木香槟榔丸一方在《儒门事亲》中第一次出现，由金代攻邪派医家张从正首创，有行气、消食化积的功用，后元代朱丹溪在此基础上加入了枳壳。本次研究所选用的，是目前临床使用较为广泛的《丹溪心法》中所载的由木香、槟榔、陈皮、青皮、莪术、黄连、黄柏、大黄、香附、牵牛子、枳壳构成的木香槟榔丸方，其不仅可以治疗食积证，还有强劲的行气攻积之效，集行气、破气、下气于一方。木香和槟榔配伍有行气导滞，调中止痛，除里急后重之功；大黄和牵牛亦有攻下导滞，泻热通便之效；青皮和香附可以疏肝理气，助木香、槟榔之力；陈皮可以理气和胃；枳壳可以宽肠理气；黄连和黄柏同用，加大其清热燥湿、泻火解毒的效果；莪术可破气中血滞。

中医重视整体观念，单味药治疗无法兼顾复杂的病机变化，因此临床从整体出发，辨证论治，标本兼顾，遣方用药。木香槟榔丸对于胃损伤的预防是否有效以及其作用机制尚未存在明确的研究，若其对于胃损伤有预防作用，则对于乙醇所致胃损伤患者在临床上的用药有参考价值。本文拟观察木香槟榔丸全方对小鼠血中肿瘤坏死因子(TNF-α)和胃匀浆中胃蛋白酶原(PGⅠ、PGⅡ)的影响，探讨木香槟榔丸全方对小鼠乙醇所致胃损伤的防治作用。

1、材料及方法

1.1 实验材料

1.1.1 实验动物

健康KM小鼠60只，雄鼠，体质量20～25 g, 斯贝福(北京)生物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2019-0010。普通饲料，斯贝福(北京)生物技术有限公司，许可证号：SCXK(京)2019-0010。本实验研究严格遵守《实验动物管理条例》,并获得内蒙古科技大学包头医学院动物试验伦理委员会批准。

1.1.2 实验药物

木香槟榔丸全方，参考《中华人民共和国药典》[1]2010年版一部收载的成方制剂木香槟榔丸处方配制而成，包括木香1 g、槟榔1 g、青皮1 g、陈皮1 g、莪术1 g、黄连1 g、黄柏3 g、大黄3 g、香附子(炒)4 g、牵牛4 g、枳壳1 g。临床指导用量为3～6 g, 按药理实验方法换算得每只小鼠灌胃木香槟榔丸冲剂用量0.3 mL。白酒(56°,北京红星股份有限公司，20181208)。

1.1.3 主要试剂

小鼠胃蛋白酶原(PGⅠ、PGⅡ)酶联免疫分析试剂、肿瘤坏死因子(TNF-α)酶联免疫分析试剂由斯贝福(北京)生物技术有限公司提供，许可证号SCXK(京)2019-0010,货号KE10002。

1.1.4 主要实验仪器

4 ℃、-80 ℃冻存冰箱(海尔公司),组织破碎仪(SONICS&MATERIALS. INC公司，型号：VCX500),离心机(美国Thermo公司),450 nm酶标仪(美国Thermo公司，型号：Thermo Scienti fic Multiskan FC)。

1.2 实验方法

1.2.1 动物分组

小鼠鼠尾标记后采用分层抽样法随机分为3组，即空白对照组12只(A组)、模型组24只(B组)、木香槟榔丸干预组24只(C组)。

1.2.2 动物饲养、造模及给药

适应性喂养所有小鼠48 h, A组给予常规的饲料和生理盐水(小鼠体重×0.8 mL/kg生理盐水+0.3 mL生理盐水),B组给予常规的饲料、56°白酒和生理盐水(小鼠体重×0.8 mL/kg白酒+0.3 mL生理盐水),C组给予常规饲料、56°白酒和木香槟榔丸全方冲剂(小鼠体重×0.8 mL/kg白酒+0.3 mL木香槟榔丸全方冲剂),每24 h 1次，各组均自由摄食和饮水，连续 7 d。

1.2.3 标本采集

所有小鼠禁食禁水16 h后，称量各组小鼠体重，将小鼠腹腔注射水合氯醛进行麻醉，并从腹主动脉采取血液，4 ℃ 4 000 r离心10 min, 取上清液-80 ℃冻存，两天后4 ℃待检；处死取胃后，洗净称量与生理盐水按比例(1∶5)制备匀浆后，4 ℃ 4 000 r离心10 min后，留上清液-80 ℃冻存。

1.2.4 检测方法

胃蛋白酶原(pepsinogen)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α)均采用酶联免疫分析法测定，按照两试剂盒详细说明书进行实验操作。

1.2.5 统计学处理

将收集的数据资料录入SPSS统计学软件，由于数据均为计量数据，故正态分布资料采用均数±标准差分析，组间比较采用单因素方差分析，以P<0.05表示差异具有统计学意义。

2、结果

2.1 一般情况

造模组的小鼠相比于空白对照组的小鼠出现体重增加减慢，饮食量少，排便异常等表现。处死小鼠后发现胃出现明显胀气、出血倾向，与临床胃损伤症状相似，提示造模成功。从A组、B组、C组中分别随机抽取小鼠两只，采用颈椎脱臼法处死并解剖小鼠，造模组(B组和C组)与空白对照组(A组)相比，小鼠胃肠腔扩大伴有胃壁变薄。试验期间，因灌胃等操作，造成部分小鼠死亡，运用随机抽样法，将各组小鼠数量调整为8只。

2.2 胃蛋白酶原(PGⅠ、PGⅡ)和肿瘤坏死因子(TNF-α)测定结果

与A组相比，B组PGⅠ含量明显降低(P<0.05),PGⅡ含量明显升高(P<0.05),TNF-α含量明显升高(P<0.05);与B组相比，C组PGⅠ含量明显升高(P<0.05),PGⅡ含量明显降低(P<0.05),TNF-α含量明显降低(P<0.05)。见表1。

表1 三组小鼠PG和TNF-α含量

3、讨论

酒精依赖和滥用成为目前我国甚至全球备受关注的健康问题[2]。多数药品代谢主要是通过肝脏，但乙醇的首过代谢(First pass metabolism, FPM)部位是胃，即乙醇进入体内后约有15%～30%的乙醇在消化道内被氧化代谢[3]。研究表明，乙醇对胃黏膜存在直接损伤[4]。长期大量饮酒，会使急性胃炎的发病率增高。急性胃炎临床表现为嗳气、恶心、呕吐、食欲减退、上腹胀痛或腹泻等，严重者呕吐物中可见血丝。乙醇具有脂溶性，易破坏胃表层上皮的细胞膜，增强细胞膜的通透性，并收缩黏膜的微循环血管，使黏膜缺血缺氧，引起大面积胃损伤[5],可能造成胃炎、胃出血、胃溃疡等。乙醇对机体的损伤不仅是乙醇本身的直接损伤，还有代谢效应的影响。研究发现，乙醇摄入机体后，首先经胃肠道代谢，乙醇中的乙醇分子及其代谢产物乙醛可通过多种途径破坏胃黏膜防御系统。此外，高浓度的乙醇对胃黏膜有着强刺激，可以使黏膜上皮细胞变性坏死。酒精性胃炎发病时常表现为腹部烧灼样痛，甚至出现便血、呕血等情况[6]。乙醇致胃黏膜急性损伤是临床上的多发病、常见病。在本实验造模的过程中，小鼠存在死亡现象，且与空白对照组相比，B组的存活时间明显缩短，生存率降低，说明饮酒会对小鼠的寿命产生影响。与B组相比，木香槟榔丸全方干预组的生存时间较长，生存率升高，说明木香槟榔丸全方对饮酒小鼠有保护作用。

西医中的酒精性胃炎在中医中属于“胃脘痛”“痞满”等范畴。中医学认为过量饮酒，可以致使湿热有毒之邪困遏脾置，脾管失和，等失隆浊，以至气机不畅。《新修本草》中就曾写道：“酒，味苦，大热有毒”。酒本辛温，但长期大量饮酒，势必伤害胃络，胃与脾常同病，久病必虚，最终致使脾胃受损，胃失和降[4]。湿热毒积蓄于人体脏腑经络，方可致疾患，而脾胃被称为水谷之海，气血化生之源，酒入则脾胃先受邪，脾胃失职难以运化，湿热相搏而停聚中焦，故生胃痛腹满[4]。从胃的生理功能分析，六腑宜通降，胃以和降为顺，故因滞而病。胃喜润而恶燥，易阳六而燥热，需津液不竭加以滋润方能维系胃腑的良好功能[3]。中医认为其病机特点为胃阴亏虚而导致胃络瘀阻、气虚胃燥。该病之标为瘀阻，因虚而实，虚实夹杂。因此临床治疗此病多以清热利湿为主。

木香槟榔丸的组方立意典型地体现了“六腑以通为用”的理论原则，可广泛用于治疗胃炎、胃瘫、胆囊炎、胰腺炎、细菌性痢疾、溃疡性结肠炎、肠易激综合征、肠功能紊乱、习惯性便秘、胃肠神经官能症等各种消化系统的器质性及功能性疾病。木香槟榔丸由于具有行气导滞、攻积泄热的作用，此凡是气滞、湿蕴、食积、痰阻、热郁在肠道的实证，症见嗳气，呕吐，纳食不化，胃痞胃痛，脘腹胀满疼痛，便秘痢疾等症，均可运用[7]。伏光耀等人用LC-MS/MS法测定木香槟榔丸中有去氢木香内酯、α-香附酮、氢溴酸槟榔碱、盐酸小檗碱、橙皮苷、大黄素、大黄酚等有效成分[8],对人体有重要的药理作用。研究发现，其有效成分中的倍半萜类能够通过抑制炎性因子发挥抗炎作用，其木香中的提取物去氢木香内酯和木香烃内酯等成分对多种肿瘤细胞有着显著的抑制效果[9]。对于消化系统，其有效成分木香烃内酯、去氢木香内酯等具有抗胃溃疡的作用，其煎剂能够在利胆的同时促胃动力[10]。槟榔在《本草撮要》中记载：“味苦辛。入手足阳明经。功专宣利脏腑壅滞。得枳实治伤寒痞满。”槟榔与木香搭配有调气之功，与黄芩、枳壳配伍又可宽肠理气，在治疗虫积腹痛，积滞泻痢等疾病时效果可观。研究表明，槟榔碱是一种M胆碱受体激动剂，使胃肠平滑肌张力升高，从而增加胃肠蠕动和唾液分泌，促进消化的同时槟榔碱还可以减少白细胞介素-6在肿瘤细胞里的含量，降低基底细胞癌的发生率[11]。青皮有疏肝破气、消积化滞的功效，临床可治疗食积腹痛。研究表明，青皮挥发油中有d-柠檬烯、正二十烷等多种化学成分[12],其对胃肠道的温和刺激，可促进消化液分泌，使积气排出肠道。陈皮，在《名医别录》中载：“(陈皮)下气，止呕咳。”陈皮可梳理脾胃之气以健脾，又可去中焦之湿气，临床主要用于治疗脘腹胀满，食少吐泻等。研究表明，陈皮提取物对胃肠肌有双向调节作用，一方面抑制离体动物的胃肠平滑肌，另一方面又促进在体动物的胃排空并且抑制肠的推进[13]。枳壳，在《本草纲目》中有载：“(枳壳)治里急后重。”枳壳有理气宽中、行滞消积的功效，临床可治疗食积呕逆、下痢后重等。研究表明，枳壳中的挥发油是枳壳药理作用的重要因素，有促进胃肠道排空，加速肠蠕动的作用[14]。 黄连，在《神农本草经》中载：“(黄连)主治热气……腹痛，下痢。”黄连可清脾胃、大肠的湿热，亦可清中焦实火，尤其用于泻心胃之火，是治疗心热烦扰不寐、胃火呕吐、消谷及湿热泻痢等疾病的首选之物。研究表明，黄连能够很好地调节免疫反应[15]。黄柏，在《本草经疏》中载：“黄檗，主五脏肠胃中结热。”研究证明，黄柏能够显著增强离体动物肠道的收缩和弛豫能力。 莪术在临床可治疗食积不化的脘腹胀痛。研究表明，莪术能抑制多种肿瘤疾病的发生，包括实体肿瘤如胃癌，以及血液系统肿瘤等[16]。大黄，在《本草纲目》中记载：“(大黄)可里急腹痛……实热燥结。”大黄有泻下攻积，涤荡胃肠的功效，可治疗热结便秘，此外还可用于治疗寒积便秘、饮食积滞、肠道湿热积滞。研究表明，大黄素通过抑制ERK1/2-PKM2通路可以诱导P53高表达，进一步抑制胃癌细胞的增殖及迁徙，从而促进胃癌细胞的凋亡[17]。 牵牛子有逐痰消饮，通大肠气秘风秘的功效。牵牛小剂量服用可以消积通便，临床中常治疗胃肠湿热积滞，大便秘结等疾病。研究表明，牵牛子泻下的主要作用机制是牵牛子苷在肠道内与胆汁及肠液反应后分解出牵牛子素[18]。香附，在《滇南本草》中载：“(香附)调血中之气……消食。”研究表明，香附还有抗菌消炎、解痉镇挛、保护胃黏膜的作用[19]。中医对有关乙醇性胃黏膜损伤的保护研究越来越多。本实验中，中药复方制剂在防治急性酒精性胃黏膜损伤方面作用比较全面，主要是通过以下几种途径来实现对胃的保护作用：抑制胃酸、胃蛋白酶的分泌，强化胃黏膜-黏液屏障作用，改善胃黏膜血液循环，诱导胃黏膜内源性保护因子的合成和释放，促进胃黏膜更新。

PG水平是一个反映胃黏膜功能和状态的重要参考指标[20]。PG一般分PGⅠ和PGⅡ两个亚型，其中PGⅠ能检测胃底腺细胞的功能，PGⅠ下降时表示胃酸分泌减少或腺体萎缩；PGⅡ与胃底黏膜病变的相关性较大，胃底腺管萎缩、胃上皮化生等胃底黏膜病变都会使其上升，当PGⅠ也降低到某个值时，提示有罹患癌症的风险。本研究发现，与空白对照组相比，模型对照组PGⅠ下降明显(P<0.05),PGⅡ升高明显(P<0.05),提示乙醇对小鼠胃酸分泌产生影响或造成腺体萎缩；与模型对照组相比，木香槟榔丸全方干预组PGⅠ含量上升(P<0.05),PGⅡ含量下降(P<0.05),提示木香槟榔丸全方对饮酒小鼠起到保护作用。

TNF-α是一种主要由巨噬细胞和单核细胞产生的促炎因子，在炎症和免疫反应中较为重要，参与机体的免疫、炎症、抗感染等作用。研究表明，TNF-α是参与内源性溃疡形成最关键的炎性细胞因子[21],其损害作用主要表现为增加血管通透性，减少胃黏膜血流量，促进白三烯等炎性介质及消化酶释放。TNF-α是细胞因子中与胃黏膜损伤关系最为密切的，乙醇所致胃损伤使TNF-α含量明显升高[22]。乙醇导致胃黏膜损伤造成的TNF-α增高可能是TNF与白细胞介素一起的免疫促炎作用的结果，此外，TNF还有扩张血管的作用，这可能与黏膜损伤修复中增加了黏膜的血流量有关。本次实验结果显示：与空白对照组相比，灌胃模型组小鼠血清中TNF-α水平显著升高(P<0.05),提示乙醇对小鼠造成胃损伤；与模型对照组相比，木香槟榔丸全方干预组小鼠血清中TNF-α水平降低(P<0.05),提示木香槟榔丸全方对饮酒小鼠有保护作用。

本实验中，处死并解剖小鼠后对比发现，模型组小鼠胃肠腔扩大伴有胃壁超薄，胃黏膜表面上皮细胞变性并有脱落，胃黏膜内有明显充血，水肿，胃损伤情况明显高于空白对照组和木香槟榔丸全方干预组。由此可见，乙醇对小鼠具有胃损伤作用，木香槟榔丸全方对小鼠具有保护作用。

本实验证明采用中医配方：木香槟榔丸全方(木香、槟榔、青皮、陈皮、莪术、黄连、黄柏、大黄、香附、牵牛子、枳壳)对小鼠酒精性胃损伤有较为理想的预防效果。方中各药共同作用，体现了中医的整体观念。

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文章来源:高玥,庄添瑞,高蕾,等.木香槟榔丸全方对小鼠肿瘤坏死因子α含量和胃蛋白酶原的影响[J].包头医学院学报,2024,40(04):15-19+58.