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郑州市2018—2019年禽流感职业暴露人群和外环境监测分析

2021-09-17 101 上传者：管理员

摘要：目的调查掌握郑州市2018—2019年禽流感职业暴露人群、外环境病毒污染现状,为人感染禽流感疫情防控提供科学依据。方法2018—2019年选择活禽交易市场、规模养殖场、家禽散养户、屠宰加工厂场所为监测点,采集职业暴露人群的血清标本及外环境标本,采用马血球血凝抑制实验检测血清标本中的H5、H7和H9等禽流感病毒抗体,采用实时荧光定量PCR技术对采集的外环境标本进行禽流感病毒亚型核酸检测。结果2018—2019年采集家禽职业暴露人群血清标本205人份,均未检出H5、H7和H9等禽流感病毒血凝素抗体;1243份外环境标本中,34份流感病毒A型核酸阳性,阳性率2.73%;H5亚型为0.40%(5份)、H7为0.16%(2份)、H9为0.80%(10份),其他亚型阳性率1.37%(17份);每年阳性率最高的为12月,阳性率为7.75%;活禽交易市场和家禽屠宰加工厂流感病毒A型核酸阳性率最高,分别为4.27%和3.53%。结论郑州市家禽职业暴露人群中未发现禽流感病毒隐性感染者,禽类外环境中存在H5、H7和H9亚型禽流感病毒,冬春季检出率相对较高,是禽流感防控的重点,需继续在重点场所持续开展病原学监测。

关键词：
外环境标本
实时荧光定量PCR
监测
禽流感病毒
职业暴露人群
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近年来，禽流感、中东呼吸综合征、新型冠状病毒肺炎等新发传染病引起的公共卫生事件时有发生，给社会稳定和公众健康带来了极大挑战[1,2],上述新发传染病均属于人兽共患病，其显著特征是人与动物均可感染病毒。禽流感病毒又具有流感病毒的变异特质，其病毒RNA在进行复制时可能发生基因重组以及基因突变，从而导致禽流感病毒不断发生变异，使得其防控工作面临较大困难。因此，对于禽流感的有效防控，仍然是开展对病原体在外环境、高危人群中暴露情况的连续监测工作，进而实现对禽流感疫情的风险预警[3]。2013年10月郑州市报告了本地首例人感染H7N9禽流感病例，之后2015—2017年连续3年报告人感染H7N9禽流感病例。为了解郑州市外环境中禽流感病毒实际分布状况，为评估郑州市人感染禽流感公共卫生风险提供科学依据，笔者现对郑州市2018—2019年禽类职业暴露人群血清学和外环境监测情况进行分析如下。

1、材料与方法

1.1监测点设置及采样要求

按照河南省卫健委《职业暴露人群血清学和环境高致病性禽流感监测方案》,2018—2019年通过随机抽样方法在郑州市的荥阳市(1个)、新密市(2个)、中原区(2个)、惠济区(1个)设置6个监测点，承担辖区禽类农贸市场、家禽散养户、家禽屠宰加工厂、家禽规模养殖场的禽流感连续监测工作，每月监测一次，每个监测点每月采集外环境标本不少于10份，外环境标本主要来自清洗禽类污水、禽类笼具污水、禽类宰杀的案板表面、粪便和禽类饮水5类。职业暴露人群血清学监测对象选择上述监测点从事家禽销售、饲养、宰杀、贩运的工作人员，6个监测点每年采集至少50份标本，要求空腹静脉血5ml,标本采集完成后在冷藏条件下运送至实验室，血清标本置于-80℃冻存备用。

1.2实验室检测

采用马血球血凝抑制实验(HI)检测人群血清学标本中H5、H7、H9禽流感病毒抗体，采用实时荧光反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)对标本进行禽流感病毒A型核酸检测，阳性标本再进行H5、H7、H9亚型检测。

1.3数据处理

用Excel2007软件录入实验数据，用SPSS21.0软件进行统计分析，率间比较采用卡方检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1职业暴露人群血清学监测

2018—2019年共采集家禽销售、饲养、宰杀和贩运4类职业暴露人群血清学标本205人份，H5、H7和H9禽流感病毒血凝素抗体检测结果均为阴性。

2.2外环境监测情况

2018—2019年共采集1243份外环境标本，检出禽流感病毒A型核酸阳性34份，总体阳性率为2.74%,各年检出率分别为2.73%(16/587)、2.74%(18/656)。2018—2019年连续两年各个亚型禽流感病毒均有检出，其中3个亚型阳性率为：H5为0.40%(5/1243)、H7为0.16%(2/1243)、H9为0.80%(10/1243),差异无统计学意义(χ2=3.213,P>0.05),其它亚型阳性率为1.74%(17/1243);共检出H5、H7、H9混合阳性标本(≥2种同时阳性)10份，其中H5+H7阳性2份、H5+H9阳性2份、H7+H9阳性6份，未分型阳性7份。见表1。

2.3时间分布

2018—2019年不同月份禽类外环境标本禽流感病毒污染检测阳性率有所不同，主要集中在每年的冬春季节，即12月—次年3月。其中阳性率最高的为12月，阳性率为7.75%(11/142);其次为1月，阳性率为6.40%(8/125),最低的为5—8月，未检出阳性标本。见表2。

2.4监测场所分布

2018—2019年监测的4类场所中，AIV阳性率最高的场所为活禽市场4.27%(16/375),其次为家禽屠宰加工厂3.53%(11/312),阳性率最低的为家禽散养户集中的地区0.87%(2/231),4类场所禽流感病毒核酸阳性率差异有统计学意义(χ2=8.822,P<0.05)。见表3。

2.5标本类型分布

按监测方案将采集的标本分为5个标本类型，2018—2019年活禽或和禽肉暴露过的环境均监测到流感病毒污染；其中禽流感病毒检出率最高的标本为清洗禽类的污水，检出率为3.37%(13/386);其次为案板表面，检出率为2.75%(10/363);禽类饮水中病毒污染最轻，检出率为1.09%(2/184),不同类型外环境标本禽流感病毒核酸阳性率差异无统计学意义(χ2=0.102,P>0.05)。见表4。

3、讨论

郑州市地处中原腹地，交通四通八达，一方面禽肉类交易量巨大，另一方面郑州市处在我国中部候鸟迁徙路线的咽喉要道，每年“过境”的候鸟量有百万之多，禽流感病毒污染与扩散的风险始终存在。监测结果表明，相比较于浙江省、江苏省等东南沿海地区，郑州市2018—2019年外环境中禽流感病毒核酸阳性率在较低水平[3,4,5,6],总体上与甘肃省、陕西省西北地区较为接近[7,8],提示郑州市外环境中的一些重点场所存在一定程度禽流感病毒污染的情况，发生人际感染的风险依然存在。而职业暴露人员血清学监测H5、H7、H9禽流感抗体均为阴性，表明目前郑州市禽类职业暴露人群未发现禽流感隐性感染，与陕西省、四川省[9,10]相关研究一致，隐形感染情况调查可能与暴露人群易感性、暴露机会、防护水平等因素有关。从时间分布看，每年冬春季禽流感病毒核酸阳性率最高，而人感染禽流感的高发季节也往往发生在冬春季，提示在每年冬春季应提前做好人感染高致病性禽流感的防控工作[11,12]。

从监测的禽流感病毒亚型分类来看，2018—2019年均存在H5、H7、H9不同亚型以及混合阳性监测结果，提示新的亚型人感染禽流感有可能出现，而病毒种类的多样性为病毒的基因重组提供了有利条件，使得产生新病毒亚型的几率增加。而对于外环境标本的类型、所在场所的监测结果显示，禽流感病毒污染程度存在明显差异，较为明确的是城乡活禽市场和家禽屠宰加工厂是病毒污染的重点场所，这两类场所人员流动频繁，通风状况不良，卫生状况较差，活禽流通数量较大，可能是严重污染的原因；而不同标本类型中，清洗禽类的污水和禽类笼具表面污染是禽流感病毒污染的重点环节，提示在进行清洗消毒时应将禽类笼具和清理禽类污水列为重点消杀对象，这与其他地区研究结果有所差异[13,14]。因此，在今后的防控工作中应针对禽流感职业暴露人群开展针对性的健康教育，尤其在冬春季禽流感高发季节，应引导活禽市场、屠宰加工厂工作人员做好自身防护，避免相关工作人员发生感染事件[15],同时应当明确在禽流感病毒污染严重的环境中开展持续监测与卫生环境消杀处理，这也是疫情防控的核心工作[16]。

综上所述，郑州市2018—2019年外环境中存在一定程度的禽流感病毒污染，并未存在人感染H7N9禽流感病例的隐形感染。为有效做好禽流感的科学防控工作，今后在继续做好禽流感病原学监测工作的同时，应进一步调整优化监测方案和提高监测技术水平，如增加禽鸟野生栖息地等外环境的监测工作，主动开展当地禽流感病毒的基因测序以及分子进化分析工作，为郑州市禽流感的早期预警提供依据。同时根据监测结果制定综合性的防控措施，努力降低人群感染禽流感的风险。

利益冲突无

文章来源：李国伟,陈巧格,陈彦哲,王小丽,宋彩娟,葛国印,韩同武.郑州市2018—2019年禽流感职业暴露人群和外环境监测分析[J].医学动物防制,2021,37(10):947-950.