摘要:目的:探讨在临床生化检验中应用改良终点法的疗效。方法:选择改良终点法和原终点法进行对比,分析改良终点法在临床生化检验中的应用意义,根据美国临床实验室标准化委员会制定的相关规定,对改良终点法和原终点法两种检验方法的相关性、线性进行评价分析。结果:实验发现,改良终点法和原终点法之间具有一定的相关性,两种方法的检测结果在临床上无较大差异,P>0.05表示统计学无意义。测量正常浓度的样品,改良终点法和原终点法的批内不精密度和总不精密度均为CV<2.60%。测量异常浓度的样品,改良终点法CV〈2.60%,原终点法CV〉2.60%。检验回归方程为:改良终点法y=1.0705x-0.2183;r=0.9982。原终点法y=1.4404x-2.9397;r=0.9791。结论:经过研究发现,改良终点法应用于临床生化检验,在对高浓度标本进行检验中具有更准确的精密度,改良终点法的测定线性范围更宽,对试剂的成分起到节约的作用,值得在临床大力推广应用。
终点法是临床最常用的检验方法之一,具体方法就是将需检验样品和试剂进行混合,在经过一段时间的反应后达到平衡点,也就是我们说的终点,样品的呈现反应处于稳定阶段以后,检验颜色对光的吸收强度,从而计算待测物的浓度[1]。终点法分为一点终点法和两点终点法,临床根据终点法的科学原理,研发设计改良终点法,本文通过改良终点法和原终点法的相关性研究,分析改良终点法应用在临床生化检验中的效果。
1、资料和方法
1.1 一般资料
选择改良终点法和原终点法进行对比,分析改良终点法在临床生化检验中的应用意义,根据美国临床实验室标准化委员会制定的相关规定,对改良终点法和原终点法两种检验方法的相关性、线性进行评价分析。选用日本岛津CL-8000全自动生化分析仪器,保证仪器处于良好的工作状态,选用北京中生北控生物科技有限公司生产的液体单试剂性葡萄糖测定试剂。选取美国RANDOX公司的标准血清以及美国伯乐公司的质控血清。选取我院2014~2015年门诊和住院60例患者的血清作为标准,60例患者均没有溶血、黄疸以及脂浊的情况,60例患者的血清在收集后1小时内检验完毕。
1.2 方法
设定仪器检验程序的参数,用RANDOX的标准血清定标,每次检验就要进行一次室内质控[2]。见表1。
表1 两种终点法程序参数设置
1.2.1 相关性分析 根据美国临床实验室标准化委员会制定的相关规定,每天收集10份中度和轻度浓度的葡萄糖为临床标本,分别采用改良终点法和原终点法按照顺序进行检测,重复检测的时候按照相反的顺序,然后取两次检测的平均值,试验连续进行10天,得到100份检测标本,然后将两种方法检验得出的结果采用t检验和线性回归分析[3]。
1.2.2 精密度分析 按照美国临床实验室标准化委员会制定的相关规定,选择质控血清两份,1份为正常浓度,1份为异常浓度,按照质控血清中的说明书在复溶后分别装到塑料管中,每个塑料管中有250μl的容量,然后封口放入零下20℃的冰箱中冷冻保存,取出后融化后检验,检测完毕后丢弃。对每份质控血清进行双份检测,每天进行两次试验,连续检测20天,从而计算批内不精密度和总不精密度[4]。
1.2.3 线性回归分析 按照美国临床实验室标准化委员会制定的相关规定,对两种检验方法进行线性范围的评价,在血清中加入111mmol/L的葡萄糖标准溶液,配成浓度为29.9mmol/L的标本以及浓度为3.59mmol/L的标本,低脂标本为1号标本,高值标本为2号标本,两种标本按照3:1的比例混合为3号标本,按照2:2的比例混合为4号标本,按照1:3的比例混合为5号标本。按照相应公式进行计算[5]。
1.3 统计学方法
应用SPSS11.0统计软件包进行统计学分析,计量资料用(x±s)表示,采用t检验;计数资料用X2进行检验,采用%表示,P〈0.05表示统计学有意义。
2、结果
2.1 相关性分析 实验发现,改良终点法和原终点法之间具有一定的相关性,两种方法的检测结果在临床上无较大差异,10天测定100分标本,检验回归方程为y=1.0112x-0.0381;r=0.9992。t检验结果为1.8982,P〉0.05表示统计学无意义。
2.2 精密度分析 测量正常浓度的样品,改良终点法和原终点法的批内不精密度和总不精密度均为CV〈2.60%。测量异常浓度的样品,改良终点法CV〈2.60%,原终点法CV〉2.60%。见表2。
表2 精密度分析
2.3 线性回归分析 检验回归方程为:改良终点法y=1.0705x-0.2183;r=0.9982。原终点法y=1.4404x-2.9397;r=0.9791。两种方法在检验低度和中度浓度样品是,线性回归关系较好,在检验高度浓度样品时,原终点法的线性范围较窄,改良发的线性浓度范围要宽于原终点法。见表3。
表3 线性回归分析
3、讨论
终点法是临床最常用的检验方法之一,具体方法就是将需检验样品和试剂进行混合,在经过一段时间的反应后达到平衡点,也就是我们说的终点,样品的呈现反应处于稳定阶段以后,检验颜色对光的吸收强度,从而计算待测物的浓度。终点法分为一点终点法和两点终点法,临床根据终点法的科学原理,研发设计改良终点法,根据美国临床实验室标准化委员会制定的相关规定,对改良终点法和原终点法两种检验方法的相关性、线性进行评价分析。
实验发现,改良终点法和原终点法之间具有一定的相关性,两种方法的检测结果在临床上无较大差异,P〉0.05表示统计学无意义。测量正常浓度的样品,改良终点法和原终点法的批内不精密度和总不精密度均为CV〈2.60%。测量异常浓度的样品,改良终点法CV〈2.60%,原终点法CV〉2.60%。检验回归方程为:改良终点法y=1.0705x-0.2183;r=0.9982。原终点法y=1.4404x-2.9397;r=0.9791。
随着全自动化生化检验分析仪器的应用,生化分析智能化已经成为未来临床检验的发展趋势,因此如何充分的利用检验设备的改良检验方法,节约临床上试剂的成本成为临床检验人员需要探索的内容,本文通过改良终点法和原终点法的相关性研究,分析改良终点法应用在临床生化检验中的效果发现,经过研究发现,改良终点法应用于临床生化检验,在对高浓度标本进行检验中具有更准确的精密度,改良终点法的测定线性范围更宽,对试剂的成分起到节约的作用,值得在临床大力推广应用。
参考文献:
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