摘要:目的探究脑膜瘤相关蛋白(MAC30)表达水平对非小细胞肺癌患者化疗效果及预后的影响。方法选取64例NSCLC患者作为研究对象,使用TC方案进行化疗。采用免疫组织化学法检测肿瘤组织及癌旁组织中MAC30的表达情况,采用RT-PCR技术检测MAC30mRNA表达水平,分析MAC30水平与化疗效果的关系,采用Kaplan-Meier生存曲线分析MAC30水平与患者预后的关系。结果MAC30蛋白在NSCLC组织中高表达率为81.25%,明显高于癌旁组织中高表达率23.44%(P<0.001);NSCLC组织中MAC30mRNA水平明显高于癌旁组织(P<0.001)。MAC30表达水平与NSCLC患者年龄、性别及肿瘤病理类型无关(P>0.05),与肿瘤TNM分期、有无淋巴结转移和分化程度相关(P<0.001)。不同效果组的患者组织MAC30mRNA水平差异具有统计学意义(P<0.001),CR组及PR组患者MAC30mRNA水平明显低于PD组患者(P<0.05)。MAC30高表达患者生存率明显低于低表达患者(P<0.05)。结论MAC30在NSCLC组织中高表达且与化疗效果和预后相关,可能作为NSCLC化疗效果及患者预后的相关评估指标。
根据2018年WHO统计数据显示,全球新发肺癌病例超过200万人,因肺癌导致的死亡人数超过170万[1],而在我国肺癌的发病率位列所有恶性肿瘤第一位,且近年来患病人数呈现上升和年轻化的趋势[2]。非小细胞肺癌(NSCLC)占肺癌的80%以上,具有恶性程度高、易复发和转移等特点[3],早期NSCLC发病隐匿且缺乏相关诊断指标,常导致患者预后不良的发生[4]。
随着医疗事业的进步,各种靶向药物、免疫制剂在治疗NSCLC中取得良好效果[5],但患者5年生存率仍低于20%。目前对NSCLC发病分子机制的研究尚不完全明确,寻找新的标志物,完善疾病的分子机制对NSCLC的诊疗及预后评估具有重大意义。脑膜瘤相关蛋白(meningiomaassociatedprotein30,MAC30)属于胰岛素样生长因子结合蛋白家族[6],在睾丸、胃肠道等正常组织中均有表达,相关研究表明MAC30在结肠癌、乳腺癌等肿瘤中表达增多且常与肿瘤预后不良相关,且MAC30能够导致化疗耐药的发生[7],但相关机制尚不明确。本研究采用免疫组织化学法检测MAC30在NSCLC及癌旁组织中的表达,采用RT-PCR技术检测MAC30mRNA表达水平,探讨MAC30与NSCLC化疗效果及预后的关系。
1、材料与方法
1.1 一般资料
选取2014年8月至2017年8月于本院就诊的64例NSCLC患者作为研究对象,诊断依据《CSCO原发性肺癌诊疗指南(2016)》[8],依据国际抗癌联合会(UICC)第七版肺癌TNM分期标准对肿瘤进行分期[9]。纳入标准:①患者经细胞学检查、病理诊断确诊为NSCLC;②患者身体状况良好,无化疗禁忌证;③患者均为初诊,未经过放化疗、靶向治疗及生物免疫治疗。排除标准:①合并其他恶性肿瘤患者;②不能耐受化疗患者;③临床资料不全患者。研究对象中男性41例,女性23例,年龄42~74岁,平均年龄(61±9.17)岁。研究对象及家属均签署研究知情同意书,本研究经医院医学伦理委员会审核通过。
1.2 化疗方案及效果评估
患者行肺癌根治术后使用TC方案即紫杉醇(PTX)+卡铂(CBP)方案进行化疗[8],紫杉醇注射液静滴,175mg/m2;卡铂注射液静滴,AUC=5(mg/ml.min),化疗周期为21d,患者最多治疗6个周期,平均4个周期。周期开始时若患者不良反应尚未恢复可适当推迟,最长不超过14d。若患者发生严重不良反应时应下调用药剂量或暂停用药,PTX下调为135mg/m2、CBP下调为AUC=4(mg/ml.min)。治疗结束后依据实体肿瘤治疗反应评价指南[10]将患者分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、疾病稳定(SD)和疾病进展(PD)。
1.3 免疫组织化学法检测组织中MAC30表达情况
使用SP免疫组化试剂盒(北京中杉金桥生物技术公司)检测患者肿瘤组织及癌旁组织中MAC30表达情况,MAC30定位于细胞质中,染色后呈棕黄色颗粒。染色结果判断标准:按阳性细胞占比计分,≤5%记0分、>5%~25%记1分、>25%~50%记2分、>50%~75%记3分、>75%记4分。按着色程度计分,无染色记0分、浅黄色记1分、棕黄色记2分、深棕色记3分。以二者得分相乘为最终结果,>6分为高表达,≤6分为低表达。
1.4 RT-PCR技术检测MAC30mRNA表达水平
使用Trizol法提取患者组织中总RNA,酶标仪检测RNA质量。使用Takara逆转录试剂盒(大连宝生物公司)合成cDNA模板,使用美国solarbio公司通用RT-PCR试剂盒(M-MLV)检测MAC30mRNA表达水平。反应条件为94℃预变性5min,94℃30s、55℃30s、72℃60s,共35个循环,引物委托上海生工生物公司合成。
1.5 统计分析
所有数据使用SPSS21.0软件分析,数据中符合正态分布的计量资料采用(x¯±s)表示,采用Student-t检验;计数资料以例或率表示,采用χ2检验;采用Kaplan-Meier生存曲线对比2组患者生存情况。以P<0.05为差异具有统计学意义。
2、结果
2.1 MAC30在NSCLC组织及癌旁组织中的表达情况
免疫组化结果显示MAC30在NSCLC组织中高表达率为81.25%(52/64),而癌旁组织中高表达率为23.44%(15/64),MAC30在NSCLC组织中高表达率明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(χ2=42.881,P<0.001)。
2.2 MAC30mRNA在NSCLC组织及癌旁组织中的表达水平
RT-PCR结果显示NSCLC组织中MAC30mRNA相对表达量为(0.74±0.22),而癌旁组织中MAC30mRNA相对表达量为(0.51±0.13),NSCLC组织中MAC30mRNA水平明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(t=7.201,P<0.001)。
2.3 MAC30水平与患者临床资料的关系
单因素分析结果显示,MAC30表达水平与患者年龄、性别及肿瘤病理类型无关(P>0.05),而与患者TNM分期、有无淋巴结转移和肿瘤分化程度相关(P<0.001),见表1。
2.4 MAC30mRNA水平与化疗效果的关系
64例NSCLC患者根据化疗效果分为CR组11例、PR组19例、SD组20例、PD组14例。取得不同化疗效果的患者组织MAC30mRNA水平分别为CR组0.53±0.12、PR组0.59±0.17、SD组0.68±0.19、PD组0.87±0.21,差异具有统计学意义(F=9.350,P<0.001),CR组及PR组患者MAC30mRNA水平明显低于PD组患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。
2.5 MAC30水平与患者预后的关系
采用门诊、微信、邮件等方式对患者进行随访,间隔3个月,以患者死亡或截止到2020年8月计算生存率。64例NSCLC患者死亡25例、存活37例、失访2例,存活率57.81%,死亡患者均死于肿瘤复发或相关并发症。采用Kaplan-Meier生存曲线分析MAC30水平与患者预后的关系,结果表明组织中MAC30高表达的NSCLC患者生存率明显低于低表达患者,差异具有统计学意义(P<0.05),见图1。
3、讨论
MAC30最初被发现在脑膜瘤中过度表达,后续研究发现食管癌、乳腺癌、大肠癌等恶性肿瘤中也存在MAC30表达上调的情况[11],提示其促进了肿瘤的生长和转移。MAC30是胰岛素样生长因子结合蛋白家族成员,通过调控胰岛素样生长因子(IGF)发挥生理学作用[12]。MAC30基因位于常染色体17q11.2,其编码的cDNA包含5个拓扑结构域和4个跨膜结构域[13],主要分布于细胞核及内质网之中。本研究发现在NSCLC患者组织中MAC30表达较癌旁组织相比明显上调,且MAC30的高表达与患者TNM分期、有无淋巴结转移和肿瘤分化程度相关,提示MAC30在NSCLC中发挥促瘤作用,其高表达可能与肿瘤疾病的进展和转移相关。
研究表明MAC30能够通过靶向PI3K/AKT通路调控肿瘤疾病的发生发展[14]。现有研究已证实PI3K/AKT通路在肿瘤中异常激活,通过上调VEGF、IL-8等细胞因子水平诱导肿瘤进一步恶化,发挥其促瘤作用[15],而PI3K/AKT通路还能够调控PD-1/PD-L1等免疫检查点蛋白的表达水平,通过上调PD-1/PD-L1的表达诱导肿瘤免疫逃逸和肿瘤耐药的发生[16]。本研究发现不同化疗效果组中患者组织MAC30mRNA水平存在明显差异且CR组及PR组患者MAC30mRNA水平明显低于PD组患者,说明MAC30高表达能够对患者化疗效果产生消极影响。研究发现敲低MAC30后p-AKT表达水平明显下降,且PI3K/AKT通路下游蛋白Bcl-2、Bax、CyclinD1等表达水平下降[17],可能通过自噬途径调控细胞周期、细胞增殖和凋亡。而MAC30高表达通过上调AKT磷酸化水平导致PI3K/AKT通路过度激活,促进肿瘤的进展和转移[18],MAC30高表达患者化疗效果较差可能与PD-1/PD-L1高表达导致的化疗耐药或细胞自噬水平改变相关,结果与文献报道结果一致[15,16],但相关机制尚不完全明确,需要进一步研究。
本研究还发现MAC30高表达的NSCLC患者3年生存率低于低表达患者。相关研究表明MAC30高表达与多种肿瘤的预后相关,国内学者Shan等[19]的研究表明胸腔积液中MAC30水平能够作为肺癌预后的相关指标发挥临床作用,其高表达常预示患者预后不良的发生;而动物实验表明下调MAC30水平能够延长荷瘤小鼠的生存时间、延缓肿瘤生长速度和浸润深度[20]。结合本研究结果,提示MAC30能够作为NSCLC患者预后的相关评价指标。
综上所述,MAC30表达水平不仅与NSCLC的发病、转移和肿瘤分期相关,还与患者化疗效果及预后相关。MAC30高表达患者肿瘤恶性程度较高,化疗效果及预后较差,可能作为患者预后的相关指标发挥作用。但本研究样本量较少,且只对蛋白表达水平进行研究,因此结果可能存在一定的局限性,需要在后续的研究中加以改进和完善。
参考文献:
[2]周征宇,向颖,袁帅,等长链非编码RNALINCOO0324对非小细胞肺癌细胞生物学功能的影响[J].第三军医大学学报,2019,41(4):331-338.
[15]钟伟杰,李庆山,李康保,等人骨髓来源间充质干细胞在肿瘤微环境中上调L-7A水平激活P13K1Akt通路促进弥漫大B细胞淋巴瘤生长和化疗耐药[J].中国肿瘤,2020,23(5):379-390.
[17]陈毅肿,赵毅.敲减MAC30通过P13KIAKT抑制人乳腺癌细胞增殖并诱导其凋亡[J].现代肿瘤医学,2019,27(18):3167-3171.
文章来源:郑大炜,郭娜,孙辉.MAC30表达水平对非小细胞肺癌患者化疗效果及预后的影响[J].实用癌症杂志,2022,37(04):560-563.
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肺癌已成为全球癌症相关死亡的主要原因,其中非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)占肺癌的85%[1]。大多数NSCLC患者确诊时处于晚期,治疗难度较大,因此迫切需要进一步探讨NSCLC的发病机制,寻找早期诊断的生物标志物和新的治疗靶点[2]。环状RNA(circularRNAs,circRNAs)与人类癌症的发展密切相关[3]。circAGFG1被证明在NSCLC等许多恶性肿瘤中发挥促癌作用[4]。
2024-04-22肺癌是临床常见的恶性肿瘤[1],在诸多癌症中死亡率居于首位[2],目前临床上总体疗效欠佳,患者生存率较低且预后大多不良,因而是亟需攻克的难题。目前,中医将“瘀毒互结”视为肺癌最重要的致病特点之一[3]。中医理论认为“百病皆瘀”“久病多瘀”“瘀阻气血”,肺癌的产生与瘀血关系密切,瘀血是导致恶性肿瘤产生的重要因素[4]。临床已证实,中医药治疗是安全有效的肺癌治疗方法之一[5]。
2024-04-19肺癌是一种恶性肿瘤,主要由小细胞肺癌和非小细胞肺癌组成,其中肺腺癌可占非小细胞肺癌总数的50%以上[1,2]。川楝素(toosendanin, TSN)是从传统中药苦楝子和川楝皮中提取出的一种萜类化合物,现代药理研究表明,川楝素具有驱虫、抗炎镇痛、抗肉毒素等作用,且能够抑制肿瘤细胞增殖和促进细胞凋亡,从而具有良好的抗肿瘤活性[3,4]。
2024-04-15目的 探讨老年肺癌住院患者下肢深静脉血栓(DVT)形成情况及其影响因素,为临床防治DVT提供参考。方法 回顾性分析78例老年肺癌患者临床资料,依据DVT发生情况分为DVT组与非DVT组。收集2组基础资料,先行单因素分析,待获得有统计学差异的数据后再行Logistic回归分析,获得影响老年肺癌住院患者DVT形成的独立危险因素。结果 78例老年肺癌患者共18例发生DVT,发生率为23.08%(18/78)。单因素分析显示,病理类型、肿瘤分期、糖尿病、手术方式、辅助化疗与老年肺癌住院患者DVT形成相关,差异有统
2024-04-15肺癌是全球发病率最高的恶性肿瘤之一,是男性死亡的第一因素和女性死亡的第二因素[1]。在我国,根据2022年国家癌症中心数据显示,每年肺癌新发约82.81万例,死亡约65.70万例,新发及死亡人数均居恶性肿瘤之首[2]。肺癌发现后一般已处于中晚期,且缺乏有效的治疗手段,使得肺癌患者的五年生存率极低,仅为4%~17%[3]。因此迫切需要探索更好的中晚期肺癌治疗方法。
2024-04-12非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)为肺癌常见类型,早期多无典型症状,若未得到及时诊治,则会发生胸内播散或远处转移,增加临床治疗难度[1,2]。手术为治疗早期NSCLC首选方案,能够切除肿瘤组织,阻断肿瘤进展,从而延长患者生存时间,提高远期生存率[3,4]。
2024-04-12肺癌是一种常见的恶性肿瘤,其早期诊断对于提高患者的生存率至关重要[1]。肺癌的诊断常用手段包括影像学技术,如计算机断层扫描、磁共振成像等[2]。这些影像学技术可以提供有关肿瘤位置、大小和形态的详细信息,有助于医生确定肿瘤的性质和分期。另一项重要的研究领域之一是利用肿瘤标志物来进行肺癌的筛查和诊断[3]。
2024-04-12肺癌是临床最常见恶性肿瘤之一,占所有新发癌症病例11.6%和所有癌症相关死亡的19.8%,其发生率和致死率均居各种肿瘤首位[1]。肺癌有非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer, NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung cancer, SCLC)两大类,其中NSCLC约占全部肺癌的85%[2]。NSCLC又可分为鳞癌、腺癌、腺鳞癌及大细胞癌等其他组织类型癌症。目前,临床上多采用手术、放疗及化疗治疗方法治疗肺癌。
2024-04-11肺癌是起源于肺部支气管黏膜或腺体的恶性肿瘤,其发病率和病死率增长快,严重威胁人类的生命健康[1]。肺癌具有生长快,转移早,易复发的特点[2]。根据肿瘤细胞的形态可分为非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)和小细胞肺癌(small cell lung carcinoma,SCLC)。肺癌临床治疗方式以化疗、放疗、手术为主,手术费用昂贵;放化疗毒副作用大,易耐药[3,4]。
2024-04-11肺癌具有较高的发病率与死亡率,在男性癌症中占据首位,女性癌症中位居第二。有大量研究表明长期吸烟与肺癌有着密切的关系,吸烟者患肺癌的概率是不吸烟者的10-20倍。肺癌临床症状不明显,甚至平时身体健康的患者在发现肺癌后已经步入晚期,严重降低肺癌患者的生存率。
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期刊名称:中国癌症防治杂志
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主管单位:国家卫生和计划生育委员会
主办单位:中国医师协会,广西肿瘤防治研究所
出版地方:广西
专业分类:医学
国际刊号:1674-5671
国内刊号:45-1366/R
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创刊时间:1984年
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