首页 > 论文范文 > 医药卫生论文 > 肿瘤科论文 > ZEB1-AS1在结肠癌中表达及与铂类药物化疗敏感性的关系

ZEB1-AS1在结肠癌中表达及与铂类药物化疗敏感性的关系

2023-10-25 58 上传者：管理员

摘要：目的探讨结肠癌组织中锌指E-盒结合同源异形盒(ZEB)1-反义链(AS)1的表达及其与铂类药物化疗敏感性的关系。方法选取结肠癌患者120例为研究组，收集患者手术过程中切除的癌组织及癌旁正常组织，实时荧光定量(qRT)-PCR法检测癌组织及癌旁组织中ZEB1-AS1的表达情况；分析ZEB1-AS1高低表达与临床病理特征的相关性；分析ZEB1-AS1高低表达与铂类化疗客观有效率的关系；Kaplan-Meier法分析ZEB1-AS1与5年生存期的关系；Cox回归模型分析影响患者预后不良的因素。结果研究组ZEB1-AS1水平高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。结肠癌患者ZEB1-AS1表达与年龄、性别、肿瘤直径不相关(P>0.05),与TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05)。ZEB1-AS1低表达患者治疗有效率显著高于ZEB1-AS1高表达患者(P<0.05)。Kaplan-Meier分析结果显示，ZEB1-AS1高表达患者5年生存率显著低于ZEB1-AS1低表达患者(P<0.05)。多因素Cox分析显示，TNM分期Ⅳ期、淋巴结转移、化疗无效、ZEB1-AS1高表达均是影响结肠癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 ZEB1-AS1在结肠癌患者组织中表达水平升高，其高表达与TNM分期、淋巴结转移有关，ZEB1-AS1低表达者应用奥沙利铂辅助治疗有效率高，ZEB1-AS1是影响结肠癌患者预后不良的危险因素。

关键词：
实体瘤
淋巴结转
结肠癌
铂类化疗
锌指E-盒结合同源异形盒1-反义链1
加入收藏

每年有超过60万人死于结肠癌，该病是世界上最常见的癌症类型之一，特点为预后较差，生存率低，严重威胁人类的生命健康[1]。临床发病率呈上升趋势，目前我国在恶性肿瘤中排名第四，与高蛋白饮食相关。与许多其他类型的癌症一样，结肠癌的发展是一个多阶段的过程，涉及遗传和表观遗传变化的积累[2]。锌指E-盒结合同源异形盒(ZEB)1-反义链(AS)1在肿瘤发生和发展过程中起重要作用[3]。铂类药物是目前最有效的抗癌药物之一，广泛应用于各种实体瘤的治疗，但铂类药物的广泛应用会导致肿瘤对铂类化疗的耐药。有研究表明ZEB1-AS1可能会对铂类化疗的疗效产生影响[4]。本研究旨在分析结肠癌中ZEB1-AS1的表达及其与铂类化疗药物敏感性及预后的关系。

1、材料与方法

1.1 一般资料

选取2016年1月至2018年1月滨州医学院烟台附属医院肿瘤科收治的结肠癌患者120例为研究组，男76例，女44例；年龄55～85岁，平均(69.09±4.78)岁；根据美国国立综合癌症网络(NCCN)TNM分期标准进行临床分期[5]:Ⅲ期59例，Ⅳ期61例；淋巴结转移79例，无淋巴结转移41例。纳入标准：①所有病例经过病理学诊断确诊为结肠癌；②患者术前均未行含铂类药物化疗；③对本研究内容知情，同意参加本次试验；④临床资料完整，有完整随访记录。排除标准：①合并其他癌症者；②合并心脏、肝脏及肾脏功能不全者；③有严重感染者。收集结肠癌患者手术过程中切除的癌组织及相应癌旁正常组织(对照组)石蜡包埋标本。本研究获得医院伦理委员会批准后实施，所有研究对象家属签署知情同意书。

1.2 方法

FOLFOX4方案：奥沙利铂100 mg/m2静脉滴注2 h, 第1天；亚叶酸钙200 mg/m2,静脉滴注2 h, 第1～2天；5-氟尿嘧啶400 mg/m2推注，第1～2天。每2 w重复，共进行6个周期以上化疗周期[6]。按照世界卫生组织实体瘤客观疗效评价标准[7]判断，化疗效果分为完全缓解(CR)、部分缓解(PR)、稳定(SD)与进展(PD),其中以CR+PR为有效。采用实时荧光定量(qRT-PCR)检测ZEB1-AS1水平：检测两组ZEB1-AS1水平，使用Trizol试剂从上述样本中抽提总RNA,利用紫外分光光度计检测总RNA含量，总RNA反转录为cDNA,利用荧光定量PCR仪分别对ZEB1-AS1和U6进行扩增，U6正向引物5′-GCTTCGGCAGCACATATACTAAAAT-3,反向5′-CGCTTCACGAATTTGCGTGTCAT-3′ZEB1-AS1正向引物5′-GAATATTCCTCCCACACCCA-3′,反向5′-TATGGTTTTGACGACTGTGTGAT-3′。采用2-△△Ct计算基因相对表达量。

1.3 随访

所有患者通过门诊复查的方式进行随访，记录患者手术后生存时间，随访期限为从患者手术完成至随访截止日期，或死亡、失访日期。随访5年，随访截止日期为2023年1月，随访率为100%。

1.4 统计学方法

采用SPSS25.0软件进行t检验、χ2检验、生存曲线(Kaplan-Meier)法及Cox回归模型分析。

2、结果

2.1 两组ZEB1-AS1水平比较

研究组ZEB1-AS1水平(2.83±0.84)高于对照组(1.07±0.32),差异有统计学意义(t=41.516,P=0.000)。

2.2 结肠癌组织中ZEB1-AS1表达水平与患者临床病理特征的关系

以结肠癌患者组织中ZEB1-AS1表达平均数(2.83)为界值将结肠癌患者分成ZEB1-AS1高表达组(n=57)与低表达组(n=63),结肠癌患者ZEB1-AS1表达与年龄、性别、肿瘤直径无关(P>0.05),与TNM分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。见表1。

2.3 ZEB1-AS1表达水平与化疗客观有效率的关系

化疗2～4个周期后(中位3个周期),有效53例，无效67例。ZEB1-AS1低表达患者治疗有效率[38例(60.3%)]高于ZEB1-AS1高表达患者[15例(26.32%)],差异有统计学意义(χ2=12.685,P=0.000)。

2.4 结肠癌组织中ZEB1-AS1表达水平与生存期的关系

Kaplan-Meier分析结果显示，ZEB1-AS1高表达患者5年生存率(26.30%)低于低表达患者(41.30%),差异有统计学意义(Log-rank=6.843,P<0.05)。见图1。

2.5 Cox回归模型分析影响结肠癌患者预后不良的因素

单因素Cox分析显示，TNM分期Ⅳ期、淋巴结转移、化疗无效、ZEB1-AS1高表达均是影响结肠癌患者预后不良的危险因素(P<0.05)。见表2;多因素Cox分析显示，TNM分期Ⅳ期、淋巴结转移、化疗无效、ZEB1-AS1高表达均是影响结肠癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。见表3。

表1 结肠癌组织中ZEB1-AS1高表达与患者临床病理特征的关系(n)

图1 结肠癌组织中ZEB1-AS1表达水平与生存期的关系

表2 影响结肠癌患者预后不良的单因素分析

表3 影响结肠癌患者预后不良的多因素分析

3、讨论

结肠癌是常见的消化道恶性肿瘤，在全球范围内为男性第3位、女性第2位高发性恶性肿瘤，每年新发约120万例，死亡约60万例[8]。早期症状不明显，随着癌肿的增大而表现出排便习惯改变、便血、腹泻、腹泻与便秘交替、局部腹痛等症状，晚期则表现贫血、体重减轻等全身症状。随着社会经济发展、居民生活方式的转变及人口老龄化的加剧，我国结肠癌的发病和死亡呈明显上升趋势，且发病年龄有所提前，严重威胁人类的生命健康[9]。ZEB1-AS1基因属于非编码RNA,隶属于长链非编码(lnc)RNA类[10]。该RNA是从具有ZEB1的共享双向启动子转录而来，与赖氨酸甲基转移酶2A结合并促进组蛋白修饰，这些修饰被认为可促进ZEB1的表达[11]。研究表明该基因的表达与肿瘤进展相关，与ZEB1-AS1相关的疾病包括膀胱癌和鳞状细胞癌[12]。奥沙利铂是新一代铂类抗肿瘤药物[13]。与顺铂、卡铂相比，奥沙利铂具有抗癌谱广、毒副作用小等优点，尤其可以有效治疗进展期大肠癌。然而由于药物使用的盲目性，无论单独还是联合应用，奥沙利铂的有效率不高[14]。

本研究结果唐银炳等[15]研究结果一致，ZEB1-AS1在胃癌中表达上调，与胃癌不良预后相关；此外，王妮娜等[16]研究也显示，ZEB1-AS1在乳腺癌中高表达，能够促进乳腺癌细胞迁移和侵袭；高儒旭[17]研究显示，在膀胱癌细胞中，ZEB1-AS1将通过调控miR-200b/FSCN1并与转化生长因子(TGF)-β1共同诱导膀胱癌细胞的增殖。刘芬等[18]研究发现ZEB1-AS1在食管鳞癌中高表达，且与不良预后相关；时北京等[19]报道LncRNA-ZEB1-AS1通过与miRNA形成ceRNA网络使肝癌预后不良。以上研究均表明LncRNA-ZEB1-AS1在多种肿瘤中都发挥促癌基因作用。

本研究结果说明ZEB1-AS1在结肠癌患者化疗耐药过程中发挥重要作用。与宋娇等[20]研究结果一致，ZEB1-AS1在子宫内膜癌中高表达，且其高表达与子宫内膜癌患者淋巴结转移、远端转移相关。该结果同时也证实过表达ZEB1-AS1可促进子宫内膜癌细胞的增殖，降低其对顺铂、5-氟尿嘧啶等化疗药物的敏感度。本研究结果说明结肠癌患者肿瘤组织中ZEB1-AS1低表达者应用奥沙利铂辅助化疗可能获得生存受益，ZEB1-AS1表达水平可以作为奥沙利铂治疗的筛选指标。

综上，ZEB1-AS1在结肠癌患者中高表达，是影响结肠癌患者预后不良的危险因素，且其高表达与化疗效果、TNM分期、淋巴结转移有关，ZEB1-AS1低表达者应用奥沙利铂辅助治疗有效率高。

参考文献:

[2]徐婧,周有连,徐豪明,等.循环游离DNA在结直肠癌诊疗中的应用进展[J].广东医学,2019;40(19):9-12.

[4]何苗,程宏文,江涛,等.调强放疗联合替吉奥化疗治疗铂类耐药复发直肠癌的疗效研究[J].中国继续医学教育,2019;11(27):118-20.

[5]崔靖宇,汪晓东,李立.2020.V6版《NCCN直肠癌临床实践指南》与2020.V2版《NCCN肛门癌临床实践指南》更新解读[J].中国普外基础与临床杂志,2020;27(11):26-9.

[6]周宇.肿瘤标志物基因表达与FOLFOX方案化疗后结直肠癌短中期预后的关系[J].中国临床药学杂志,2020;29(5):32-6.

[7]詹红丽,王蓉,王雯.进展期结直肠癌新辅助治疗疗效评价方法的研究进展[J].中华胃肠内镜电子杂志,2019;6(3):121-4.

[8]田剑波,温艳,杨卓煜,等.全球结直肠癌筛查指南及共识质量评价[J].中华流行病学杂志,2021;42(2):248-57.

[13]李叶,潘贤英,贺文财,等.miR-129在结肠癌中的表达及与铂类化疗敏感性的关系[J].河北医药,2019;41(20):3145-7,3151.

[14]严双丽,张荣生,王剑华.结直肠癌靶向药物治疗的应用与进展[J].世界肿瘤研究,2021;11(1):8-10.

[15]唐银炳,陆佳伟,谢黎,等.长链非编码RNA KCNMB2-AS1在胃癌中的表达及机制研究[J].实用医学杂志 2020;36(13):1759-64.

[16]王妮娜,李晓花,陈敏丽,等.长非编码RNA ZEB1-AS1在乳腺癌中的表达及其临床意义[J].国际肿瘤学杂志,2019;46(4):199-204.