Rh血型系统是人体除了 ABO 血型系统外的另一个重要的血型系统，是一个具有复杂性、多态性的血液抗原系统，且有很强的免疫原性。Rh 血型系统包括55个抗原，其中主要的5种抗原分别为D、C、E、c、e, 且与临床密切相关[1,2]。与ABO血型系统不同，Rh血型系统中很少存在天然抗体，其产生的抗体多为经妊娠或输血的免疫性刺激机体产生的非天然免疫性免疫球蛋白(Ig)G型血型抗体[3]。目前，国家临床输血技术规范对红细胞输注要求是ABO、RhD同型，但未对RhC、E、c、e抗原同型输注作出明确要求，而Rh血型不合的输血或妊娠产生的Rh血型抗体可能导致严重的溶血性输血反应或新生儿溶血病[4]。基于Rh血型系统的重要性，本研究检测了桂北地区9 610例RhD阳性标本，统计并分析了Rh抗原及其表型的分布情况，并探讨了210例有输血史或妊娠史患者Rh表型配合性红细胞输注(配合性红细胞输注是指与患者具有RhC、E、c、e抗原相同表型或无相应抗原Rh表型血制品的输注)的疗效，以期为建立桂北地区Rh表型数据库提供可靠的参考依据和为临床输血提供可行的参考方案。现报道如下。

1、资料与方法

1.1 一般资料

选取2021年9月至2022年4月本院9 645例血液标本作为研究对象，其中RhD阳性标本9 610例，RhD阴性标本35例。将9 610例RhD阳性标本作为Rh抗原分型研究对象，由于RhD阴性标本数量少，因此不纳入Rh抗原分型研究对象。标本来源包括无偿献血者(中心血站配送至本院的红细胞悬液的标本)、体检健康人群、需要做血型检测的患者。另选取2021年7月至2023年7月本院收治的有输血史或妊娠史的210例输血患者进行配血观察研究。在ABO和RhD同型的基础上，将210例输血患者分为RhC、E、c、e配合性输注组(观察组，105例)和非配合性输注组(对照组，105例),观察组输注RhC、E、c、e表型配合性相同红细胞悬液2 U,对照组输注RhC、E、c、e表型配合性不同红细胞悬液2 U。对照组中男50例，女55例，年龄4～77岁，平均(46.80±18.23)岁。观察组中男49例，女56例，年龄4～76岁，平均(49.30±15.68)岁。两组年龄、性别、红细胞输注量比较，差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。纳入标准：(1)有输血史或妊娠史；(2)输血前血红蛋白(Hb)水平<70 g/L或需输血的患者。排除标准：(1)消化道出血明显者；(2)有明显出血、手术、外伤者。210例输血患者均知情同意本研究并签署知情同意书。本研究通过本院医学伦理委员会审核批准(Z20210592)。

1.2 仪器与试剂

全自动血型分析仪SK-800型(中山市生科试剂仪器有限公司)及其原厂配套的ABO、Rh血型微柱凝胶卡；Aigel-100型血型仪(深圳市爱康生物科技股份有限公司);抗人球蛋白抗体筛选微柱凝胶卡试剂盒(上海润普生物技术有限公司);全自动血细胞分析器XN-9000(日本Sysmex公司);抗体筛选红细胞试剂盒(上海血液生物技术有限责任公司)。采用以上试剂进行不规则抗体的鉴定，根据谱细胞的反应格局对相应标本的抗体特异性进行判定。

1.3 方法

使用SK-800型血型分析仪对9 610例RhD阳性标本进行ABO和Rh血型抗原检测，读取、分析、储存检测结果；使用Aigel-100型血型仪检测两组不规则抗体。使用XN-9000型血细胞分析仪检测两组输血前后白细胞计数(WBC)、血小板计数(PLT)、Hb水平和红细胞压积(HCT)。所有操作均按照仪器使用说明书进行，并进行质控品检测。抗原频率=抗原阳性例数/总例数×100%。

1.4 评价指标

(1)输血效果：两组均输注去白细胞红细胞悬液2 U,检测两组输血前、后24～72 h的Hb水平、PLT、WBC及HCT;(2)输血后安全性：记录两组输注后红细胞输注有效率、不规则抗体阳性率及不良反应发生率。输注红细胞后24～72 h Hb水平升高情况不理想、无变化或降低为输注无效，输注2 U红细胞后 Hb水平升高5 g/L(以体质量为60 kg的成年人作为参照)为有效，输注2 U红细胞后Hb水平高于输注前，但其增加量低于5 g/L为部分有效[5],红细胞输注有效率=(有效例数+部分有效例数)/总例数×100%;不规则抗体阳性率=不规则抗体阳性例数/总例数×100%;不良反应发生率=不良反应发生例数/总例数×100%。

1.5 统计学处理

采用SPSS23.0统计软件进行数据处理与统计分析。符合正态分布的计量资料以x¯±s

表示，两组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1Rh血型D、C、E、c、e抗原分布情况

桂北地区RhD阳性率为99.64%(9 610/9 645)。9 610例RhD阳性血型主要抗原C、c、E、e的分布频率分别为94.09%(9 042/9 610)、41.43%(3 981/9 610)、33.04%(3 176/9 610)、96.44%(9 268/9 610)。

2.2Rh血型表型分布情况

9 610例RhD阳性标本中，有9种形式，其表型及分布频率分别为CCDee(57.76%,5 551/9 610)、CcDEe(26.56%,2 552/9 610)、CcDee(8.76%,842/9 610)、ccDEE(3.34%,321/9 610)、ccDEe(2.14%,206/9 610)、CCDEe(0.79%,76/9 610)、ccDee(0.43%,41/9 610)、CcDEE(0.20%,19/9 610)、CCDEE(0.02%,2/9 610)。

2.3 两组输血前后Hb水平、HCT、WBC及PLT比较

两组输血前Hb水平、HCT、WBC及PLT比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。两组输血后Hb水平、HCT均高于输血前，观察组输血后WBC低于输血前，差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组输血后 Hb水平、HCT均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组输血前后Hb水平、HCT、WBC及PLT比较(x¯±s)

2.4 两组输血后安全性比较

输血后两组红细胞输注有效率、不规则抗体阳性率及不良反应发生率比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组输血后安全性比较[n(%)]

3、讨论

近年来，随着我国输血技术的快速发展和相关法律法规的完善，输血安全性逐渐提高，临床上由ABO、RhD血型导致的输血不良反应已经大部分可以避免。Rh血型系统是人体最复杂的血型抗原系统，其免疫原性仅次于ABO血型系统。临床输血中产生的不规则抗体、迟发性溶血反应、输血无效、新生儿溶血病均与Rh血型系统密切相关[6,7]。因此，Rh血型系统检测及输血前相匹配输注显得尤为必要。本研究结果显示，桂北地区RhD阳性率为99.64%,与我国汉族人群RhD阳性率99.5%～99.8%分布特征相符合[8]。有研究显示，Rh血型系统抗原强弱的顺序为D>E>C>c>e,RhE抗原是该系统抗原强性仅次于RhD的抗原[9]。临床输注RhE、c阳性血制品时经刺激机体免疫反应产生抗E、抗c,易导致血管外溶血等输血不良反应，对机体产生损伤，严重时甚至会危及生命。鉴于我国E和c抗原频率分布阴、阳性接近的特点，对受血者抗原不清楚的情况下输血会导致Rhc、E受血者出现同种免疫的风险显著增加[10]。因此，需要在输血前明确RhC、E、c、e抗原。

本研究结果显示，9 610例RhD阳性标本中，表型有9种，其形式及分布频率分别为CCDee(57.76%,5 551/9 610)、CcDEe(26.56%,2 552/9 610)、CcDee(8.76%,842/9 610)、ccDEE(3.34%,321/9 610)、ccDEe(2.14%,206/9 610)、CCDEe(0.79%,76/9 610)、ccDee(0.43%,41/9 610)、CcDEE(0.20%,19/9 610)、CCDEE(0.02%,2/9 610)。与孙亚纯等[11]和马婷等[12]的报道一致，符合我国南方地区Rh血型分布特征。

本研究结果显示，两组输血前Hb水平、HCT、WBC及PLT比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。两组输血后Hb水平、HCT均高于输血前，观察组输血后WBC低于输血前，差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组输血后 Hb水平、HCT均高于对照组，差异均有统计学意义(P<0.05)。表明观察组RhC、c、E、e相配合性输注和对照组非匹配输注在输注红细胞不同方案与输注前后这两种因素之间存在交互作用，即RhC、c、E、e相配合性输注组的患者输血后Hb水平、HCT升高比RhC、c、E、e非配合组的患者输血后Hb水平、HCT升高更明显，WBC随输注红细胞变化不明显。输注红细胞悬液2 U两组红细胞输注有效率、不规则抗体阳性率及不良反应发生率比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。表明RhC、c、E、e相配合性输注具有良好的临床输注效果，具有安全、疗效显著、不良反应少等优势。与李莺等[13]和张鹏举等[14]Rh血型系统输注相关报道一致。

RhC、c、E、e抗原引起的抗体中，抗E最为多见，其次为抗c和抗cE抗体，且未实施Rh血型同型输注产生的意外抗体，其中Rh血型系统引起的抗体超过80.00%[15],而实施Rh血型同型输注配合率高达89.00%,随访多年的输血患者均未产生Rh系统抗体[16]。Rh表型配合性输注每1 U红细胞悬液的血红蛋白增长量优于非配合性输注，可以减少Rh抗原暴露的概率[17,18]。我国临床规定输血前要检测患者ABO、RhD血型，采用同型血制品进行输血治疗，但未要求RhC、c、E、e等Rh血型系统抗原检测，因此临床上随机RhC、c、E、e输注、输血次数及输血量增多是Rh系统抗体产生的影响因素[12,19]。有研究报道，患者和无偿献血者Rh系统5个抗原频率分布情况及表型分布特征趋势相一致[10,13]。CCee、CcEe、Ccee、CCEe 4种表型在库存中较容易找到相匹配的血制品[11]。因此，对患者和无偿献血者进行输血前Rh血型分型检测并选择相匹配输注十分必要，且具有重要理论和实践价值[20]。配合性Rh抗原表型输注去白细胞红细胞悬液产生迟发性免疫反应少，输入红细胞能有效发挥作用，使机体能很快正常运转，减少局部缺氧现象，及时维护内环境稳定。且其免疫内环境的稳定和平衡，能减少机体炎症因子的产生，平衡白细胞和血小板的数量，并达到趋于不激活的状态，及时回归正常水平，具备良好的效果。

本院从2020年至今，每天常规对无偿献血者和患者进行ABO、Rh抗原表型的检测，库存血制品按ABO型同型存放，在同一血型基础上再进一步按CCee、CcEe和其他3种情况归类，在血袋上并标注Rh表型便于配血时核实。对于有妊娠史、输血史和多次输血史的患者优先满足Rh表型同型输注，如血制品不足或稀有表型时，寻找找相近或没有相应抗原的血制品配合性输注，以减少因Rh血型表型不同引起免疫性抗体，保证患者输血安全、输注效果和减少输血不良反应。

综上所述，更大范围内推进RhC、c、E、e抗原配合性输注，对减少患者Rh血型系统的抗体产生和提高输血安全疗效具有重要价值。

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基金资助:广西壮族自治区卫生健康委员会自筹经费科研课题(Z20210592);

文章来源:张国光,容海燕,黎夏婷,等.桂北地区Rh血型系统分布及Rh分型配合性输注的临床应用价值[J].检验医学与临床,2024,21(13):1950-1954.