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免疫组化染色对病理技术质量控制的影响分析

2023-09-13 103 上传者：管理员

摘要：目的探究免疫组化染色对病理技术质量控制的影响。方法选择接受病理检验的患者400例，随机分为研究组和对照组，各200例。研究组采取免疫组化染色，对照组实施常规HE染色，比较两组染色结果。结果研究组优良率、确诊率均显著高于对照组(P<0.05);研究组试剂质量、取材质量、染色质量、切片质量评分均高于对照组(P<0.05)。结论免疫组化染色的效果更为理想，不仅能够提升病理技术质量水平，同时增加确诊率，值得推广。

关键词：
HE染色
免疫学
免疫组化染色
病理技术
质量控制
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病理技术作为病理检验的重要部分，能够判断肿瘤疾病的类型及良恶性，但检验期间，任一环节失误，即可导致切片质量下降，甚至增加误诊漏诊情况，使患者错失最佳治疗时机，故不断加强对病灶组织的切片质量，在提升病理技术质量及确诊率上具有重要作用[1]。以往，临床多选择常规HE染色，虽然能够对样本进行染色处理，但其染色效果不佳，无法保证病理检验结果的准确性[2]。随着临床技术的不断进步，发现免疫组化染色的效果更好，其主要基于二抗体结合酶聚合物上，通过多聚螯合物与抗体发生结合反应，进一步扩大了抗原抗体的信号，显著增加染色效果，同时提升切片成功率与疾病确诊率，为患者后续诊疗方案的拟定提供参考[3]。本文就此进行比较，选择在我院接受病理检验的患者400例，观察免疫组化染色与常规HE染色的效果，现报告如下。

1、资料与方法

1.1一般资料

选择2020年1月至2022年8月在我院接受病理检验的患者400例，分为研究组和对照组，各200例。研究组男116例，女84例；年龄31～58岁，平均(44.56±3.81)岁；肝内胆管细胞癌34例，血管瘤48例，滤泡数突细胞肉瘤30例，转移性恶性肿瘤27例，其他61例。对照组男105例，女95例；年龄34～60岁，平均(44.91±3.26)岁；肝内胆管细胞癌38例，血管瘤42例，滤泡数突细胞肉瘤40例，转移性恶性肿瘤25例，其他55例。纳入标准[4]:符合临床诊断标准，在我院接受病理检查；患者及亲属签订同意书，知晓此次试验的流程；病历资料完整，并无缺项。排除标准：存在病理检验禁忌症；存在远处转移浸润；应激反应较强，无法配合检查；精神疾病、认知障碍。两组一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2方法

对照组：选择常规HE染色，将穿刺获得的标本放在中性甲醛内，固定4 h,使用AF液浸泡，1 h后通过乙醇浸泡，分别选择80%、90%、95%、100%浓度的乙醇浸泡1 h,再次对样本进行二甲苯I、II浸泡，时间分别控制在20 min、30 min,使用醋缸I、II分别浸泡1 h,调整醋缸及烤箱温度，控制在60℃,对样本进行烤片处理。研究组：选择免疫组化染色，对样本进行持续不间断的切片，常规脱蜡至水，在烧杯内倒入700 mL EDTA修复液，煮沸后放入样本切片，加热20 min,等待其冷却，后浸泡于双氧水内，10 min后选择PBS冲洗3次，并给予一抗处理，置于37℃1 h,再次对切片进行PBS冲洗3次，给予二抗，置于常温下孵育，再次选择PBS冲洗3次，DAB显色，并通过苏木精染色，100%酒精脱水，树胶封固。

1.3观察指标

评价两组切片质量的优良率[5];统计两组疾病的确诊率；评价两组病理检验的质量，内容涉及试剂质量、取材质量、染色质量、切片质量四项，分值越高质量越好。

1.4统计学方法

采用SPSS 20.0软件处理数据，计量资料表示为(x−±s),采用t检验；计数资料表示为%,采用χ2检验；以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1两组切片质量的优良率比较

研究组优88例、良96例、差16例，优良率为92.00%;对照组优79例、良91例、差30例，优良率为85.00%。研究组优良率高于对照组(χ2=4.815,P<0.05)。

2.2两组确诊率比较

研究组确诊率96.50%(193/200)高于对照组91.50%(183/200)(χ2=4.433,P<0.05)。2.3两组病理检验质量对比研究组试剂质量、取材质量、染色质量、切片质量评分均较对照组更高(t=9.348、8.838、6.144、23.517,P<0.05)。见表1。

表1两组病理检验的质量对比[(x−±s),分，n=200]

3、讨论

经分析发现，免疫组化环境内，取材较为关键，一旦得到病变组织后，若无法保障组织厚度一致，或者病变组织已经出现变性或者坏死的现象，均可直接降低制片质量；另外标本的存放也可影响制片质量，若保存期间被污染，也可影响制片质量；加上工作人员针对标本的描述过度粗略或者对标本组织部位的介绍及描述存在较大差别，也可对切片质量造成一定干扰，因此保证病理技术质量水平成为关键[6]。临床通过对组织切片的问题进行不断分析，发现后期固定能够有效保存新鲜组织原本的细胞形态特征，若未及时采取有效固定，组织可能出现自溶，故此，手术结束后得到的组织标本应尽早置于固定液内，使其充分固定，对于小样本固定时间可控制在4～6 h,而大样本固定时间则为18～24 h。另外，临床又对免疫组化试剂进行分析，发现染色期间需要一组良好的染色试剂，其直接影响染色效果，且脱蜡、浸水、脱水、酒精等试剂均需及时补充，且各类试剂的质量是否稳定也可对病理诊断结果造成干扰。例如，试剂使用期间保存不当，可造成挥发，直接降低其纯度；或者长时间未使用试剂后未进行更新，也未及时补充缺漏的试剂，从而耽误切片工作，进而降低组织切片的质量，最终对诊断结果造成一定影响。针对此，临床工作中需及时检查并更换试剂，并严格把关试剂采购、使用及管理中各个环节，为提升切片质量提供保障。

本文结果显示，研究组优良率92.00%较对照组85.00%更高(P<0.05);且确诊率96.50%也高出对照组91.50%(P<0.05);研究组试剂质量、取材质量、染色质量、切片质量评分均较对照组更高(P<0.05)。提示免疫组化染色可显著增加切片质量，使患者确诊率升高，同时提升病理技术质量水平。由于免疫组化染色中包含了多种技术，主要通过多重浸泡及冲洗，可有效保证切片组织的稳定性，并为衬染顺利完成提供前提，此外，操作期间需要工作人员保持耐心，各个环节严格遵守时间及冲洗次数的要求，同时免疫组化染色加强了技术层面，有效提升切片制作及使用效果，使其更加符合要求，防止切片问题产生[7]。除此之外，免疫组化染色通过技术保证切片固定、组织活性及形态等，真实反映出切片组织的特征，有效提升了切片组织的抗体明显度，加上病理检验针对切片进行仔细观察，检查切片组织的抗体情况，标记临床需要的数据，为临床确诊提供参考依据[8]。由此可见，与常规HE染色相比，免疫组化染色效果更好，但其中任一环节都可导致制片质量问题，需引起临床重视，加强对不同制片环节的管理力度，避免取材、切片、试剂或者染色等步骤出现问题，进而影响诊断结果，在增加病理技术质量水平及确诊率上具有积极作用。

参考文献:

[1]孙志明,朱君.肝脏穿刺组织病理检查使用免疫组化检验技术对提高确诊率的价值解析[J].医药论坛杂志,2022,43(17):43-45.

[2]高丽丽,李青.p16/K-67手工染色与全自动免疫组化仪染色效果对比[J].临床与实验病理学杂志,2022,38(1):113-114.

[3]张娅,李传应,陈晶晶,等.两种不同免疫组化染色平台TDT及CD10染色效果评价[J].临床与实验病理学杂志,2020,36(3):363-364.

[4]陈敬信,王小玲.IRMA及SP免疫组化染色检测在结肠癌诊断中的意义[J].贵州医药,2022,46(12):1940-1941.

[5]郑波,邹霜梅,杨琳,等.直接免疫组织化学染色在术中冷冻切片细支气管腺瘤辅助诊断中的应用价值[J]中华病理学杂志,2023.52(2)142-146.

[6]王双珠,王敏.细胞块切片与常规细胞涂片免疫组化染色在胸腔积液病诊断中的价值[J].临床与实验病理学杂志,2020.36(2)231-232.

文章来源:王晓宝,巨宏亚,孙璐瑛等.免疫组化染色对病理技术质量控制的影响分析[J].贵州医药,2023,47(09):1461-1463.