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2022—2024年四川省色达县小型哺乳类动物棘球蚴感染调查

  2025-06-14    66  上传者:管理员

摘要:目的了解2022—2024年色达县小型哺乳类动物棘球蚴感染情况,为棘球蚴病防治工作提供依据。方法2022—2024年每年5月,在色达县大章乡、泥朵乡、塔子乡和克戈乡捕捉小型哺乳类动物。现场解剖,目检肝肺等脏器是否存在疑似棘球蚴病灶,采集存在疑似棘球蚴病灶的小型哺乳类动物脏器。提取目检疑似棘球蚴病灶基因组DNA,PCR扩增棘球绦虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基1基因。对扩增产物进行测序,依据测序比对结果计算小型哺乳类动物棘球蚴感染率。采用R4.4.2软件进行统计分析。感染率的差异比较采用χ2检验,时间变化趋势分析采用Cochran-Armitage线性趋势检验,检验水准为α=0.05。结果2022—2024年色达县共捕获小型哺乳类动物3659只,其中高原鼠兔2864只,青海松田鼠795只,多房、石渠棘球蚴感染率分别为0.22%(8/3659)、1.86%(68/3659),石渠棘球蚴感染率高于多房棘球蚴(χ2=47.87,P<0.001)。色达县小型哺乳类动物多房棘球蚴及石渠棘球蚴感染率均呈逐年下降趋势(Z值分别为-3.42、-1.99,P均<0.05)。青海松田鼠感染的棘球蚴均为多房棘球蚴,高原鼠兔感染的棘球蚴均为石渠棘球蚴。所有调查乡镇均检出石渠棘球蚴,仅泥朵乡检出多房棘球蚴。结论2022—2024年色达县小型哺乳类动物感染的棘球蚴优势虫种为石渠棘球蚴。多房棘球蚴感染持续处于较低水平,但其传播风险仍然存在。

  • 关键词:
  • 人兽共患
  • 寄生虫
  • 小型哺乳类动物
  • 棘球蚴
  • 色达县
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棘球蚴病是一种严重危害人民群众身体健康的人兽共患寄生虫病。人通过误摄入棘球绦虫虫卵而感染棘球蚴病。目前国内流行的棘球绦虫主要有细粒、多房和石渠棘球绦虫。细粒、多房棘球绦虫幼虫寄生于人体,分别引起细粒棘球蚴病和多房棘球蚴病。石渠棘球绦虫是否致人患病,尚未明确。棘球绦虫需要2个哺乳动物宿主完成其生活史[1]。犬科动物是细粒、多房、石渠棘球绦虫的终末宿主[1-2],小型哺乳类动物是多房棘球绦虫和石渠棘球绦虫的中间宿主[1-2]。

色达县是四川省人群多房棘球蚴病流行第二严重的县[3],明确该县宿主间多房棘球绦虫感染情况,对当地多房棘球蚴病防控工作有重要意义。2021年调查显示,色达县野外终末宿主多房棘球绦虫感染率为5.68%(30/528)[4]。然而2020—2021年监测结果显示,色达县小型哺乳类动物感染的棘球蚴均为石渠棘球蚴,未见多房棘球蚴感染[5]。中间宿主未检出多房棘球蚴感染,而终末宿主存在多房棘球蚴感染,可能原因为中间宿主监测任务样本量较少,每年仅选择1个乡镇开展,而终末宿主棘球绦虫感染情况的调查范围为6个棘球蚴病流行乡镇。因此,2022—2024年每年均在色达县选取4个乡镇开展小型哺乳类动物棘球蚴感染调查,以期进一步明确该县小型哺乳类动物棘球蚴感染情况,为当地棘球蚴病防控工作提供依据。


1、材料与方法


1.1调查区域选择

基于2016—2019年色达县人群棘球蚴病流行病学调查结果[3],以该县各乡镇人群多房棘球蚴病患病率为依据,在多房棘球蚴病患病率大于1%的9个乡镇随机抽取3个乡镇,小于或等于1%的8个乡镇随机抽取1个乡镇,调查乡镇最终确定为大章乡、泥朵乡、塔子乡和克戈乡。

1.2小型哺乳类动物捕捉及形态学鉴定

鉴于5月为青海松田鼠和高原鼠兔繁殖期[6-7],分别于2022—2024年每年5月,在抽取的调查乡镇捕捉小型哺乳类动物。每个乡镇均选择2个调查区域(均为草地),区域间隔至少3km。每个区域设置1~2个50m×50m调查样方,样方间隔100m。参考《中国哺乳动物种和亚种分类名录与分布大全》[8],依据动物的体征数据、毛色及身体各部分比例、牙齿等形态学特征进行物种鉴定。捕获结束,现场解剖,目检肝肺等脏器是否存在疑似棘球蚴病灶,采集目检存在疑似棘球蚴病灶的脏器组织,置于75%乙醇保存,待分子生物学检测。

1.3小型哺乳类动物棘球蚴感染情况检测及感染虫种鉴定

按照DNA提取试剂盒(德国Qiagen公司)说明书剪取目检疑似病灶,提取基因组DNA,置于-20℃保存备用。由上海Invitrogen公司合成带科绦虫线粒体细胞色素C氧化酶亚基1(cytochromecoxidasesubunit1,cox1)基因的通用引物(cox1-F:3′-TTGAATTTGCCACGTTTGAATGC-5′,cox1-R:3′-GAACCTAACGACATAACATAATGA-5′)[9]。采用聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction,PCR)技术扩增cox1基因,PCR体系(50μl)如下:Taq酶预混液25μl,无RNA酶水17μl,10μmol/L上、下游引物各1.5μl,DNA模板5.0μl。PCR反应条件:94℃3min;94℃30s,54℃45s,72℃60s,共35个循环;72℃5min。采用2%琼脂糖凝胶电泳检测PCR扩增产物。将阳性PCR产物送至生工生物工程(上海)股份有限公司进行克隆和双向测序,将序列在NCBI数据库中进行BLAST(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/)比对以确定虫种。根据测序比对结果统计小型哺乳类动物棘球蚴感染情况。

1.4统计分析

采用R4.4.2软件进行统计分析。感染率的差异比较采用χ2检验,时间变化趋势分析采用Cochran-Armitage线性趋势检验,检验水准为α=0.05。1.5伦理学声明本研究经四川省疾病预防控制中心伦理委员会批准(批准号:SCCDCIRB第2022-02号)。


2、结果


2.1小型哺乳类动物棘球蚴感染概况

2022—2024年色达县共捕获小型哺乳类动物3659只,其中高原鼠兔2864只,青海松田鼠795只。76只感染棘球蚴;其中,8只青海松田鼠感染多房棘球蚴,感染率为1.01%(8/795),68只高原鼠兔感染石渠棘球蚴,感染率为2.37%(68/2864);青海松田鼠多房棘球蚴感染率高于高原鼠兔(χ2=24.46,P<0.001),石渠棘球蚴感染率低于高原鼠兔(χ2=19.23,P<0.001)。色达县多房、石渠棘球蚴感染率分别为0.22%(8/3659)、1.86%(68/3659),石渠棘球蚴感染率高于多房棘球蚴感染率,差异有统计学意义(χ2=47.87,P<0.001)。

2.2不同年度色达县小型哺乳类动物棘球蚴感染情况及趋势分析

2022年色达县共捕获小型哺乳类动物1248只;38只感染棘球蚴,其中8只感染多房棘球蚴,30只感染石渠棘球蚴;多房、石渠棘球蚴感染率分别为0.64%(8/1248)、2.40%(30/1248)。2023年共捕获小型哺乳类动物1200只;22只感染石渠棘球蚴,感染率为1.83%(22/1200);未见多房棘球蚴感染。2024年共捕获小型哺乳类动物1211只;16只感染石渠棘球蚴,感染率为1.32%(16/1211);未见多房棘球蚴感染,见表1。线性趋势检验结果显示,2022—2024年色达县小型哺乳类动物多房、石渠棘球蚴感染率均呈逐年下降趋势(Z多房=-3.42,P<0.001;Z石渠=-1.99,P=0.047)。

2.3不同乡镇小型哺乳类动物棘球蚴感染情况

所有调查乡镇均检出石渠棘球蚴,仅泥朵乡检出多房棘球蚴,见表2。

表12022—2024年色达县小型哺乳类动物棘球蚴感染情况

表22022—2024年色达县不同乡镇小型哺乳类动物棘球蚴感染情况


3、讨论


目前,检测小型哺乳类动物是否感染棘球蚴的方法主要为剖检法及PCR检测方法[10-16]。由于PCR检测方法具备剖检法不具备的准确检测早期棘球蚴病灶并明确所感染棘球蚴虫种的优势,中间宿主棘球蚴感染流行病学调查中最广泛采用的检测方法是PCR。本研究连续3年在色达县捕捉小型哺乳类动物,并采用PCR检测方法明确小型哺乳类动物棘球蚴感染情况。结果显示,2022—2024年色达县小型哺乳类动物多房棘球蚴感染率整体较低,呈逐年下降趋势,提示随着各项棘球蚴病防控措施的落实,色达县多房棘球蚴流行情况得到有效遏制,但流行风险仍然存在。为避免人群多房棘球蚴病疫情反弹,色达县需持续落实包括野外终末宿主驱虫、降低野犬密度及家犬栓养、月月驱虫在内的各项棘球蚴病防控措施[17]。

既往研究显示,青海松田鼠及高原鼠兔均为多房棘球绦虫的中间宿主[14-16]。多个研究结果显示,青海田鼠多房棘球蚴感染率高于高原鼠兔[14-16]。本研究与既往研究结果一致,提示相较于高原鼠兔,青海松田鼠可能更易感染多房棘球绦虫。2022—2024年色达县仅泥朵乡检出多房棘球蚴感染,且检出多房棘球蚴小型哺乳类动物均为青海松田鼠,可能原因为色达县青海松田鼠主要分布于泥朵乡[18]。泥朵乡应重点落实棘球蚴病综合防控措施。

2005年,有学者首次论证了四川省石渠县流行的石渠棘球绦虫是一种不同于既往报道的棘球绦虫的一种新的虫种[2]。2020—2021年监测数据显示,石渠棘球绦虫在四川省多房棘球蚴病流行区广泛流行[5]。2021年色达县野外食肉动物棘球绦虫感染情况调查显示,该县野外犬科动物石渠棘球绦虫感染率为14.20%(75/528),明显高于多房棘球绦虫感染率(5.68%,30/528)[4]。本次调查结果显示,2022—2024年色达县小型哺乳类动物石渠棘球蚴感染率为1.86%,高于多房棘球蚴感染率(0.22%)。提示近几年色达县棘球绦虫野生循环中,石渠棘球绦虫为优势流行虫种。截至目前,尚无石渠棘球绦虫致人患病的确切证据,是否需要控制野生宿主间石渠棘球绦虫的流行,有待进一步研究及讨论。


参考文献:

[4]杨柳,杨毅,喻文杰,等.基于粪便DNA的四川省色达县野生食肉动物棘球绦虫感染调查[J].中国血吸虫病防治杂志,2023,35(5):492-496.

[5]杨柳,廖沙,罗钊辉,等.2020—2021年四川省棘球蚴病中间宿主监测结果分析[J].预防医学情报杂志,2023,39(8):930-936.

[6]丁晓涛,何秀琼,曹玉琼,等.高原鼠兔繁殖及种群年龄结构的初步研究[J].四川畜牧兽医,2000(S1):54-55.

[7]贺有龙,周睿,罗雪云,等.果洛州高寒草甸青海田鼠种群年龄划分及年龄结构季节性特征[J].草原与草坪,2024,44(5):174-182.

[8]王应祥.中国哺乳动物种和亚种分类名录与分布大全[M].中国林业出版社,2003:90-92.


基金资助:四川省科技计划(项目编号:2023YFS0221);四川省疾病预防控制中心课题(项目编号:ZX202303);


文章来源:杨柳,杨毅,喻文杰,等.2022—2024年四川省色达县小型哺乳类动物棘球蚴感染调查[J].寄生虫病与感染性疾病,2025,23(02):98-102.

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出版地方:四川

专业分类:医学

国际刊号:1672-2116

国内刊号:51-1636/R

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创刊时间:1993年

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期刊开本:16开

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