摘要:目的:探讨抗环瓜氨酸肽(抗-CCP)联合抗角蛋白抗体(AKA)检测在类风湿关节炎早期诊断中的价值。方法:选取2014年3月12日至2019年10月20日的85例疑似类风湿关节炎患者(关节炎组)、85例健康体检者(健康组)、85例其他自身免疫性疾病患者(免疫性组)作为研究对象。受检者均进行抗-CCP、AKA检测,比较三组的抗-CCP水平、抗-CCP阳性率、AKA阳性率,并分析各种诊断方式对类风湿关节炎的诊断结果。结果:关节炎组的抗-CCP水平、抗-CCP阳性率、AKA阳性率均高于免疫性组、健康组,且免疫性组高于健康组,差异具有统计学意义(P<0.05)。抗-CCP联合AKA诊断的灵敏度为98.67%(74/75),特异度为100.00%(10/10),漏诊率为1.33%(1/75),误诊率为0.00%(0/10)。结论:抗-CCP联合AKA检测在类风湿关节炎早期诊断中具有较高灵敏度和特异度,对疾病发生、发展、预后评估有一定意义。
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类风湿关节炎属于自身免疫性疾病,属于临床常见的慢性关节滑膜病变,主要特征为对称性关节炎,目前发病机制和因素尚未明确,无法预测疾病发生,为此需注重临床检测工作,从而尽早发现疾病,加以治疗,避免诱发关节功能丧失、关节畸形等不良结局"。早期临床上常依借影像学检查。临床表现、病史合理评估,其中病史和临床表现均不具有特异性,大部分关节炎患者均存在肢体功能疼痛、不适,无法作为评判依据,而影像学检查虽能够确定病变位置和类型,但部分患者在病变早期表现不典型,容易出现漏诊。
随着相关报道增多,临床学者发现类风湿关节炎发生、发展与细胞因子及自身抗体存在一定相关性3,而抗环瓜氨酸肽(anti-cycliccitrullinatedpeplidle,抗-CCP.抗角蛋白抗体<anti-keratinantibodly,AKA)等指标是目前评估类风湿关节炎常用指标,其中AKA能够反映类风湿关节炎当前病情严重程度,且可提示预后不良现象,在疾病发生、发展中均具有显著作用:抗-CCP对类风湿关节炎具有较高的论断灵敏度和特异度,是类风湿关节炎早期诊断的一个高度特异指标,在诊断早期类风湿关节炎时,可明确其当前有无侵袭作用粤。为了进一步探索有效的诊断方案和指标,本研究选取2014年3月12日至2019年10月20日的三组人群(即类风湿关节炎.健康体检者、其他自身免疫性疾病,进行了抗-CCPAKA等指标检测,旨在探讨抗-CCP联合AKA检测在类风湿关节炎早期诊断中的价值,现报道如下。
1、资料与方法
1.1一般资料
选取2014年3月12日至2019年10月20日的85例疑似类风湿关节炎患者(关节炎组》.85例健康体检者(健康组》85例其他自身免疫性疾病患者(免疫性组>作为研究对象。关节炎组年龄34~74岁,平均年龄(52.49土11.46岁;病程2个月至28年,平均病程(14.18士8.37年;疾病分型:22例为急性型,35例为隐袭型,13例为间歇发作型,15例为非典型发作型:男性44例,女性41例。健康组年龄35~76岁,平均年龄<52.55士11.51)岁;男性45例,女性40例。免疫性组年龄33~75岁,平均年龄(52.78士11.32岁;病程5~39个月,平均病程(21.25主11.52个月:男性42例,女性43例;疾病类型:17例为干燥综合征,14例为皮肌炎,20例为系统性红斑狼疮,18例为痛风,16例为骨性关节炎。三组的年龄、性别比较,差异无统计学意义(P>0.05》。本研究已经伦理委员会批准;所有受检者各项资料齐全,且自愿签署知情同意书。
1.2纳入及排除标准
纳入标准:①关节炎组、免疫性组患者的病程≥6周;②关节炎组患者至少存在3个以上关节区软组织积液、肿胀,每次至少持续1h的晨僵,同时近端指间关节至少1处出现关节肿胀;③关节炎组患者经影像学检查,发现关节改变,且存在关节功能障碍、疼痛、肿胀以及僵硬等症状;④所有受检者均能够顺利完成本研究,表达能力正常;5免疫组患者存在关节破坏、发热、关节痛、面容呆板等症状。
排除标准:①合并心、脑血管功能不全者;②存在精神疾病家族史者;③严重肝、肾功能障碍者;④合并重度造血系统障碍、血液系统疾病者;⑤存在抵触情绪者。
1.3方法
所有的受检者均进行抗-CCP以及AKA检测,具体方法如下。
标本采集:抽取三组受检者空腹肘静脉血3mL,进行血清分离,于60min内完成,并维持转速3500r/min,离心10min,放于冰箱内(-70℃)保存,在一次冻融后测定。
抗-CCP检测:在进行抗-CCP检测时,需使用酶联免疫吸附法,本次试剂盒由德国欧蒙公司提供。首先对血清样本进行稀释,加入微孔后,进行60min的抗原孵育反应,反复洗涤3次,加入100uL的碱性磷酸酶标记抗体,孵育30min(在室温环境状态下,随后再加入显色剂100LL,观察显色30min,最后加入反应终止液100uL,终止反应,在检测吸光度时可选择Sunrise酶标仪(厂家:北京文德科技有限公司;型号:HBS-10960,具体方法严格按照说明书进行。阳性判断标准;抗-CCP值>5RU/mL判定为阳性5。
AKA检测:在测定受检者AKA时,可选择间接免疫荧光法,首先对血清进行稀释(按照1:10的比例>,随后加入抗原基质片,保持浸泡状态5min,在30min后加入荧光标记,并进行30min的二抗孵育,在整个检测过程中,需保持全程避光,在判读结果时,需加入甘油封片,在显微镜下完成。若抗体滴度≥1:10,且角质层出现点片状绿色荧光,即可判定为阳性,所采用的仪器为特种蛋白分析仪<厂家:德灵诊断产品有限公司;型号:BNII)I6]。
1.4观察指标及评价标准
(比较三组受检者的抗-CCP水平.抗-CCP阳性率、AKA阳性率。
金标准;类风湿因子阳性<滴度>1:32;手X线片改变;皮下结节;对称性关节肿(≥6周>;腕关节、掌指关节或近端指间关节肿(≥6周>;3个或3个以上关节肿(≥6周>;晨僵时间至少60min(≥6周)P。比较各项诊断方式的灵敏度﹑特异度﹑漏诊率、误诊率。灵敏度=真阳性例数lK真阳性例数+假阴性例数>×100%;特异度=真阴性例数/K假阳性例数+真阴性例数)×100%;漏诊率=假阴性例数/K真阳性例数+假阴性例数>×100%;误诊率=假阳性例数/K假阳性例数+真阴性例数>×100%。
1.5统计学方法
采用SPSs20.0统计学软件处理数据,计数资料用n%e表示,用检验,计量资料用x土s表示,用:检验,以P<0.05为差异具有统计学意义。
2、结果
2.1三组受检者的抗-CCP水平、抗-CCP阳性率、AKA阳性率比较
关节炎组的抗-CCP水平、抗-CCP阳性率、AKA阳性率均高于免疫性组、健康组,且免疫性组高于健康组,差异具有统计学意义(P<0.05,表1>。
表1三组受检者的抗-CCP水平.抗-CCP阳性率、AKA阳性率比较
2.2各种诊断方式对类风湿关节炎的诊断结果分析
关节炎组患者中确诊为类风湿关节炎75例,非类风湿关节炎10例。
抗-CCP诊断的灵敏度为82.67%(62/75>,特异度为80.00%e(8/10,漏诊率为17.33%(13/75>,误诊率为20.00%(2/10D。AKA的灵敏度为80.00%(60/75>,特异度为60.00%e(6/10,漏诊率为20.00%e(15/75>,误诊率为40.00%K4/10。抗-CCP联合AKA诊断的灵敏度为98.67%(74/75>,特异度为100.00%(10/10,漏诊率为1.33%1/75>,误诊率为0.00%O/10。各种诊断方式对类风湿关节炎的诊断结果,见表2。
表2各种诊断方式对类风湿关节炎的诊断结果分析(n)
3、讨论
类风湿关节炎是一种自身免疫性、系统性、异质性疾病,诱发因素与精神状态、体内激素水平、职业状况、遗传.病毒感染、环境等因素有关,主要特征为关节滑膜炎,早期常存在关节外病变、多滑膜关节病变、对称性关节病变,随着病情恶化,可造成骨关节严重受损,破坏关节骨完整性和软骨,增加致残率,严重时可影响患者日常生活,给社会、家庭带来严重影响和负担例。为了尽早控制病情、降低关节畸形率、保护关节功能,还需早期诊断,进而加以干预、治疗,逆转病情。早期常运用体征、病史判断疾病,虽能够在早期提醒患者就诊入院,但在判断疾病类型中缺乏科学性。
为了更好对疾病发生、发展起到检测作用,部分学者提议通过检测血清学指标了解病情进展情况。而在血清指标中,最常用的两项指标为抗-CCP、AKA,其中抗-CCP是目前早期评估类风湿关节炎的重要指标,当关节受到炎症因子侵犯后,抗-CCP可出现明显升高趋势,且与严重程度相符,但将其单方面作为评价疾病的指标,容易因操作者失误或其他原因出现漏诊。AKA属于角化上皮层的血清抗体,能够尽早判断类风湿关节炎病变情况,准确判断预后,但其也不可作为单方面评估依据,主要是因为此项指标需运用间接免疫荧光法检测,此项方法标准难度系数较大,从而限制了推广。因此,本研究将抗-CCP与AKA联合应用于类风湿关节炎的早期诊断中,探讨其诊断价值。
本研究结果显示,关节炎组的抗-CCP、AKA阳性率均高于免疫性组、健康组,且免疫性组高于健康组,差异具有统计学意义P<0.05>,主要是因为当机体合并类风湿关节炎时,容易受到炎症因子侵犯,经常伴有关节外器官受累及血清类风湿因子阳性,促使抗-CCP、AKA阳性率明显升高。本研究结果显示,关节炎组的抗-CCP水平高于免疫性组、健康组,且免疫性组高于健康组,差异具有统计学意义(P<0.05>,主要是因为当类风湿关节炎和其他自身免疫性疾病在受到创伤后,机体可出现滑膜衬里细胞增生间质大量炎性细胞浸润、软骨和骨组织的破坏等现象。因此,相较于健康人群,其他两组的抗-CCP水平更高,而在对比两者疾病时,抗-CCP水平可作为分辨、评判的重要依据。
为了更明确各项指标的诊断价值,本研究分别分析了抗-CCP、AKA单一诊断及抗-CCP联合AKA诊断的效能,结果显示,抗-CCP诊断的灵敏度为82.67%(62/75》,特异度为80.00%8/10D,漏诊率为17.33%(13/75>,误诊率为20.00%2/10;AKA的灵敏度为80.00%(60/75>,特异度为60.00%K6/10,漏诊率为20.00%(15/75>,误诊率为40.00%(4/10D:抗-CCP联合AKA诊断的灵敏度为98.67%(7475,特异度为100.00%e(10/10,漏诊率为1.33%1/75>,误诊率为0.00%O/10,说明抗-CCP联合AKA诊断可达到相互弥补.辅助作用,更好提高诊断准确度。主要原因为,AKA诊断借助间接免疫荧光法能够观察到角质层层状荧光,更好地判断疾病类型和受损程度,但难度系数较大,对操作者要求较高,一旦某项环节失误,便可影响最终诊断结果,因此不可作为单方面诊断金标准;抗-CCP诊断虽具有操作简便等特点,但单方面鉴别类风湿关节炎、其他自身免疫性疾病时,存在一定混淆性,容易出现误诊、漏诊,因此需选择联合诊断技术,从而降低误诊和漏诊率。
综上所述,抗-CCP联合AKA检测能够达到相互辅助.弥补作用,用于类风湿关节炎早期诊断中可提高灵敏度和特异度,可降低漏诊率和误诊率,为疾病确诊提供丰富、可靠的诊断依据。
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文章来源:张格艳,朱超超.抗-CCP联合AKA检测在类风湿关节炎早期诊断中的价值[J].临床医学研究与实践,2021,6(16):128-130.
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