摘要:笔者针对现阶段体液脱落细胞学检验情况,分别实施标本、镜检和报告质量管理以及细胞免疫化学染色质量管理等,促进标本保存和会诊、外借制度进行完善,以探讨体液脱落细胞学检验质量管理方法和效果,加大对人才的培养和考核。通过实施上述质量管理,本院实验室体液脱落细胞学检验水平明显得到提高,更符合现阶段发展需求。加强实验室体液脱落细胞学检验质量管理不但能进一步促进医院发展,还可以提高实验室检测水平。
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脱落细胞学是临床重要的一门学科,而体液脱落细胞学检验和细胞形态学有着重要关系,但目前我国大部分临床实验室在脱落细胞学检验中存在缺陷和问题,包括操作规范和质量管理等,不仅影响临床检验结果准确性,还在一定程度上阻碍了医院发展[1]。为此,本次研究简单的介绍体液脱落细胞学检验科中的基础操作规范和质量管理,以便于为临床提高管理质量提供参考依据,内容如下。
1、标本质量管理
1.1 标识性抗凝管
抗凝管选择为EDTA-K2抗凝剂塑料软塞标识试管,容量10ml。
1.2 接受查对制度
落实标本查对制度,即核实试管上患者姓名、床号以及其他标号,并查看送检单各项目,判定标本是否符合相关要求等,完成后按顺序登记和编号,同时记录查、接收时间。
1.3 载玻片
载玻片厚度在1-1.2mm适宜,长宽比例在25:76(mm),准备载玻片数量≥6张,记录患者编号和姓名。
1.4 离心
实时离心,转数设置为2500r/min,时间为5min。离心结束后,以左手持离心管缓慢弃其上清液,角度在80°左右保持至少30s,然后用右手持棉球吸附残液,将沉渣量降低0.1ml以下。若红细胞过多则可吸取白细胞进行涂片或者加入低渗氯化钾溶液10ml,以此破坏红细胞,以上工序完成后沉淀物制片留置备用。
1.5 推片要求
摇散管底沉淀细胞,使其能够沿管壁滴于载玻片,最少留置5-6张涂片。除以上方法外,还可以使用移液器吸取对其进行涂片。但需要注意的是,涂片和一般的涂片制备不同,规定推制的涂片膜需具备良好的尾部,涂片长宽以2-2.5×3.5-4(cm)最佳。当管底出现灰白色微细胞团块后,及时使用移液器将其展片。
1.6 涂片处理原则
将制备涂片3-4张以Wright-Giensa染色,1-2张以细胞免疫化学染色,并按相关操作要求对其进行固定。若以丙酮固定则需在涂片干燥后4℃固定5-10min,而以乙醇乙醚为固定液则需在涂片冷干后固定10min。
1.7 未染色或未使用涂片处理原则
待涂片干燥后小心叠放,而其最上层涂片需面朝下。以此减少潮湿和污染进而影响标本质量。
2、标本保存原则
在收集完标本后将其盛放于特殊的抗凝剂试管中,并在1h内送至实验室进行检查,若出现特殊情况无法及时送至则可将标本置于4℃冰箱中进行保存。
3、染色质量保证
当前实验室染色主要包括普通染色和特殊染色两类。而Wright-Giensa染色是目前使用最为频繁的普通染色方式。而特殊染色为免疫化学染色。
3.1 染色盒
染色需在染色盒中进行,在进行染色的时候需严格按照染色盒相关操作进行。常用染色盒规格多为25×30cm,内存两排染色架,而每排可放8张涂片,而其端边有流水孔。
3.2 Wright-Giensa染色质量
为进一步降低Wright-Giensa染色误差,染液使用前需进行对照试验。而根据临床试验发现,影响Wright-Giensa染色质量为染色偏酸,使用氢氧化钠溶液调节缓冲液中的pH值可解决这一问题,直到染色满意为止。以此可以尽量的确保Wright-Giensa染色质量。
4、镜检和报告质量管理
4.1 镜检质量管理
在实施镜检前需要确保显微镜质量合格,并进行查对制度,掌握临床和实验室的相关资料,以此便于能够及时有效的分析检查结果。在镜检过程中先以低倍镜对全片进行巡视,若发现异常细胞,则使用油镜再次进行确认,并对应补充实验室相关项目,以便于镜检能够即时进行[2]。
4.2 报告质量管理
诊断报告关乎诊断准确性,需严格执行检验和复检二级镜检制度。其中,后者主要是对报告单中是否存在错误和遗漏进行检查,其诊断意见需要以实施证据为基础,并全面的对异常诊断价值进行评价。
5、细胞免疫化学染色质量管理
一般情况下,细胞免疫化学染色对照应存在良好结果。而抗原阳性表达需在特定抗原部位才能表示阳性。但无论表达多少和强弱,若其定位准确或者着色清晰均可视为阳性。而阴性结果则不能看做抗原不表达,而验证其准确性则需要排除其中的假阴性,最后结合临床判断结果并以细胞形态学为基础对其进行综合性分析[3]。
6、标本保存、会诊和外借制度完善
对于留置标本实验室需要全部存档,并保存至少5年,在储存标本的时候还需要保存其图文报告和细胞图像。建立室内读片讨论制度,便于检查医师能够更好的交流探讨,对于提高个人素养和知识有着重要意义[4]。此外,支持会诊和借片,但需要办理相关手续,并要求借片单位对会诊意见进行反馈,可促进交流和借鉴[5]。
7、技术培训和考核
目前,我国大部分医院实验室对体液脱落细胞学检验相对薄弱,该学科不仅需要临床检验技术,还需要掌握全面的病理学基础知识[6-8]。而当前临床检验脱落细胞形态学水平以无法满足现阶段的发展需求[8]。为此,医院需要加强对技术人员的培训和考核,以便于提高人才素质和专业能力,对于促进实验室进步和医院进步有着重要的意义。
参考文献:
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期刊名称:中国细胞生物学学报
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主管单位:中国科学院
主办单位:中国细胞生物学学会,中国科学院上海生命科学研究源生物化学与细胞生物学研究所
出版地方:上海
专业分类:生物
国际刊号:1674-7666
国内刊号:31-2035/Q
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创刊时间:1979年
发行周期:月刊
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