摘要:目的:分析半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)与(1,3)-β-D-葡萄糖检测(G试验)对侵袭性肺部真菌感染(IPFI)的诊断效能。方法:选取2020年9月~2023年8月苏州大学附属常州老年病医院收治的126例疑似IPFI感染患者作为研究对象,本组患者均接受GM试验与G试验进行真菌抗原检测。观察疑似IPFI患者的诊断结果,比较GM试验、G试验与二者联合检测对于IPFI的诊断效能(敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值与符合率)以及IPFI患者与非IPFI患者的血清GM试验、G试验检测值。结果:本组疑似IPFI患者中确诊阳性98例(77.78%),阴性28例(22.22%),GM检验诊断阳性82例(65.08%),G检验诊断阳性80例(63.49%),GM检验联合G检验诊断阳性95例(75.40%)。GM试验联合G试验对于IPFI的诊断敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、符合率均高于单独GM试验与单独G试验,差异有统计学意义(P<0.05)。IPFI组患者血清GM试验与G试验检测值均高于非IPFI组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GM试验与G试验在IPFI诊断中具有一定的应用价值,且联合诊断效能更高,可为后续诊疗工作提供可靠的参考依据。
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侵袭性肺部真菌感染(IPFI)是真菌导致的支气管肺部真菌感染。近年来,随着糖皮质激素、免疫抑制剂、广谱抗菌药、细胞毒类等药物的大量使用,加之侵袭性治疗操作的增多,IPFI的发病率不断上升,给患者的健康与生命安全造成了巨大的影响[1]。有研究发现,早诊断与早治疗可以降低IPFI患者的死亡率[2]。然而,IPFI患者的早期症状与体征无明显的特征性,易与细菌性肺炎混淆,极易造成误诊与漏诊[3]。目前,真菌培养、痰涂片镜检与组织病理学是诊断IPFI的重要手段,其中痰涂片镜检测的阳性率偏低,真菌培养检测周期较长,且难以区分感染与定植,肺组织病理学属于有创操作,不易于广泛开展[4]。同时,血清真菌抗原作为无创性操作,现已在临床得到应用,但其敏感度仍不理想[5]。半乳甘露聚糖抗原检测(GM试验)与1,3-β-D-葡聚糖检测(G试验)是新型的IPFI真菌抗原检测技术,具有操作简便、敏感度高等优势,现已成为临床研究的热点[6]。本研究旨在分析GM试验与G试验的诊断效能。
1、资料与方法
1.1一般资料:选取2020年9月~2023年8月苏州大学附属常州老年病医院收治的126例疑似IPFI感染患者作为研究对象,其中男66例,女60例;年龄32~78岁,平均(58.65±8.50)岁;体重指数(BMI)18.65~27.89kg/m2,平均(23.32±2.23)kg/m2;原发疾病包括间质性肺疾病30例,慢性阻塞性肺疾病42例,风湿性心脏病18例,糖尿病20例,其他16例。①纳入标准:临床表现为持续性发热、咳嗽、呼吸困难,并伴有IPFI高危因素,即60d内出现外周血白细胞<0.5×109/L,持续时间在10d及以上;有IPFI病史;30d内接受过免疫抑制剂治疗;长时间机械通气、大手术、创伤、体内留置导管;糖皮质激素治疗时间在3周以上。②排除标准:近6个月使用过抗真菌药物治疗;近1周内使用过可能影响细菌细胞壁结构的药物;接受血液透析治疗;静脉注射血制品或免疫球蛋白;哺乳期或妊娠期女性;患有精神疾病。所有患者与其家属均对本研究知情同意。本研究经本院医学伦理委员会同意。
1.2方法:本组患者均接受GM试验与G试验进行真菌抗原检测。方法:晨起空腹状态下采集患者的非抗凝血5ml,高速(4000r/min)离心,时间为10min,半径为8cm,存放在6℃冰箱内待检测。①GM试验:使用酶标仪(型号:RT6100,深圳雷杜生命科学股份有限公司)联合酶联免疫吸附试验(ELISA)检测,试剂盒购自美国伯乐公司,具体操作严格按照说明书执行。②G试验:使用全自动酶免仪(型号:Sunrise,瑞士TECAN集团公司)联合显色法进行检测,试剂盒购自丹娜生物科技有限公司,具体操作严格按照说明书执行。根据试剂盒提供的参考值判定阳性诊断标准,即G试验以>60pg/L为阳性,GM试验>0.5pg/L为阳性。
1.3观察指标:①将《侵袭性肺部真菌感染诊断标准》[7]结合组织病理学结果作为金标准,观察本组126例疑似IPFI患者的诊断结果。②比较GM试验、G试验与二者联合对于IPFI的诊断效能,即诊断的敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、符合率。③比较IPFI患者与非IPFI患者的血清GM试验与G试验检测值。
1.4统计学分析:采用SPSS26.0统计学软件进行t及χ2检验。
2、结果
2.1本组疑似IPFI患者的诊断结果:本组126例疑似IPFI患者中确诊阳性98例(77.78%),阴性28例(22.22%);GM检验诊断阳性82例(65.08%),G检验诊断阳性80例(63.49%),GM检验联合G检验诊断阳性95例(75.40%)。
2.2GM试验、G试验与二者联合对于IPFI的诊断效能比较:GM试验联合G试验对于IPFI的诊断敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、符合率均高于单独GM试验(敏感性χ2=9.850,P=0.002;特异性χ2=7.376,P=0.007;阴性预测值χ2=10.651,P=0.001;阳性预测值χ2=6.274,P=0.012;符合率χ2=16.456,P<0.001)与单独G试验(敏感性χ2=12.000,P=0.001;特异性χ2=8.750,P=0.003;阴性预测值χ2=12.891,P<0.001;阳性预测值χ2=7.410,P=0.006;符合率χ2=19.799,P<0.001)。见表1。
表1GM试验、G试验与二者联合对于IPFI的诊断效能比较[n/N(%),n=126]
2.3IPFI患者与非IPFI患者的血清GM试验与G试验检测值比较:IPFI组患者血清GM试验检测值(2.60±0.25)ng/L与G试验检测值(149.65±12.58)ng/L均高于非IPFI组患者的(0.25±0.12)ng/L与(43.50±5.05)ng/L,差异有统计学意义(t=48.080、43.556,P<0.001)。
3、讨论
真菌是一种有典型细胞核与细胞壁结构,可以进行无性或有性繁殖的真核细胞型微生物。IPFI是指真菌侵犯肺部与支气管,引起肺部炎性反应肉芽肿与气道黏膜炎性反应,甚至导致坏死性肺炎或血行播散至其他部位,常见真菌类型包括曲霉属、念球菌属、隐球菌属、接合菌与肺孢子菌等[8]。目前,痰培养、组织检查与影像学技术是IPFI检测的主要方法,但痰培养周期长且阳性率偏低,影像学与组织学因缺少典型的变化也在一定程度上影响了诊断效果[9]。因此,探寻高效的检测技术保障IPFI患者的诊疗效果十分必要。
半乳甘露聚糖属于曲霉细胞壁上的多糖成分,其在组织侵袭时能够释放至血液与体液中[10]。有研究发现,在曲霉菌感染患者发生影像学异常或明显的临床症状前,半乳甘露聚糖在体内循环中已呈阳性反应[11]。1,3-β-D-葡聚糖通常在多种真菌的细胞壁中分布,含量占真菌细胞壁的50%以上,是除了隐球酵母与接合菌属外其他真菌的特有细胞成分,正常机体内的含量并不高,一旦真菌侵入人体深部组织或血液,被吞噬细菌消化后,便可以从细胞壁中释出,继而在体内呈高水平表达[12-13]。本研究结果显示,真菌感染时,真菌细胞壁内的特异性物质1,3-β-D-葡聚糖由细胞壁向血液内释放,而当曲霉侵犯组织时半乳甘露聚糖亦可释放入血,早期感染后便可在血清中呈高水平表达,故IPFI患者的血清GM试验与G试验检测值可见明显升高。同时,GM试验联合G试验对于IPFI的诊断敏感性、特异性、阳性预测值、阴性预测值、符合率均高于单独GM试验与单独G试验。可见,G试验通过检测1,3-β-D葡聚糖含量诊断IPFI,GM试验属于水溶性多糖抗原,稳定性性较佳,二者联合检测可以弥补单一检测的不足,继而提高了诊断效能[14-15]。需要注意的是,GM试验与G试验受一些因素的影响,可能出现假阳性,如标本污染、使用半合成青霉素、链球菌血症、血液透析、静脉注射血制品或免疫球蛋白、使用多糖类化疗药物等,临床应给予足够的重视[16-17]。此外,本次研究以血液为标本进行检测,结果存在假阴性,临床诊断过程中可以联合其他诊断技术,或采集支气管肺泡灌洗液进行检测,以便提高IPFI的诊断准确性[18]。
综上,GM试验与G试验在IPFI诊断中具有一定的应用价值,且联合诊断效能更高,可为后续诊疗工作提供可靠的参考依据。
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文章来源:陈钰,徐晓蓉,刘金花.GM试验与G试验对侵袭性肺部真菌感染的诊断效能[J].吉林医学,2025,46(03):608-611.
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