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多药耐药鲍曼不动杆菌医院感染特征与基因同源性分析

2025-04-21 70 上传者：管理员

摘要：目的探讨三明市第一医院多药耐药鲍曼不动杆菌（MDR-AB）医院感染特征与同源性。方法收集三明市第一医院2020年1月至2021年12月检测到的MDR-AB。采用肠杆菌基因间重复一致序列聚合酶链反应技术对93株MDR-AB进行同源性分析。结果 MDR-AB感染者以男性、老年患者多见，主要分布在ICU(44.1%)。根据同源性分析将感染菌株大致分为4类，其中A类菌株居多。结论患者免疫力低下和采用侵入性操作是感染MDR-AB的重要因素，ICU是医院MDR-AB感染的高危科室，要做好重点管理，以防止患者感染MDR-AB。

关键词：
AB
同源性
多药耐药鲍曼不动杆菌
感染特征
革兰阴性杆菌
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鲍曼不动杆菌(Acinetobacterbaumannii,AB)为革兰阴性杆菌,在大自然里广泛存在,通过黏附或者定植的作用污染物体或人体暴露的表面,传播方式包括接触传播和空气传播两种｡由于各类的消毒剂和抗菌药物容易使AB产生耐药性,近年来,抗菌药物不规范､不合理使用导致耐药形势更为严峻,导致患者治疗效果不佳[1-2]｡AB现成为院内主要致病菌之一,感染AB发患者有可能引起相关性肺炎､脑膜炎､菌血症､伤口和软组织感染､腹膜炎和尿路感染等[3-4]｡为能更好地探讨三明市第一医院多药耐药鲍曼不动杆菌(multidrugresistantAcinetobacterbaumannii,MDR-AB)的感染特征､危险因素以及同源性,本研究中主要从院内多药耐药菌株的感染､耐药性以及同源性进行统计分析｡

1、材料与方法

1.1实验材料与设备93株冻存MDR-AB菌株､哥伦比亚血平板､全自动微生物鉴定仪及鉴定卡(法国梅里埃公司,VITER2)､Hirayama高压灭菌器(日本Hirayama平山制作所株式会社,hve-50)､金属恒温锅(杭州佑宁仪器有限公司,CH-100)､高速冷冻离心机(德国艾本德股份公司,5424R)､生物安全柜(赛默飞世尔科技公司,1300SeriesA2)､PCR仪(西安天隆科技有限公司,9600S)等等｡

1.2资料收集收集2020年1月至2021年12月三明市第一医院感染AB患者的基本信息｡通过医院实时监测系统查阅患者的病例记录,收集患者的基本信息,如性别､年龄､标本类型､所处科室､耐药情况､本次同源性分析试验标本来源于三明市第一医院分离冻存的MDR-AB共93株(经VITER2-compact全自动微生物鉴定系统及K-B纸片扩散法结合得到的3种或3种以上类型抗菌药物耐药的菌株)｡MDR-AB的判断标准:多药耐药性被定义为对3种或更多类型抗生素(每类至少1种药物)均耐药的情况[5]｡1.3菌株DNA提取法借鉴煮沸法对冻存菌株进行DNA提取｡将冻存菌株置于室温下解冻,试纸条轻轻接种在血平板上,隔天后再接种一代,之后挑取二代菌落2或3个与100μl无菌双蒸水充分混匀,放入金属恒温锅100℃密封放置15min取出,待冷却后以12000g/min高速离心10min,取上清液作为模板DNA,-20℃保存备用[6]｡

1.4同源性分析方法采用ERIC-PCR技术和琼脂糖凝胶电泳,具体步骤见下｡①先设计特定引物｡引物1:3’-CACTTAGGGGTCCTCGAATGTA-5’;引物2:5’-AAGTAAGTGACTGGGGTGAGCG-3’｡②制备扩增体系｡总体系为25μl,其中PCR预混液12.5μl,引物1､引物2､模板DNA各1μl,加无菌双蒸水将体系补足｡③PCR仪设置参数:94℃变性(预变性5min､变性30s)､40℃退火1min､72℃延伸10min,循环35次,最后置72℃延伸10min,获得DNA扩增产物｡④取10μlDNA扩增产物以15g/L琼脂糖凝胶电泳,得到指纹图谱｡⑤对电泳图谱进行聚类分析,采用Quantityone4.6.2软件中UPGMA方法,设置参数为条带位置差异容许度为1.7%,优化值为0.5%,判断标准为相似度值>80%者为同一基因型,代表同一种克隆型;<80%者为不同基因型,代表不同种的克隆株[6]｡

2、结果

2.1感染情况2020年1月至2021年12月感染AB患者共547例(剔除相同患者),其中感染MDR-AB患者261例,感染非多药耐药鲍曼不动杆菌(non-multidrugresistantAcinetobacterbaumannii,non-MDR-AB)患者286例｡

2.2年龄分布情况感染AB患者的年龄为(62.07±22.65)岁｡21~40岁､40~60岁年龄段MDR-AB组多于non-MDR-AB组;而≤20岁､60~80岁､>80岁年龄段MDR-AB组少于nonMDR-AB组｡见表1｡

表12020—2021年AB菌株的年龄-耐药分布情况

2.3标本类型分布情况检出患者感染MDR-AB主要是痰液标本,约占总标本88.9%,也可在尿､血液､支气管灌洗液､分泌物等标本中检出｡见表2｡

表22020—2021年感染AB菌株的标本类型分布情况[n(%)]

2.4科室分布情况入住ICU患者检出MDR-AB感染可达44.1%,其次为呼吸内科､神经外科｡其他科室也存在MDR-AB感染情况,但均较少｡见表3｡

表22020—2021年感染AB菌株的标本类型分布情况[n(%)]

2.5冻存标本MDR-AB耐药情况耐药情况可见对多种抗菌药物的耐药率达95%以上｡如氨苄西林/舒巴坦､环丙沙星､左氧氟沙星､亚胺培南､美罗培南､多种头孢菌素类抗生素､哌拉西林/他唑巴坦,其中亚胺培南的耐药率达100%｡而阿米卡星､妥布霉素､米诺环素的敏感率高｡见表4｡

表493株MDR-AB菌株对21种抗菌药物的耐药情况[n(%)]

2.6同源性分析结果经ERIC-PCR扩增产物所得的电泳条带上观察得出,93株MDR-AB菌株可扩增出2~5个条带,根据相似度值>80%者为同一克隆型,<80%为不同克隆型,分别命名为5类,A~E类,其中A类菌株数最多,E类为图谱中<相似度80%且不易分类｡见图1｡

图1193株MDR-AB的ERIC-PCR电泳图谱

3、讨论

本研究中,感染AB的男性患者居多,且老年人较容易感染MDR-AB,这可能与老年人自身免疫力低下相关[7]｡本研究统计得出收集到的感染MDR-AB的标本类型主要是痰标本,高达88.9%,本院中感染科室主要集中在ICU,呼吸内科､神经外科次之｡感染MDR-AB最常见的科室为ICU的原因是:①患有严重疾病程度以及存在合并症､营养状况改变､住院时间延长､侵入性手术､免疫抑制药物和广谱抗生素,患者的免疫系统受损;②疾病严重程度以及导管､引流管､探头和机械通气的存在都是与AB感染/定植相关的危险因素,容易形成XDR-AB的生物膜[8-9];③ICU患者的病情严重,抵抗力差,易受感染｡因此,在进行科室消毒时,要多次定期及时对机械器具和环境进行有效消毒,加强医务人员和保洁人员等手卫生的监管,减少AB菌定植吸附在物体表面以及存活在空气中[10]｡

本研究中,93例MDR-AB感染患者对多数抗菌药物类型耐药,且耐药率在95%以上,攘括了氨基糖苷类､第二､三､四代头孢菌素类､碳青霉烯类､喹诺酮类､硝基呋喃类;除了AB天然耐药的氨苄西林和氨曲南,本院中该类菌株对亚胺培南耐药率达100%｡另外,本研究统计发现,本院菌株对阿米卡星､妥布霉素､米诺环素的敏感率较高,可达50%以上,表明治疗本院感染MDR-AB患者使用后述敏感率高的3种抗菌药物效果更好｡

综上所述,各种因素造成患者免疫力低下和采用侵入性操作是感染MDR-AB的重要因素,ICU是医院MDR-AB感染的高危科室｡医师务必根据自己所在医院MDR-AB药敏结果使用正确合理抗菌治疗方案,避免滥用抗生素,避免多药耐药情况发生,协助医院把握院感防控重点｡

参考文献:

[1]徐益,王佳,高辉,等.多重耐药鲍曼不动杆菌耐药性及耐药基因检测[J].国际检验医学杂志,2020,41(8):993-995.

[2]牟娜,孙巨勇,陈赫军,等.重型颅脑损伤患者术后继发肺部感染鲍曼不动杆菌危险因素分析[J].中国现代应用药学,2017,34(5):740-743.

[5]卫生部办公厅关于印发《多重耐药菌医院感染预防与控制技术指南(试行)》的通知[J].中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会公报,2011,2:59-61.

[6]刘超,魏晔,陆仁飞,等.鲍曼不动杆菌耐药特征及苯唑西林酶基因分型的研究[J].南通大学学报(医学版),2019,39(1):31-35.

[7]张静,郭璐,解郑良,等.重症监护病房患者发生多重耐药鲍曼不动杆菌血流感染影响预后的危险因素分析[J].中国感染与化疗杂志,2019,19(6):611-615.

[10]卯建,单斌,宋贵波,等.多重耐药鲍曼不动杆菌血流感染的危险因素和预后分析[J].中国感染与化疗杂志,2020,20(1):11-17.

文章来源:陈龙,卓德祥,林允斌.多药耐药鲍曼不动杆菌医院感染特征与基因同源性分析[J].中国医药指南,2025,23(11):134-136.