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参姜止痢合剂的抗炎镇痛功效评价

2025-01-08 108 上传者：管理员

摘要：为探究中兽药参姜止痢合剂的抗炎、镇痛作用，本试验采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制试验建立炎症模型，采用醋酸扭体试验和热板法镇痛试验建立疼痛模型，各试验造模前将昆明小鼠随机分为5个组，分别为阴性对照组（灌胃生理盐水）、阳性药物对照组[醋酸地塞米松片（抗炎），阿司匹林肠溶片（镇痛）]、参姜止痢合剂高剂量组（1 g/mL,0.4 mL）、参姜止痢合剂中剂量组（1 g/mL,0.2 mL）和参姜止痢合剂低剂量组（1 g/mL,0.1 mL），每组12只。连续预处理6 d后造模，观察并计算小鼠耳肿胀度和耳肿胀抑制率，记录小鼠扭体潜伏期，计算疼痛抑制率，测定不同检测时间点的痛阈值，以评价参姜止痢合剂的抗炎、镇痛作用。结果显示，与阴性对照组相比，中、高剂量参姜止痢合剂和阳性药物预处理6 d可极显著抑制二甲苯致小鼠耳肿胀度（P <0.01），且中剂量组耳肿胀抑制率最高，达到72%；参姜止痢合剂中、高剂量组和阳性药物对照组小鼠腹腔注射醋酸后扭体潜伏期均延长，且15 min内出现的扭体次数显著降低（P <0.05或P <0.01）；中、高剂量参姜止痢合剂和阳性药物在末次预处理后1.5 h均能显著增加小鼠的痛阈值（P <0.05或P <0.01）。结果表明，参姜止痢合剂具有良好的抗炎、镇痛作用，为参姜止痢合剂的临床应用提供了参考依据。

关键词：
中兽药
传染病
参姜止痢合剂
抗炎
镇痛
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仔猪黄痢主要是由产肠毒素大肠杆菌所引起的传染病，临床上以肠炎和败血症为主要特征，仔猪患病后排黄色稀粪并迅速死亡，其高发病率和高死亡率给养猪业带来巨大的经济损失。患猪主要病理变化集中在肠道，小肠（尤其是十二指肠）出现急性卡他性炎症，当机体组织出现炎症时，会导致红、肿、热、痛和机能障碍[1]。仔猪黄痢的防治主要以抗生素和化学合成抗菌药物为主，然而长期、不合理的使用药物直接危害食品安全和人类健康，限抗、减抗时代的来临使得科研工作者把目光投向疗效确切、绿色环保的中兽药。参姜止痢合剂是中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所根据仔猪黄痢的发病特性，经过严格的药物筛选，依据传统中兽医药理论，由苦参、干姜等中药组方，经传统水煎和浓缩制得的纯中药制剂，临床上已取得较好的疗效验证[2-3]。参姜止痢合剂方中苦参为君药，有清热燥湿、利尿和祛风杀虫的功效[4]。研究表明，苦参提取物对各种急、慢性炎症均有抗炎作用，苦参对物理性、化学性和神经性疼痛均有镇痛作用，且无成瘾性和耐药性[5]。干姜味辛，性热，为温里之药，有温中散寒、回阳通脉和温肺化饮等功效[4]。抗炎试验结果表明，生姜、干姜和炮姜均能缓解二甲苯所致的小鼠耳肿胀和腹膜炎，灌胃干姜水提物对小鼠光辐射热甩尾反应和醋酸扭体反应均有明显的镇痛作用[6-7]。本试验旨在通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制试验、醋酸扭体试验和热板法镇痛试验评价参姜止痢合剂的抗炎、镇痛效果，为后续的深入研究提供参考。

1、材料与方法

1.1主要药物和试剂

参姜止痢合剂，由中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所中兽医与临床创新团队研制，主要制备工艺：苦参、干姜等中药按比例混合，按质量体积比加8倍水，煎煮3次，每次1 h，过滤后合并滤液，继续加热浓缩至每毫升含1 g原药。冰醋酸，国药集团化学试剂有限公司产品；阿司匹林肠溶片，沈阳奥吉娜药业有限公司产品；醋酸地塞米松片，浙江仙琚制药股份有限公司产品。

1.2主要仪器

JJ5000电子天平，常熟市双杰测试仪器厂产品；BSA124S分析天平，赛多利斯科学仪器（北京）有限公司产品；恒温水浴锅，上海锦赋实验仪器设备有限公司产品；6 mm手握式打孔器，得力集团有限公司产品。

1.3实验动物

昆明种小鼠200只，雄性120只，雌性80只，体质量（20±2)g，购自中国农业科学院兰州兽医研究所实验动物中心，生产许可证号：SCXK（甘）2020—0002。小鼠饲养于中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所大洼山实验基地，于试验前适应性饲养1周。

1.4试验方法

1.4.1二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制试验

将60只雄性小鼠随机分成5个组，分别是阴性对照组、阳性药物对照组、参姜止痢合剂低、中和高剂量组，每组12只。阴性对照组灌胃生理盐水10 mL/（kg·bw),1次/d；阳性药物对照组灌胃醋酸地塞米松片（蒸馏水溶解）0.006 g/（kg·bw)[8],1次/d；参姜止痢合剂低、中和高剂量组分别灌胃参姜止痢合剂（1 g/mL)0.1、0.2和0.4 mL,1次/d；连续预处理6 d。末次预处理后1 h，于小鼠左耳两面涂二甲苯（0.04 mL/只）致炎，右耳不涂为正常耳。0.5 h后脱颈处死小鼠，用6 mm手握式打孔器冲下左耳和右耳同一部位的圆片，于分析天平上称重并按公式（1）和（2）计算小鼠耳肿胀度和耳肿胀抑制率。

1.4.2小鼠醋酸扭体试验

将60只雄性小鼠随机分成5个组，分别是阴性对照组、阳性药物对照组、参姜止痢合剂低、中和高剂量组，每组12只。阴性对照组灌胃生理盐水10 mL（/kg·bw),1次/d；阳性药物对照组灌胃阿司匹林肠溶片0.225 g（/kg·bw)[9],1次/d；参姜止痢合剂低、中和高剂量组处理同1.4.1；连续预处理6 d。末次预处理后1 h，各组小鼠腹腔注射新配制的0.6%冰醋酸溶液[10 mL（/kg·bw）]致痛，即刻计时，观察并记录小鼠扭体潜伏期（小鼠首次出现扭体反应的时间），同时记录每只小鼠造模后15 min内出现的扭体（轻度疼痛小鼠表现为腹部两侧向内凹陷，重度疼痛小鼠表现为躯干与后肢急剧伸张呈俯卧躺平状）次数，根据公式（3）计算疼痛抑制率。

1.4.3小鼠热板法镇痛试验

用恒温水浴锅[温度为（55±0.5）℃]筛选基础痛阈值（小鼠开始出现舔后足反应的时间）介于5～30 s的雌性小鼠60只，超过30 s则弃去，按基础痛阈值将小鼠随机分为5个组，每组12只，分组和预处理方法同1.4.2。分别在末次预处理后0.5、1.0和1.5 h，采用热板仪测定各组小鼠的痛阈值[10]。

1.5统计分析

用SPSS 26.0统计软件进行数据处理，除抑制率外，其余试验结果均以“平均值±标准差”表示，各组间的差异显著性用单因素方差分析，以P<0.05为差异显著，P<0.01为差异极显著。

2、结果

2.1二甲苯致小鼠耳廓肿胀抑制试验

如表1所示，参姜止痢合剂不同剂量组和阳性药物对照组小鼠耳肿胀度均受到抑制，其中参姜止痢合剂中、高剂量组和阳性药物对照组小鼠耳肿胀度与阴性对照组相比极显著降低（P<0.01），且参姜止痢合剂中剂量组耳肿胀抑制率最高，达72%。

2.2小鼠醋酸扭体试验

如表2所示，与阴性对照组相比，参姜止痢合剂中、高剂量组和阳性药物对照组小鼠腹腔注射醋酸后扭体潜伏期均延长，且15 min内出现的扭体次数显著降低（P<0.05或P<0.01），高剂量参姜止痢合剂对小鼠的疼痛抑制率优于阳性药物。

表1参姜止痢合剂对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响

2.3小鼠热板法镇痛试验

如表3所示，预处理前各组小鼠痛阈值无统计学差异（P>0.05），预处理6 d后的不同检测时间点，参姜止痢合剂中、高剂量组和阳性药物对照组小鼠痛阈值均有所增加，且与阴性对照组相比，中、高剂量参姜止痢合剂在末次预处理后1.5 h能够显著增加小鼠的痛阈值（P<0.05），表现出较好的镇痛效果。

表2参姜止痢合剂对小鼠醋酸扭体的影响

3、讨论

炎症是动物机体局部损伤所产生的具有防御意义的应答性反应。二甲苯引起的血管舒张、皮肤水肿和醋酸导致的毛细血管扩张、通透性增加均是急性炎症的标示性变化，为经典的非特异性急性炎症模型，目前常用化学物质作为致炎剂诱导小鼠耳廓肿胀，用以评价一些合成物和植物有效成分的抗炎活性[11-13]。镇痛研究常通过对试验动物施加伤害性刺激引起疼痛反应，通过监测动物发生疼痛反应后的缓解程度来评价药效[14]。

表3参姜止痢合剂对小鼠痛阈值的影响

参姜止痢合剂中的苦参碱对心脑血管、肝脏、肾脏和免疫系统等多种器官系统疾病发挥抗炎作用，其作用机制可能与阻断3羧基磷脂酰肌醇激酶（Phosphoinositide 3-kinase,PI3K）/蛋白激酶B(Protein kinase B,PKB）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（Mechanistic target of rapamycin,mTOR）、细胞核因子-κB(Nuclear factor-kappa B,NF-κB）和p38/丝裂原活化蛋白激酶（p38/Mitogen activated protein kinases,p38/MAPKs）等诱导炎症的信号通路有关，最终抑制炎症因子白细胞介素-1β(Interleukin 1β,IL-1β）、白细胞介素-6(Interleukin 6,IL-6）和白细胞介素-8(Interleukin 8,IL-8）等的释放和基质金属蛋白酶的表达，促进抗氧化相关的核因子E2相关因子2(Nuclear factor E2-related factor 2,Nrf2）信号通路，抑制氧化损伤，改善炎性损伤[15-16]。姜辣素是姜的主要活性成分，是具有不同烷基链的同系物，其可能通过抑制环氧化酶和脂氧化酶活性，减少前列腺素（Prostaglandin,PG）和白三烯（Leukotriene,LT）生成而发挥解热镇痛作用[5];6-姜酚可以抑制体内白细胞向炎症组织浸润，同时减少水肿肿胀，也可通过降低环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2）或诱导性一氧化氮合酶（Inducible nitric oxide synthase,iNOS）等炎症介质的分泌，影响NF-κB和丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen activated protein kinase,MAPK）信号传导，并增加细胞保护性血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1）水平[17]。虽然诸多研究指向6-姜酚可以归类为抗炎物质，但确切的作用机制仍有待阐明。

苦参和干姜是参姜止痢合剂的重要组成药味。相关研究表明，苦参的主要有效成分生物碱类和黄酮类对炎症均有抑制作用[18-19]。干姜的抗炎作用则与其含姜辣素等成分相关[20]。本试验结果显示，在急性炎症动物模型中，中、高剂量参姜止痢合剂可极显著抑制小鼠耳廓肿胀。生物碱是苦参发挥镇痛作用的主要成分之一。有研究表明，苦参具有类似氢化可的松的作用，无论是抗炎还是镇痛作用都呈现剂量依赖性[21-22]。同时也有试验表明，干姜的水提物具有明显的解热、镇痛作用[20]。本试验中，与阴性对照组相比，参姜止痢合剂中、高剂量组小鼠腹腔注射醋酸后扭体潜伏期均延长，且15 min内出现的扭体次数显著降低，且该作用随用药剂量增加而增强，高剂量参姜止痢合剂对小鼠的疼痛抑制率优于阳性药物；与阴性对照组相比，低剂量参姜止痢合剂预处理减少了小鼠痛阈值，但差异无统计学意义，中、高剂量参姜止痢合剂和阳性药物都能增加末次预处理后3个检测时间点小鼠的痛阈值，且中、高剂量组在末次预处理后1.5 h表现出显著的镇痛效果。

综上，参姜止痢合剂具有良好的抗炎、镇痛作用，这为参姜止痢合剂的临床应用提供了药效依据，其抗炎、镇痛作用的分子机制有待进一步研究。

参考文献:

[1]白东东,李新圃,杨峰,等.乳黄消口服液消肿止痛功效的研究[J].黑龙江畜牧兽医,2020(12):126-129.

[2]郭志廷,付鹏程,张康,等.参姜止痢合剂治疗仔猪黄痢的临床疗效评价[J/OL].中国动物传染病学报,2023.

[3]郭志廷,张凯,刘莲,等.中药和微生态制剂防治仔猪黄白痢研究进展[J].中兽医医药杂志,2022,41(1):38-42.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[M].北京:中国医药科技出版社,2020:211.

[5]张明发,沈雅琴.苦参碱类生物碱的镇痛作用研究进展[J].药物评价研究,2018,41(5):904-911.

[6]孙笑奇,李定邦,何倩倩,等.生姜及其不同炮制品中化学成分含量及抗炎作用分析[J].亚太传统医药,2023,19(7):25-31.

[7]马晓茜,赵晓民.干姜水提物解热镇痛作用的实验研究[J].山东医学高等专科学校学报,2011,33(5):327-329.

[8]谢晓芳,王培,许欣,等.附子抗炎､镇痛作用与产地相关性研究[J].中华中医药学刊,2022,40(11):152-156.

[9]陆平祝,常楚瑞,龙庆德.苦参生品及麸炒品水提液抗炎镇痛作用初步研究[J].时珍国医国药,2021,32(8):1908-1910.

[13]喻琴,王东升,张世栋,等.鱼腥草芩蓝口服液抗炎镇痛作用研究[J].动物医学进展,2018,39(8):36-39.