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浅析云南省某乡镇育肥猪PRV、PRRSV和PCV-2抗体的检测情况
摘要：为了评价某乡镇育肥猪群中猪伪狂犬病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪圆环病毒2型疫苗免疫效果,试验随机采集该乡镇育肥猪血清81份(公猪52份,母猪29份),采用ELISA抗体检测试剂盒进行猪PRV-gB、PRRSV和PCV-2抗体检测。检测结果表明:该乡镇育肥猪PRV-gB抗体阳性率均为0,即为阴性;PRRSV抗体阳性率为30.86%,抗体水平较低;PCV-2抗体阳性率为91.36%。由于PCV-2抗体水平较高,且该乡镇未全面实施PCV免疫,免疫程序存在问题,可能存在野毒感染,需要进行合理改进。
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疫苗免疫是生猪传染病防控相对直接的手段,而衡量免疫效果的主要方法是抗体水平检测。近年来云南省猪病频发,疾病种类不断增多,给生猪养殖业造成巨大经济损失。猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的一种急性、接触性传染病,可引起繁殖障碍及仔猪消化道呼吸道综合征,对仔猪危害极大,死亡率可达100%[1,2]。猪在经过PRV急性感染后能形成潜伏性感染,终生带毒,在应激条件下潜伏状态的病毒能被激活,并引起复发性感染和向外散毒[3]。PR的临床特征为发热、脑脊髓炎,成年猪常为隐性感染,有流产、产死胎和呼吸系统症状;新生仔猪除有神经症状外还有消化系统症状。猪繁殖与呼吸综合征病毒能引起猪繁殖与呼吸综合征,PRRS是一种高度热性、高度接触传染的传染病[4]。临床主要表现为母猪流产、死胎、产木乃伊胎等繁殖障碍及保育猪与育肥猪严重呼吸道症状。该病发病急,死亡率高,传播速度快,引起猪机体抵抗力下降,容易继发其他疾病[5]。猪圆环病毒是迄今发现的最小的动物病毒之一[6]。猪对PCV-2型具有较强的易感性,病毒可自感染猪鼻液、粪便等废物中排出,再经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪,最常见临床症状是猪渐进性消瘦或生长迟缓,这也是诊断断奶仔猪多系统衰竭综合征所必需的临床依据。其他症状有厌食、精神沉郁、行动迟缓、皮肤苍白、被毛蓬乱、呼吸困难及咳嗽为特征的呼吸障碍[7,8],偶见腹泻和中枢神经系统紊乱症状。该病虽发病率低但病死率高。
本研究对云南省某乡镇所采集的血清样品分别进行PRV、PRRSV和PCV-2的抗体检测,为确保生猪产业健康、持续、稳定发展,及时发现潜在风险,以及对猪相关疾病进行有效的预防与治疗提供参考,也为该乡镇制订合理的免疫程序提供依据。
1、材料与方法
1.1材料
1.1.1血清样本:
2019年11月份从云南省某乡镇随机采集育肥猪(猪群为乡镇农村散养户饲养,实施的免疫为春、秋两防免疫,除规定的免疫疫苗外基本未实施过其他疫苗免疫)血清样品81份,其中公猪52份,母猪29份。室温5000r/min离心10min,吸取上清液,置于-20℃保存备检。
1.1.2主要试剂与仪器:
PRV-gB抗体检测试剂盒、PCV-2型抗体检测试剂盒,购自无锡优联生物科技有限公司;PRRSV抗体检测试剂盒,购自武汉科技前生物股份有限公司。酶标仪(型号:ELx800),购自美国伯腾仪器有限公司。
1.2方法
1.2.1抗体ELISA检测方法:
PRV、PRRSV、PCV-2抗体检测均严格按照试剂盒说明书进行操作,于630nm处检测吸光度值。
PRV-gB抗体阴性、阳性的判定:被检样品S/N(S=样品孔D630,N=阴性对照孔平均D630)≤0.6,样品判为阳性;被检样品S/N>0.7,样品判为阴性;0.6
PRRSV抗体阴性、阳性的判定:阳性对照D630均应≥0.8,阴性对照D630<0.3。计算样品的KQ值。ΚQ=样品D630阳性对照D630平均值×100,若KQ≥20,判为阳性;若KQ<20,判为阴性。
PCV-2抗体阴性、阳性的判定:阳性对照孔D630≥1.0,阴性对照孔D630<0.25。计算公式:S为样品D630,P为阳性对照血清平均值,N为阴性对照血清平均值,计算(S-N)/(P-N)值。若(S-N)/(P-N)≥0.16,则判为PCV-2抗体阳性;若(S-N)/(P-N)<0.16,判定为PCV-2抗体阴性。
1.2.2统计分析:
对阳性率及离散度等数据进行分析,抗体离散度是判定该免疫区域猪群抗体均匀度的一个重要指标。猪群整体PRV、PRRSV、PCV抗体的离散度一般≤40%较理想。
2、结果与分析
2.1育肥公猪、母猪PRV-gB抗体的检测
育肥公猪、母猪PRV-gB抗体的检测结果见表1。该乡镇育肥猪PRV-gB抗体阳性率均为0,公猪、母猪的S/N平均值比较相近且达到0.944,说明该乡镇猪群没有感染猪伪狂犬病野毒;公猪、母猪的抗体离散度均为0.04,离散度较低,表明个体差异较小,PRV抗体水平比较整齐。
表1育肥公猪、母猪PRV-gB抗体的检测结果
2.2育肥公猪、母猪PRRSV抗体的检测
乡镇育肥公猪、母猪PRRSV抗体的检测结果见表2。该乡镇育肥猪PRRSV抗体阳性率平均为30.86%,离散度较高(8.60～9.96),表明个体差异较大,抗体水平不整齐,有被野毒感染的风险,未达到应有的免疫效果,需筛查原因。
表2育肥公猪、母猪PRRSV抗体的检测结果
2.3育肥公猪、母猪PCV-2抗体的检测
乡镇育肥公猪、母猪PCV-2抗体的检测结果见表3。该乡镇育肥猪PCV-2抗体阳性率平均为91.36%,公猪PCV-2抗体阳性率为86.53%,母猪的PCV-2抗体阳性率最高,达到100.00%。因为该乡镇未全面实施PCV疫苗免疫,所以可能已被PCV野毒感染。离散度较低,说明个体差异较小,表明该乡镇大部分育肥猪都未实施PCV疫苗免疫。
表3育肥公猪、母猪PCV-2抗体的检测结果
3、讨论
畜牧业在我国经济发展进程中起着举足轻重的作用,然而传染病一直是影响畜牧业发展的重要问题,其中PR、PRRS和PMWS对养猪业具有较为严重的危害性,一旦发生,将给生猪产业带来巨大的经济损失,疫苗接种和抗体检测在疫病防控中尤为重要。
PRV的潜伏感染是威胁生猪健康的一大难题。目前该病尚无有效治疗药物,危急情况下可用高免血清治疗,仅能降低死亡率。使用PRV自然弱毒疫苗及基因缺失疫苗进行免疫,可减轻感染猪的临床症状,但难以控制该病的零星发生。本次检验中PRV-gB抗体阳性率均为0,表明该乡镇尚未发现被伪狂犬病毒野毒感染的生猪,是猪伪狂犬病毒野毒阴性场。加强防控、实时监测、严格产地检疫和屠宰检疫等手段,对维持生猪养殖业猪伪狂犬病毒感染阴性有积极作用,也是提高乡镇生猪生产效益的一个有效途径。PRV病猪及带毒鼠类是该病的主要传染源,因此要加强消毒和灭鼠等工作。但因散养户点多面广,要做到全面防制难度较大,必须由相关部门和政府出台相应防疫政策才能确保防疫工作全面开展实施,畜主最好做到自繁自养,以防出现交叉感染。
PRRS目前尚无特效治疗药物,预防该病的常用方法是用弱毒疫苗和灭活苗进行接种,但是仅仅靠免疫接种疫苗是远远不够的,还需要采取综合预防和控制措施,对感染病毒的病猪及时进行无害化处理,以切断传播途径,并加强产地检疫、屠宰检疫和疫病监测。本次检测中PRRSV抗体阳性率平均为30.86%,低于农业农村部规定群体免疫抗体合格率70%以上的合格标准,分析可能原因有:(1)疫苗的冷链体系运输保存不够完善造成疫苗失效;(2)疫苗使用方法不当,没有严格按照疫苗的使用方法科学操作,同时也可能是养殖户和兽医工作人员在疫苗接种过程中存在随意性,接种部位和接种方法选择不当;(3)未按疫苗使用的剂量准确接种疫苗,造成免疫动物的抗体水平参差不齐,严重影响免疫抗体效果;(4)PRRSV免疫已经退出了国家强制免疫计划,该地区没有重视或者没有全面实施PRRSV免疫工作。建议结合当地疫病流行情况制定防疫方案。
PMWS的预防和控制主要采用疫苗接种和综合性措施,但由于毒株变异、疫苗质量问题以及免疫程序不合理等因素,常造成免疫失败。目前对PCV感染尚无特效的治疗方法,因此对病猪的治疗主要集中在预防继发感染和提高机体抵抗力上:一是做好环境卫生和消毒措施;二是防止其他病原体共同感染和继发感染;三是发病时病猪要及时隔离饲养或淘汰,降低死亡率。本次检测中PCV-2型抗体阳性率平均为91.36%,表明该乡镇的猪圆环病毒抗体阳性率是比较高的,但由于该乡镇未全面实施PCV疫苗免疫接种,如此高的阳性率说明该乡镇的生猪有较高的PCV野毒感染概率,并存在普遍带毒现象,但未表现PMWS症状,建议该乡镇尽快排查该区域内生猪的健康状况,必要时应采取紧急免疫接种防止疫病暴发,对出现症状的生猪和发病区域要立即采取消毒和隔离,切断传染源和传播途径。
依据以上3种疫病的检测情况,该乡镇应加强生猪疫病防控力度,加强疫病防疫知识宣传,让养殖户认识到疫病防疫在养殖中的重要性,同时落实好春、秋两防免疫和免疫抗体采样检测,实时做好疫病监测,有效地控制传染源,切断传播途径,防止交叉感染,制定出行之有效的防控措施和免疫方案,为确保生猪产业安全、健康、持续稳定发展奠定良好的基础。
参考文献：
[6]王怀禹,陈俊,何子双,等.南充地区规模化猪场4种病毒性传染病的流行病学调查与分析[J].黑龙江畜牧兽医,2020(2):62-66.
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洪涛,单春兰,王浩,杨伟,王喜,万全,邓静,张博,高洪.云南省某乡镇育肥猪PRV、PRRSV和PCV-2抗体的检测及分析[J].上海畜牧兽医通讯,2020(03):41-43.
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期刊名称：上海畜牧兽医通讯
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主管单位：上海市农业科学院
主办单位：上海市农业科学院畜牧兽医研究所
出版地方：上海
专业分类：农业
国际刊号：1000-7725
国内刊号：31-1278/S
邮发代号：4-393
创刊时间：1956年
发行周期：双月刊
期刊开本：大16开
见刊时间：4-6个月
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2020-06-18
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