆碱酯酶抑制活性、细胞毒性和神经保护活性等）而受到众多化学家和药理学家的广泛关注[4,5,6,7,8,9,10,11,12]。其中，石杉碱甲作为石松碱家族的明星分子，具有强效、可逆的乙酰胆碱酯酶抑制活性，已被美国食品药品监督管理局批准为改善记忆力的膳食补充剂，在国内则用于重症肌无力和中轻度阿尔茨海默病（Alzheimer’s disease,AD）患者的临床治疗，是目前较有前景的AD治疗药物[3]。为了进一步阐明藤石松的生物碱类成分，本课题组对该植物的总生物碱部位进行研究，从中分离得到11个石松碱类化合物，分别鉴定为6-羟基-β-玉柏碱（6-hydroxy-β-obscurine,1）、去-N-甲基-β-玉柏碱（des-N-methyl-β-obscurine,2）、casuarine B(3）、石杉碱乙（huperzine B,4）、casuarinine B(5）、β-玉柏碱（β-obscurine,6）、蛇足石杉碱（huperzinine,7）、N-demethylhuperzinine(8）、石杉碱丙（huperzine C,9）、8,15-dihydrohuperzinine(10）、casuarinine I(11）。其中，化合物1为新化合物，结构式见图1。

图1化合物1的结构  

1、仪器与材料

Ascend 400型核磁共振波谱仪（德国Bruker公司）；JASCO V-550型紫外/可见光谱仪（北京佳斯科仪器有限公司）；JASCO FT/IR-4600 Plus Fourier Transform IR光谱仪（北京佳斯科仪器有限公司）；N-1300旋转蒸发仪（上海爱朗仪器有限公司）；LC-2030C分析型高效液相（日本Shimadzu公司）；G1361A 1200型半制备型高效液相（美国安捷伦科技有限公司）；5600 LC-MS质谱仪（美国安捷伦科技有限公司）；Agilent Gemini S单晶衍射仪（美国安捷伦科技有限公司）；JASCO P-1020旋光仪（北京佳斯科仪器有限公司）；柱色谱硅胶（青岛海洋化工有限公司）；HSGF254型TLC用硅胶GF254高效预制板（烟台化学工业研究所）；柱色谱用Sephadex LH-20填料（Amershanm Biosciences公司）；Xbridge BEH C18制备柱（250 mm×10 mm,5µm，美国Waters公司）；核磁用氘代试剂（美国CIL公司）；乙醇、石油醚、醋酸乙酯、二氯甲烷等均为分析纯（天津富宇公司和山东禹王公司）；乙腈、甲醇为色谱纯（北京迈瑞达科技有限公司）。

实验用藤石松样品于2020年11月购买自广东省揭阳市，经广州中医药大学科技创新中心王文彩博士鉴定为藤石松L.casuarinoides (Spring) Holub，凭证标本（2020100201）存放于广州中医药大学科技创新中心。

2、提取与分离

将藤石松的地上部分（50.0 kg）干燥后粉碎，并在室温下用95%乙醇（140 L）提取3次，每次72h。乙醇提取物（7.55 kg）加水混悬，用10%盐酸酸化至p H 3，并用二氯甲烷萃取除去中性组分。酸水层用NH3·H2O调节至p H 9～10后，用二氯甲烷萃取，减压浓缩以获得总生物碱部位（54.63 g）。总生物碱部位经硅胶柱色谱，二氯甲烷-甲醇（100∶0→0∶100）梯度洗脱，经薄层色谱检测合并相同部分，得到10个流分（Fr.1～10）。

Fr.1(7.35 g）经ODS柱，甲醇-水（10∶90→100∶0）溶剂系统进行梯度洗脱，得到5个组分（Fr.1-1～1-5）。Fr.1-2(0.24 g）经Sephadex LH-20凝胶柱色谱（甲醇）纯化，得到3个流分Fr.1-2-1～1-2-3。Fr.1-2-2以乙腈-碱水（77∶23，碱水为0.02%二乙胺水溶液）为流动相，经半制备HPLC分离得到化合物1(3.56 mg,t R=39.5 min）、11(8.31mg,t R=40.1 min）。Fr.1-2-3以乙腈-碱水（75∶25）为流动相，经半制备HPLC分离得到化合物4(3.74mg,t R=15.7 min）。Fr.1-3以乙腈-碱水（70∶30）为流动相，经半制备HPLC分离得到化合物10(5.93mg,t R=30.4 min）。

Fr.2(1.5 g）经ODS柱，甲醇-水（10∶90→100∶0）溶剂系统进行梯度洗脱，得到3个组分Fr.2-1～2-3。Fr.2-1(0.13 g）经Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离，甲醇洗脱得到3个流分Fr.2-1-1～2-1-3。Fr.2-1-1以乙腈-碱水（70∶30）为流动相，经半制备HPLC分离得到化合物6(4.30 mg,t R=36.0 min）。Fr.2-2(0.16 g）经Sephadex LH-20凝胶柱色谱（二氯甲烷-甲醇1∶1）和半制备HPLC（乙腈-碱水75∶25）分离得到化合物9(43.33 mg,t R=9.9 min）。

Fr.3(1.23 g）经Sephadex LH-20凝胶柱色谱分离，以甲醇为溶剂进行洗脱，得到3个流分Fr.3-1～3-3。Fr.3-1(0.31 g）经Sephadex LH-20凝胶柱色谱（二氯甲烷-甲醇1∶1）和半制备HPLC（乙腈-碱水75∶25）分离得到化合物2(4.17 mg,t R=10.9min）。Fr.3-2(0.29 g）经Sephadex LH-20凝胶柱色谱（甲醇）和半制备HPLC（乙腈-碱水75∶25）分离得到化合物3(9.79 mg,t R=12.8 min）、5(5.17mg,t R=22.3 min）、7(9.79 mg,t R=22.0 min）、8(2.9 mg,t R=24.3 min）。

3、结构鉴定

化合物1：无色针晶（甲醇）。[α]D25+78.0 (c 0.10,CH3CN);mp 269～270℃。HR-ESI-MS谱给出准分子离子峰m/z:289.190 1[M+H]+（计算值289.191 1），确定化合物1的分子式为C17H24N2O2，计算其不饱和度为7。紫外光谱（UV）显示在232、318 nm处有特征性吸收。红外光谱（IR）显示其结构中存在羟基（3 411 cm-1）、羰基（1 667 cm-1）和双键（1 607 cm-1）等特征信号峰。

化合物1的1H-NMR (400 MHz,CD3OD)谱显示2个烯烃质子信号δH 7.85 (1H,d,J=9.4 Hz,H-3),6.46 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2);1个连氧次甲基氢信号δH 4.75 (1H,d,J=6.0 Hz,H-6)和2个甲基氢信号δH 2.59 (3H,s,N-Me),0.84 (3H,d,J=6.3 Hz,H-16)。13C-NMR结合DEPT-135谱显示出17个碳信号，包括4个季碳信号（δC 59.9,146.1,121.7,165.1）、6个次甲基碳信号（δC 27.6,38.1,41.7,66.5,119.5,142.2）、5个亚甲基碳信号（δC 20.3,27.3,36.3,47.5,51.6）和2个甲基碳信号（δC 22.5,36.3）。化合物1的碳氢信号归属见表1。

将化合物1与β-玉柏碱[13]的1H-NMR和13C-NMR数据进行对比，发现两者的化学位移相似，不同之处在于化合物1的C-6位化学位移明显向低场移动（δC 66.5），提示其C-6位连有氧原子。1H-1H COSY谱显示化合物1的结构中存在如图2所示的两组自旋体系。在HMBC谱中，H-2与C-1/C-4,H-3与C-1/C-5/C-13,H-6与C-4/C-5/C-8/C-12,H-16与C-8/C-14/C-15,N-CH3与C-9/C-13之间分别有远程相关（图2），证实了上述推论，从而建立了化合物1的平面结构。

为了确定化合物1的绝对构型，在其甲醇溶液中培养出单晶，并通过单晶X-射线衍射实验获得了其单晶结构（图3）。由于其Flack常数为0.05(10)，因此确定化合物的绝对构型为6R,7R,12R,13R,15R命名为6-羟基-β-玉柏碱（6-hydroxy-β-obscurine）。

化合物1的晶体学数据存于在英国剑桥晶体学数据中心（Cambridge Crystallographic Data Centre,CCDC），该数据可通过CCDC网站www.ccdc.cam.ac.uk进行索取,发表号为CCDC-2315044。化合物1的晶体学参数：分子式C17H24N2O2，相对分子质量Mr=288.38，斜方晶系，P212121空间群；晶胞参数a=7.770 80(10) nm,b=12.859 0(2) nm,c=14.565 8(2)nm,α=β=γ=90°；V=1 455.48(4) nm3,T=149.99(10) K，晶胞内分子数Z=4，计算单晶密度（ρcalc)=1.316 g/cm3,F(000)=624。收集的衍射点数为11 403(9.17≤θ≤147.89），可观测的衍射点数为2 822[I>2σ(I)]。可观测的衍射点的R为0.031 5，可观测的衍射点的最终R指数（RW）为0.082 7，拟合优度（S）为1.060,Flack常数是0.05(10)。

表1化合物1的1H-NMR和13C-NMR数据(400/100MHz,CD3OD)  

图2化合物1的关键1H-1H COSY和HMBC相关信号 

图3化合物1的单晶ORTEP图  

化合物2：白色粉末。HR-ESI-MS m/z:259.181 3[M+H]+（计算值259.180 5），分子式为C16H22N2O。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.64 (1H,d,J=9.4Hz,H-3),6.43 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),2.88 (1H,dd,J=19.0,7.1 Hz,H-6a),2.80 (1H,m,H-9a),2.49 (1H,m,H-9b),2.35 (1H,d,J=19.0 Hz,H-6b),2.08 (1H,m,H-7),1.76 (1H,brd,J=9.0 Hz,H-8a),1.70～1.51 (5H,overlapped,H-10a,10b,12,14a,15),1.36～1.20 (4H,overlapped,H-8b,11a,11b,14b),0.86 (3H,d,J=5.8 Hz,H-16);13C-NMR (100 MHz,CD3OD)δ:165.2 (C-1),118.4 (C-2),140.9 (C-3),118.5 (C-4),146.6 (C-5),30.6(C-6),34.2 (C-7),44.1 (C-8),42.0 (C-9),26.9 (C-10),26.5(C-11),44.2 (C-12),56.8 (C-13),49.4 (C-14),27.0 (C-15),22.2 (C-16)。以上数据与文献报道一致[14]，故鉴定化合物2为去-N-甲基-β-玉柏碱。

化合物3：白色粉末。HR-ESI-MS m/z:287.176 3[M+H]+（计算值287.175 4），分子式为C17H22N2O2。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.83 (1H,d,J=9.4Hz,H-3),6.32 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),5.41 (1H,brd,J=4.9 Hz,H-8),3.34 (1H,td,J=10.9,5.1 Hz,H-11),2.91 (1H,overlapped,H-7),2.87 (1H,overlapped,H-6a),2.62 (1H,m,H-9a),2.59 (1H,overlapped,H-14a),2.57 (3H,s,N-Me),2.49 (1H,m,H-9b),2.27 (1H,d,J=16.7 Hz,H-6b),1.79 (1H,dd,J=10.4,3.3 Hz,H-12),1.70 (1H,m,H-14b),1.67 (1H,m,H-10b),1.49(3H,s,H-16),1.43 (1H,m,H-10a);13C-NMR (100MHz,CD3OD) δ:165.7 (C-1),118.2 (C-2),142.8 (C-3),122.6 (C-4),144.5 (C-5),30.0 (C-6),30.7 (C-7),125.5 (C-8),50.3 (C-9),29.9 (C-10),68.6 (C-11),41.3(C-12),59.3 (C-13),44.1 (C-14),133.8 (C-15),23.2 (C-16),37.7 (N-Me)。以上数据与文献报道一致[15]，故鉴定化合物3为casuarine B。

化合物4：白色粉末。HR-ESI-MS m/z:257.164 9[M+H]+（计算值257.164 8），分子式为C16H20N2O。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ:7.70 (1H,d,J=9.4 Hz,H-3),6.45 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),5.45 (1H,brd,J=5.5 Hz,H-8),2.86 (1H,dd,J=17.8,5.5 Hz,H-6a),2.76(1H,d,J=13.3 Hz,H-9b),2.44 (1H,d,J=17.8 Hz,H-6b),2.34 (1H,m,H-7),2.30 (1H,dd,J=13.0,3.3 Hz,H-9a),2.05 (1H,d,J=16.9 Hz,H-14b),1.85 (1H,d,J=16.9 Hz,H-14a),1.69 (1H,dt,J=12.4,3.8 Hz,H-12),1.61～1.54 (2H,overlapped,H-10a,11b),1.52 (3H,s,H-16),1.45 (1H,m,H-10b),1.24 (1H,m,H-11a);13C-NMR(100 MHz,CDCl3)δ:165.5 (C-1),117.8 (C-2),140.6 (C-3),118.2 (C-4),143.5 (C-5),29.4 (C-6),34.3 (C-7),126.1 (C-8),47.8 (C-9),25.2 (C-10),27.9 (C-11),40.4(C-12),53.3 (C-13),41.7 (C-14),132.3 (C-15),23.0 (C-16)。以上数据与文献报道一致[16]，故鉴定化合物4为石杉碱乙。

化合物5：淡黄色粉末。HR-ESI-MS m/z:301.191 8[M+H]+（计算值301.191 1），分子式为C18H24N2O2。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ:13.17 (1H,s,N-H),7.82 (1H,d,J=9.4 Hz,H-3),6.42 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),5.41 (1H,brd,J=4.8 Hz,H-8),3.33 (3H,s,O-Me),3.04 (1H,td,J=10.7,4.8 Hz,H-11),2.95 (1H,m,H-7),2.93 (1H,m,H-6a),2.70(1H,m,H-9a),2.60 (3H,s,N-Me),2.59 (1H,overlapped,H-14a),2.58 (1H,overlapped,H-9b),2.45 (1H,d,J=17.2 Hz,H-6b),1.88 (1H,dd,J=10.6,3.4 Hz,H-12),1.71 (2H,overlapped,H-10a,14b),1.58 (1H,td,J=12.3,3.4 Hz,H-10b),1.53 (3H,s,H-16);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:165.5 (C-1),117.8 (C-2),141.3 (C-3),121.0 (C-4),143.2 (C-5),30.3 (C-6),30.8 (C-7),124.7 (C-8),49.1 (C-9),24.1 (C-10),77.4 (C-11),38.5 (C-12),58.1 (C-13),43.3 (C-14),132.3 (C-15),23.2 (C-16),37.5 (N-Me),56.1(O-Me)。以上数据与文献报道一致[12]，故鉴定化合物5为casuarinine B。

化合物6：白色粉末。HR-ESI-MS m/z:273.195 3[M+H]+（计算值273.196 1），分子式为C17H24N2O。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ:13.12 (1H,s,N-H),7.81 (1H,d,J=9.3 Hz,H-3),6.43 (1H,d,J=9.3 Hz,H-2),2.95 (1H,dd,J=18.6,6.9 Hz,H-6a),2.69 (1H,t,J=13.4 Hz,H-9a),2.56 (1H,overlapped,H-9b),2.56(3H,s,N-Me),2.40 (1H,d,J=18.6 Hz,H-6b),2.01(1H,brs,H-7),1.84 (2H,m,H-8),1.78 (1H,m,H-10a),1.67 (1H,d,J=12.8 Hz,H-14a),1.47～1.10 (6H,overlapped,H-10b,11a,11b,12,14b,15),0.81 (3H,d,J=5.2 Hz,H-16);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:165.1 (C-1),117.3 (C-2),141.2 (C-3),120.0 (C-4),144.4 (C-5),29.8 (C-6),33.4 (C-7),34.6 (C-8),50.5 (C-9),19.4 (C-10),26.6 (C-11),46.5 (C-12),58.1 (C-13),43.3 (C-14),26.6 (C-15),22.3 (C-16),36.3 (N-Me)。化合物结构与文献报道一致[13]，故鉴定化合物6为β-玉柏碱。

化合物7：白色针晶（甲醇）。HR-ESI-MS m/z:271.180 6[M+H]+（计算值271.180 5），分子式为C17H22N2O。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ:13.28 (1H,s,N-H),7.64 (1H,d,J=9.4 Hz,H-3),6.43 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),5.93 (1H,dt,J=17.0,10.1 Hz,H-11),5.33 (1H,brd,J=5.4 Hz,H-8),5.17 (1H,dd,J=17.0,2.0 Hz,H-10a),5.02 (1H,dd,J=10.1,2.0 Hz,H-10b),2.95 (1H,dd,J=17.7,5.2 Hz,H-6a),2.83 (1H,dd,J=10.1,4.0 Hz,H-12),2.76 (1H,d,J=17.3 Hz,H-14b),2.39 (6H,s,2N-Me),2.41～2.36 (2H,overlapped,H-6b,7),1.59 (1H,d,J=17.3 Hz,H-14a),1.51 (3H,s,H-16);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:165.3 (C-1),117.6 (C-2),140.3 (C-3),118.8 (C-4),143.0 (C-5),29.2 (C-6),38.8 (C-7),124.6 (C-8),116.4(C-10),142.5 (C-11),45.9 (C-12),59.9 (C-13),44.5 (C-14),134.3 (C-15),23.0 (C-16),39.6 (2N-Me)。以上数据与文献报道一致[17]，故鉴定化合物7为蛇足石杉碱。

化合物8：淡黄色粉末。HR-ESI-MS m/z:257.165 1[M+H]+（计算值257.164 8），分子式为C16H20N2O。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.78 (1H,d,J=9.5 Hz,H-3),6.38 (1H,d,J=9.5 Hz,H-2),5.81(1H,ddd,J=17.0,10.3,9.4 Hz,H-11),5.47 (1H,brd,J=5.3 Hz,H-8),5.34 (1H,dd,J=17.0,2.0 Hz,H-10a),5.20 (1H,dd,J=10.3,2.0 Hz,H-10b),2.83 (1H,dd,J=17.8,5.4 Hz,H-6a),2.76 (1H,dd,J=9.4,4.2 Hz,H-12),2.65 (1H,d,J=17.1 Hz,H-14a),2.55 (1H,m,H-7),2.36 (3H,s,N-Me),2.31 (1H,d,J=17.8 Hz,H-6b),1.69 (1H,d,J=17.1 Hz,H-14b),1.57 (3H,s,H-16);13C-NMR (100 MHz,CD3OD) δ:165.5 (C-1),118.6 (C-2),142.2 (C-3),119.4 (C-4),144.4 (C-5),30.2(C-6),38.2 (C-7),126.1 (C-8),118.6 (C-10),138.2 (C-11),45.5 (C-12),57.1 (C-13),42.6 (C-14),134.5 (C-15),22.9 (C-16),28.5 (N-Me)。以上数据与文献报道一致[18]，故鉴定化合物8为N-demethylhuperzinine。

化合物9：白色粉末。HR-ESI-MS m/z:243.150 1[M+H]+（计算值243.149 2），分子式为C15H18N2O。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.79 (1H,d,J=9.4Hz,H-3),6.36 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),5.69 (1H,dt,J=16.9,9.9 Hz,H-11),5.48 (1H,br d,J=5.5 Hz,H-8),5.27 (1H,dd,J=16.9,2.2 Hz,H-10a),5.17 (1H,dd,J=10.2,2.2 Hz,H-10b),2.83 (1H,dd,J=17.9,5.3 Hz,H-6a),2.52 (1H,m,H-7),2.45 (1H,dd,J=9.4,4.0Hz,H-12),2.30 (1H,d,J=17.9 Hz,H-6b),2.25 (1H,d,J=17.1 Hz,H-14a),1.96 (1H,d,J=17.1 Hz,H-14b),1.53 (3H,s,Me-16);13C-NMR (100 MHz,CD3OD) δ:165.6 (C-1),120.0 (C-2),142.5 (C-3),122.2(C-4),143.5 (C-5),30.2 (C-6),37.3 (C-7),126.6 (C-8),118.4 (C-10),137.8 (C-11),50.8 (C-12),52.3 (C-13),48.2 (C-14),134.3 (C-15),22.9 (C-16)。以上数据与文献报道一致[12]，故鉴定化合物9为石杉碱丙。

化合物10：白色粉末。HR-ESI-MS m/z:273.195 2[M+H]+（计算值273.196 1），分子式为C17H24N2O。1H-NMR (400 MHz,CDCl3)δ:13.18 (1H,s,N-H),7.64 (1H,d,J=9.4 Hz,H-3),6.45 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),5.94 (1H,dt,J=17.0,10.0 Hz,H-11),5.16 (1H,dd,J=17.0,2.0 Hz,H-10a),4.95 (1H,dd,J=10.0,2.0Hz,H-10b),3.05 (1H,dd,J=18.5,6.6 Hz,H-6a),2.73(1H,dd,J=10.0,3.2 Hz,H-12),2.41 (6H,s,2N-Me),2.26 (1H,d,J=18.5 Hz,H-6b),2.05 (1H,m,H-7),1.65(1H,m,H-8b),1.57 (1H,m,H-14a),1.33～1.29 (1H,m,H-14b),1.28～1.16 (2H,overlapped,H-8a,15),0.81(3H,d,J=5.9 Hz,Me-16);13C-NMR (100 MHz,CDCl3)δ:164.9 (C-1),117.4 (C-2),142.0 (C-3),118.9 (C-4),144.7 (C-5),29.8 (C-6),37.9 (C-7),42.5 (C-8),115.2 (C-10),141.6 (C-11),47.8 (C-12),61.1 (C-13),47.5 (C-14),27.3 (C-15),22.2 (C-16),39.7 (2N-Me)。以上数据与文献报道一致[17]，故鉴定化合物10为8,15-dihydrohuperzinine。

化合物11：淡黄色粉末。HR-ESI-MS m/z:271.181 1[M+H]+（计算值271.180 5），提示其分子式为C17H22N2O。1H-NMR (400 MHz,CD3OD)δ:7.68 (1H,d,J=9.4 Hz,H-3),6.36 (1H,d,J=9.4 Hz,H-2),5.53 (1H,m,H-8),2.90 (1H,dd,J=9.6,8.2 Hz,H-9a),2.80 (1H,dd,J=17.6,5.1 Hz,H-6a),2.71 (1H,m,H-7),2.62 (3H,s,N-Me),2.47 (1H,d,J=16.4 Hz,H-14a),2.36 (1H,d,J=17.9 Hz,H-6b),2.33 (1H,dd,J=9.4,7.5 Hz,H-9b),2.13 (1H,d,J=16.4 Hz,H-14b),1.89 (1H,m,H-11),1.64 (1H,overlapped,H-12),1.64(3H,s,Me-16),1.07 (1H,d,J=6.5 Hz,H-10);13C-NMR(100 MHz,CD3OD) δ:165.6 (C-1),117.8 (C-2),144.0 (C-3),121.9 (C-4),142.4 (C-5),29.3 (C-6),31.5 (C-7),126.5(C-8),63.5 (C-9),17.7 (C-10),33.0 (C-11),52.6 (C-12),64.0 (C-13),42.8 (C-14),135.6 (C-15),23.4 (C-16),38.5(N-Me)。以上数据与文献报道一致[12]，故鉴定化合物11为casuarinine I。

4、讨论

本研究综合运用多种色谱和波谱技术，对藤石松总生物碱部位进行了化学成分研究，共分离鉴定了11个化合物，均为石松生物碱类化合物。其中，化合物1为新化合物，命名为6-羟基-β-玉柏碱。现代药理研究表明，石杉碱甲具有高效低毒、可逆并选择性抑制乙酰胆碱酯酶的活性[3]，这类生物碱已引起了国内外科学家注意。据文献报道，石松生物碱类成分表现出良好的抗胆碱酯酶活性[19],casuarine B(3）、N-demethylhuperzinine(8）和casuarinine I(11）对乙酰胆碱酯酶表现出一定的的抑制作用，IC50值分别为46.40[15]、15.0、12.1μmol/L[12]；石杉碱丙（9）和石杉碱甲两者在抗胆碱酯酶作用方面可能有一定的交互协同作用[20]。以上研究结果进一步丰富了藤石松的化学成分内涵，对阐明其药效物质提供了数据支持，也为其后续的开发应用提供了科学依据。

利益冲突 所有作者均声明不存在利益冲突

参考文献:

[1]中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志(第一卷-总论)[M].北京:科学出版社, 2004.

[2]江苏新医学院.中药大词典(上册)[M].缩印本.上海:上海科学技术出版社, 1986:2406.

[3]谢振,郑东昆,王强,等.石松生物碱化学成分和生物活性研究进展[J].中草药, 2022, 53(15):4862-4874.

[19]牛艳芬,崔圆圆,杨光忠,等.石松生物碱成分的研究[J].中草药, 2015, 46(9):1269-1276.

[20]谢家骏,谢德隆.石杉碱甲与石杉碱乙组合对乙酰胆碱酯酶抑制活性的增效减毒作用[J].中国新药与临床杂志, 2014, 33(2):142-145.

基金资助:国家自然科学基金项目(82104014);广州市基础与应用基础研究项目(2023A04J2478);

文章来源:陈烨琪,潘亚茹,卓越等.藤石松的生物碱类成分研究[J].中草药,2024,55(05):1460-1465.