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HCMV-IgM及HCMV-DNA检测在婴幼儿巨细胞病毒肝炎中的应用价值

2025-04-17 100 上传者：管理员

摘要：目的探讨HCMV-IgM及HCMV-DNA在婴幼儿巨细胞病毒肝炎中的应用价值。方法选取我院确诊的巨细胞病毒肝炎患儿108例为肝炎组，同期98例健康体检无感染症状的婴幼儿为对照组，检测两组对象的血清HCMV-IgM、血清与尿液的HCMV-DNA;比较各组HCMV-IgM和HCMV-DNA的阳性率差异，分析各指标约登指数、敏感度、特异性；将肝炎组按临床症状分组，比较各组间HCMV-IgM和HCMV-DNA的阳性率及定量值的差异。结果肝炎组HCMV-IgM、血清/尿液HCMV-DNA阳性率均高于对照组(P<0.05);肝炎组中，血/尿HCMV-DNA阳性率显著高于HCMV-IgM(P<0.05);按临床症状分组，多组间血清HCMV-IgM阳性率差异有统计学意义(P<0.05),血/尿HCMV-DNA阳性率差异无统计学意义(P>0.05),HCMV-IgM、HCMV-DNA定量值差异无统计学意义(P>0.05);肝脾肿大、发热咳嗽两组的HCMV-DNA阳性率高于HCMV-IgM(P<0.05);诊断效能：血/尿HCMV-DNA>尿液HCMV-DNA>血清HCMV-IgM抗体>血清HCMV-DNA。结论HCMV-IgM、HCMV-DNA对婴幼儿巨细胞病毒肝炎具有重要诊断价值，血尿HCMV-DNA联合检测价值高于单项检测，单项检测中尿HCMV-DNA价值最高。

关键词：
婴幼儿
巨细胞病毒-DNA
巨细胞病毒-IgM
巨细胞病毒肝炎
病原体
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人巨细胞病毒(HCMV)是一种人类普遍易感的病原体,感染后病毒不能被彻底清除,而是以潜伏的形式存在,一般人群初次感染后没有明显症状,婴幼儿极易感染且可导致严重后遗症。B.Popovic等[1]研究指出HCMV感染是婴儿肝炎综合征(IHS)的重要感染病原体,占50%以上,HCMV感染易导致肝脏各种功能遭受破坏。G.Enders等[2]报道指出血清HCMV-IgM和尿液HCMV-DNA常被作为IHS中HCMV感染的诊断依据。M.Rycel等[3]研究指出HCMV病毒载量与疾病严重程度相关。基于上述研究,本研究选取血液HCMV-IgM及血清/尿液HCMV-DNA这两项指标进行检测,找出两项指标在婴幼儿巨细胞病毒性肝炎中的应用价值。

1、资料与方法

1.1一般资料

选取我院2020年1月至2024年6月确诊的巨细胞病毒肝炎患儿108例为肝炎组,同期98例健康体检无感染症状的婴幼儿为对照组。肝炎组中男67例、女41例;年龄5天到1岁5个月。对照组中男56例、女42例;年龄10天至1岁9个月。肝炎组患儿纳入标准:符合巨细胞病毒肝炎诊断标准,且血液HCMV-IgM、血清/尿液HCMVDNA至少有一项为阳性。HCMV检测指标阳性判断标准:(1)血清HCMV-IgM>22AU/mL;(2)血清或尿液HCMV-DNA任一检测>500copy/mL。两组患儿一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。

1.2观察指标及方法

对比分析两组研究对象的血液HCMV-IgM、血清/尿液HCMV-DNA。肝炎组患儿的血液及尿液样本采集应在入院48h内临床用药前完成。所有对象于清晨采集空腹静脉血2~3mL,1h内送检,室温静置10~30min,以4000r/min离心10min,分离血清待检;采集清晨中段尿10mL,1h内送检;不能及时检测的血清及尿液样本置于-30℃保存。HCMV-IgM采用免疫发光分析仪(深圳亚辉龙,iFlash3000)及配套试剂检测,HCMVDNA采用宏石实时荧光PCR仪检测,试剂由达安基因公司提供;上述检测均严格按照SOP进行,HCMV-IgM及HCMV-DNA均开展实验室室内质控(IQC)、国家及广西区室间质评(EQA)成绩合格。

1.3统计学方法

采用SPSS25.0统计软件进行分析,计数资料表示为n(%),采用χ2检验;计量资料进行正态性分析后,符合正态分布的数据以(x-±s)表示,多组比较用方差分析,两两比较用t检验,非正态分布资料以M(P25,P75)表示,组间比较用MannWhitneyU非参数检验,多组间比较采用KruskalWallisH秩和检验;以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1HCMV-IgM与HCMV-DNA阳性率比较

肝炎组患儿的HCMV-IgM、HCMV-DNA阳性率均高于对照组(P<0.05);肝炎组中,HCMV-DNA阳性率显著高于HCMV-IgM(P<0.05)。见表1。

表1两组对象HCMV-IgM、HCMV-DNA阳性率比较

2.2肝炎组患儿不同临床症状的指标比较

肝炎组108例患儿根据临床症状不同进行分组,黄疸59例(54.6%)为A组、肝脾肿大44例(40.7%)为B组、发热咳嗽24例(22.2%)为C组、大便色浅20例(18.5%)为D组、先天发育不良5例(4.6%)为E组。分别分析肝炎患儿五个组的指标水平,当患儿血清和尿液HCMV-DNA检测均为阳性时,定量值取两者高值纳入计算。多组比较显示,C组的HCMV-IgM阳性率低于A组和E组(P<0.05),其余组间比较无差异(P>0.05);CMV-DNA阳性率,HCMV-IgM、HCMV-DNA定量差异均无统计学意义(P>0.05);同组间的HCMV-IgM与HCMVDNA阳性率比较:B、C两组的HCMV-DNA阳性率高于HCMV-IgM(P<0.05),其余组间比较无差异(P>0.05)。

表2五组肝炎患儿HCMV-IgM、HCMV-DNA水平比较

2.3HCMV-IgM、HCMV-DNA的诊断效能分析

各项指标约登指数及灵敏度均表现为:血/尿HCMV-DNA>尿液HCMV-DNA>血清HCMV-IgM抗体>血清HCMV-DNA,血/尿HCMV-DNA检测诊断价值最高;但特异性比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3HCMV-IgM、HCMV-DNA的诊断效能比较

3、讨论

目前临床常用的HCMV的检测方法主要有:病毒分离法,病毒特异抗原、血清特异性抗原抗体检测法,核酸检测法和核酸序列依赖性扩增检测法等。病毒的分离与培养既耗时,在临床又难以开展。临床研究表明肝功能检测指标异常的患儿,联合检测血清HCMV-IgM抗体和HCMV-DNA测定,结合相关实验室指标肝功能、肾功能、血液学检测、脂类检测特点才能更好的评估HCMV感染患儿状态。国内外大量文献报道指出血清巨细胞病毒IgM抗体与尿/血巨细胞病毒DNA同时实施检测,能显著提高巨细胞病毒活动性感染的检出率,利于临床分析其感染情况,从而为后期治疗提供合理依据。

本研究结果显示,肝炎组患儿的HCMV-IgM、HCMV-DNA阳性率均高于对照组(P<0.05);肝炎组中,血/尿HCMV-DNA阳性率高于HCMVIgM(P<0.05)。根据临床症状分成的五组患儿比较,血清HCMV-IgM阳性率存在差异,发热咳嗽组低于黄疸组及先天发育不良组(P<0.05);血/尿HCMV-DNA阳性率,HCMV-IgM、HCMV-DNA定量值差异无统计学意义(P>0.05);肝脾肿大、发热咳嗽两组的HCMV-DNA阳性率高于HCMVIgM(P<0.05),其余组间差异无统计学意义(P>0.05)。各项指标约登指数及灵敏度均表现为:血/尿HCMV-DNA>尿液HCMV-DNA>血清HCMV-IgM抗体>血清HCMV-DNA,血/尿HCMVDNA检测诊断价值最高;但特异性比较差异无统计学意义。从以上结果表明,HCMV病毒感染早期HCMV-IgM与HCMV-DNA检测对判断患儿是否为HCMV肝炎非常重要,对疾病的早期诊断帮助甚大;同时尿液或是婴幼儿HCMV感染诊断和鉴别诊断较合适的标本类型。分析原因,HCMV感染可刺激人体产生特异性抗体,HCMV抗体能反映机体对该病毒的应答状态,可作为感染的筛查指标。HCMV-IgM是HCMV感染后机体最早出现的抗体,是病毒活动性感染的标志。当新生儿血清HCMV-IgM(+)时,提示原发性感染,但由于婴幼儿细胞免疫和体液免疫系统发育不成熟,感染病毒后不能产生有效的免疫应答,抗体少或滴度过低,且IgM抗体生成至少需要约两周的窗口期,血清HCMVIgM抗体检测存在敏感度及特异度不够理想,有可能出现假阴性;且各生产厂家试剂间存在检验结果的判读上出现结果矛盾的现象。K.Tanimura等[4]就曾指出同属的疱疹病毒感染可引起HCMV-IgM检测出现假阳性。HCMV-DNA具有高灵敏度和特异性,能满足临床多种类样本的检测,且需要样本量小,创伤少,方法简单快捷,可用于早期诊断,PCR阴性对HCMV感染排除率高;动态监测DNA水平,可预测感染严重程度及治疗效果。研究[5]发现:血清HCMV-DNA检出率低于尿液,原因是HCMV属于胞内寄生病毒,肾小管上皮细胞极容易被HCMV侵犯,病毒在肾小管上皮细胞内快速大量复制,并随尿液中排出,而血液DNA需病毒完成胞内复制释放到胞外进入血液循环方可检测到。吴际等[6]的研究指出对于小月龄患儿临床应推广尿液HCMV-DNA检测。

参考文献:

[5]赵巍松,刘伶,杨飞.母乳及婴儿血液､尿液人巨细胞病毒DNA检测在婴儿HCMV感染中的应用[J].中国实验诊断学,2013,17(6):1059-1060.

[6]吴际,禄梦笛,郑有为,等.ELISA和荧光定量PCR诊断婴幼儿巨细胞病毒感染的临床价值[J].中国妇幼保健,2020,35(2):338-340.

基金资助:广西壮族自治区卫生健康委自筹经费科研(Z20210210);

文章来源:何新发,李燕妮.HCMV-IgM及HCMV-DNA检测在婴幼儿巨细胞病毒肝炎中的应用价值[J].贵州医药,2025,49(04):613-615.