首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 肿瘤科论文 > CD147在儿童Wilms瘤中的表达及意义

CD147在儿童Wilms瘤中的表达及意义

2023-11-15 48 上传者：管理员

摘要：目的探索CD147在儿童Wilms瘤中的表达及其临床意义。方法选取48例Wilms瘤患者作为研究对象，并选取非肾脏肿瘤儿童48例作为对照，采用免疫组织化学法检测CD147在受试患者中的表达情况，分析其临床意义。结果 CD147在Wilms瘤患者中的表达水平显著高于非肾脏肿瘤儿童(P<0.05)。CD147表达与Wilms瘤患者的性别、年龄、肿瘤转移不相关(P>0.05),但与肿瘤危险度分级、肿瘤长、肿瘤宽、临床分期、病理类型具有相关性(P<0.01)。结论 Wilms瘤患者中CD147呈现高水平表达，可以此辅助诊断儿童Wilms瘤。

关键词：
CD147
Wilms瘤
干细胞
生物标志物
诊断与治疗
加入收藏

肾母细胞瘤(wilms tumor, WT)是一类多发于3岁及以下幼儿中的实体肿瘤，其发病率在占15岁以下小儿泌尿系肿瘤的80%,占小儿腹部实体肿瘤的8%[1]。WT组织学上与肾发生的早期阶段相似，许多遗传变化和特征基因保留着肾胚胎期间的分子特征[2]。近年来，在多学科治疗技术发展下，约90%的WT预后较好；但仍有约10%的WT高危亚型患者，包括晚期患者、双侧WT患者和复发患者，预后情况并不乐观[3]。此外，约有15%低级别WT患者会发生复发，总生存率降至40%～80%[4]。临床上一直期待有生物标志物数据，来预测筛选高危高复发风险WTs患者，有效提高WT预后生存时间和质量。

肾干细胞功能异常、增殖并保留胚胎分化潜能，认为是WT的起源。近年来，研究发现CD147诱导分泌的透明质酸能与CD44协同作用，调控CSC关键转录因子如Twist、Snail和Oct4,对CSC性质维持至关重要[5]。CD147是一种免疫球蛋白超家族的单次跨膜蛋白，可刺激基质金属蛋白酶和血管内皮生长因子的产生[6]。CD147过表达与肿瘤侵袭、多药耐药和不良预后正相关[7]。在肾细胞癌患者中CD147过表达的患者预后与低表达患者相比更低[8]。目前关于CD147在WT中的表达情况还不清楚，为此，本研究将首次分析CD147在儿童WT组织中的表达情况，并分析其作为生物标志物在预后预测中的应用价值。

1、材料与方法

1.1 一般资料

回顾性收集2014年7月至2021年12月期间我院收治的48例WT瘤患者作为研究对象。纳入标准：年龄≤12岁；经临床病理学确诊为WT;未进行放化疗而直接进行手术治疗；均为单侧WT;WT临床分期采用CCCG-WT-2016版本[9]。排除标准：有其他恶性肿瘤史；就诊时已发生局部转移现象；合并心血管系统、神经系统、呼吸系统严重疾病患者；既往接受过肾脏手术患者；因精神疾病、认知障碍、智力障碍等无法配合完成相关治疗、检测、随访等情况患者。对照组为我院同期收治的行泌尿系手术的非肾脏肿瘤患者，如重复肾、肾积水、输尿管扩张等患者。所有患者随访时间截止至发稿前，随访方式为电话及门诊复查随访，随访内容为患者生存情况。本研究通过江西省儿童医院伦理委员会批准 (JXSETYY-YXKY--20220295)。

1.2 方法

所有患者肿瘤组织手术切除离体后4%中性福尔马林固定，常规石蜡包埋，进行切片制作(厚度约4 μm)。在进行CD147一抗(兔抗人单克隆抗体，北京中杉金桥)孵育之前，进行切片的脱蜡和高温高压修复，3%过氧化氢溶液阻断和10%的山羊血清封闭。CD147以1∶150溶度滴入组织区域进行过夜孵育反应后，PBS冲洗后滴入50 μl二抗(山羊抗兔HRP聚合物，Abcam)孵育；经DAB显色，再进行苏木精复染、脱水、封片，光镜下观察结果。结果判定标准：光学显微镜下随机选择5个高倍视野(×200),统计其中的阳性细胞数量；CD147阳性细胞为细胞膜和细胞质呈棕褐色，阳性细胞数为0为0分，≤25%为1分，>25%～50%为2分，>50%～75%为3分，>75%为4分；染色强度：无着色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2,褐黄色为3分。最终评分综合阳性细胞数和染色强度，将两项评分相乘结果，0分为阴性(-),1～4分为弱阳性(+),4～8分为中阳性(++),8～12分为强阳性(+++)[10]。

1.3 观察指标

(1)CD147表达情况：分析比较CD147在WT组织细胞内的表达定位情况。(2)CD147表达与临床病理关系：比较不同CD147表达患者年龄、性别、肿瘤大小、肿瘤分期、病理分级等临床病理特征间的差异。(3)CD147表达与预后关系：统计患者存活率，并比较不同CD147表达患者存活率差异。

1.4 统计学方法

采用SPSS 24.0统计软件对数据进行统计处理。两组独立样本差异比较，满足正态性时运用独立样本t检验，不满足时运用非参数秩和检验。正态分布计量资料以均数±标准差表示，非正态分布计量资料以中值加四分位数来表示，以P<0.05为有显著性差异。

2、结果

2.1 入组研究患者临床信息与病理特征描述

48例Wilms瘤患者中男性23例(47.92%),女性25例(52.08%);年龄在4个月～8岁之间，平均年龄(2.86±1.65)岁；左侧发病23例，右侧发病25例；就诊时主诉无痛性腹部包块17例，腹痛11例，肉眼血尿10例，体检发现3例，腹胀3例，呕吐1例，外伤3例；临床分期Ⅰ期3例，Ⅱ期27例，Ⅲ期15例，Ⅳ期3例；肿瘤大小在5～25 cm之间，平均大小(11.38±3.82)cm。所有患者均接受手术+化疗综合治疗，3例患者行手术+放化疗综合治疗。

2.2 CD147表达情况

阳性样本表现为棕黄色，多着色于细胞膜，胞质着色较少。CD147在胚芽和上皮成分中表现为细胞膜阳性，在间叶成分中表现为细胞质阳性。48例Wilms瘤患者中CD147阴性表达(-)为10例(20.83%),弱阳性(+)表达为1例(2.01%),中阳性(++)表达为4例(8.33%),强阳性(+++)表达为33例(68.75%)。CD147在Wilms瘤患者中的阳性表达率为79.17%(38/48),显著高于非肾脏肿瘤儿童的2.08%(1/48)(χ2=59.120,P=0.000)。

2.3 CD147表达与Wilms瘤患者临床病理的相关性

CD147表达情况与患者的性别、年龄、肿瘤转移不具有相关性(P>0.05),但与肿瘤危险度分级、肿瘤长、肿瘤宽、临床分期、病理类型具有相关性(P<0.01)(表1)。

2.4 CD147表达与总生存时间的关系

48例WT患者的存活率为72.92%(35/48),其中CD147阳性表达患者存活率为65.79%(25/38),低于CD147阴性表达患者的存活率100.00%(10/10),差异具有统计学意义(χ2=4.103,P=0.043)(图1)。

3、讨论

WT是10岁及以下儿童常见的一类腹部恶性肿瘤，主要依赖于腹部平片、排泄性尿路造影、腹部超声等影像学检查方式进行诊断。腹部超声作为最简单的检查方式之一，其诊断准确率可高达85%,但患者若伴有肾功能不全、下腔静脉瘤栓等情况时，则存在一定的诊断难度[11]。WT早期症状不典型，最主要的症状为腹部包块，在实际诊断过程中常误诊、漏诊，术后监测困难[12]。临床上一直期待发现有效的生物标志物能预测高危的患者，并针对性地采取干预策略。

CD147也被称为细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(EMMPRIN)、碱性蛋白、M6和肿瘤细胞来源的胶原酶刺激因子，是分布广泛的跨膜糖蛋白，其参与机体的多种生理及病理过程。相关研究表明，CD147常在宫颈癌、乳腺癌、肺癌、膀胱癌、肝癌、胃癌、白血病、甲状腺癌、前列腺癌等恶性肿瘤患者间具有高水平表现，且与患者肿瘤恶性程度呈正比增长[13,14]。CD147在成纤维细胞及内皮细胞间分泌细胞外基质金属蛋白酶，对细胞外基质起到降解作用，促进肿瘤细胞的浸润与转移[10]。CD147在肺癌中高表达并正调控VEGF的表达，增强肺癌血管生成能力与侵袭能力[15]。抑制CD147则成为现阶段治疗肿瘤的一类新方式[16]。CD147在各种癌细胞中过表达，并通过激活主要的致癌信号通路促进癌细胞的增殖、转移、血管生成和干细胞性[17,18]。这些发现揭示了CD147作为各种人类疾病(包括癌症)的生物标志物或治疗靶点的潜力。

表1 CD147表达情况与Wilms瘤病理参数的相关性分析

图1 CD147表达情况与生存时间的Kaplan-Meier曲线

CD147通过与整合素β1相互作用诱导肝细胞癌对放疗的抵抗[19]。此外，CD147刺激透明质酸(HA)的产生，透明质酸通过与前列腺癌中的CD44和HA受体相互作用来促进肿瘤化学耐受[20]。分子AC-73是CD147的第一个特异性抑制剂，可破坏CD147二聚化[21]。AC-73通过阻断CD147刺激的MAPK/STAT3信号通路来减少MMP-2的产生，从而抑制肝细胞癌转移[21]。除了靶向CD147的小分子化合物外，抗CD147药物美妥昔单抗(Licartin)可预防晚期肝细胞癌患者原位肝移植或经皮射频消融术后肿瘤复发[22]。RNAi抑制CD147可抑制结直肠CSC的增殖和侵袭，并通过抑制干性标志物增强化学敏感性[23]。因此，靶向CD147作用的药物可以抑制癌症的生长、转移，减弱化学/放射耐药性。

在本研究中，我们确定了CD147的表达与临床特征之间的关系，包括危险度分级、肿瘤长、肿瘤宽、临床分期、病理类型。CD147在中晚期Wilms瘤患者中表达更加明显，CD147高表达的患者，其预后也更差，提示CD147具有较好的预后预测价值。此外，在组织中低分化、存在脉管或淋巴结侵袭的患者在CD147呈高阳性表达，且CD147的表达情况还与Wilms肿瘤的大小有关，提示CD147表达可作为判断Wilms瘤患者肿瘤浸润、转移及预后的潜在指标。以上研究，推测CD147可能在儿童WT的发生发展中扮演重要的作用，其在WT干细胞特征维持中可能具有正向调控作用。

综上所述，CD147是WT诊断和高危预测极好的一种潜在生物标志物，其在外周血中进行无创诊断的转化应用具有较好的前景。

参考文献:

[7]陆蒙.CD147诱导肝细胞极性丢失促进肝癌进展的分子机制研究[D].空军军医大学,2018.

[8]黄凇崧,何常,严瑞,等.CD147 和 EGFR 及 HIF-1α 在透明细胞肾细胞癌中的表达及意义[J].贵州医科大学学报,2020,45(6):689-693,732.

[9]汤静燕,徐敏,孙晓非.儿童肾母细胞瘤诊断治疗建议(CCCG-WT-2016)[J].中华儿科杂志,2017,55(2):90-94.

[11]田小毛,马伟,石秦林,等.CCCG-WT-2016方案治疗43例Wilms肿瘤临床分析[J].临床儿科杂志,2020,38(12):915-920.

[13]雷海科,李小升,赵玉兰,等.2011―2018年重庆多中心恶性肿瘤出院患者生存分析[J].中国肿瘤,2020,29(03):192-198.

[14]蒋丽君,张伟,钮晖,等.379例晚期恶性肿瘤患者凝血功能的改变及其临床意义[J].宁夏医科大学学报,2019,41(07):681-684.

[15]吴雪峰,孙洪帅,李晓鸥,等.CD147在多种肿瘤患者血清中的表达及其临床意义[J].中国实验诊断学,2018,22(10):1760-1761.

[16]黄珍,沈浩明,邓红玉,等.MiR-125b-5p抑制卵巢癌细胞的迁移和侵袭:基于靶向下调CD147的表达[J].J South Med Univ,2022,42(9):1389-1396.

基金资助:江西省卫生健康委科技计划项目(编号:202311016);

文章来源:徐晗,黄慧,杨柳青.CD147在儿童Wilms瘤中的表达及意义[J].实用癌症杂志,2023,38(11):1797-1800.