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自身免疫性溶血性贫血患者意外抗体类型与输血疗效相关性分析

2024-05-28 38 上传者：管理员

摘要：目的分析广州地区AIHA患者抗体类型并跟踪输血疗效，为AIHA患者临床输血治疗策略提供参考依据。方法在2021年1月—2023年10月本地区医院输血科(血库)送检至本站的96份疑难交叉配血标本分析鉴定出25份AIHA患者标本，再对其进行血型鉴定、Rh系统的抗原表型分型、抗体筛查及交叉配血，分析AIHA患者抗体类型与输血疗效的相关性。结果 25份AIHA患者标本中，ABO正反定型相符17份，8份正反定型不符。主侧配血不相合19(19/25,76%)份，其中直接Coombs试验阳性+自身抗体阳性+无特异性抗体阳性18(18/19,94.7%)份；自身抗体+同种抗体阳性1(1/19,5.3%)份。主侧配血相合6(6/25,24%)份，其中自身抗体阳性3(3/6,50%)份；自身抗体+同种抗体阳性3(3/6,50%)份。25名AIHA患者中20名患者有输血治疗并能追踪到输血疗效，5名患者没有输血治疗或转院而无法追踪。输血有效11(11/20,55%)例；输血部分有效6(6/20,30%)例；输血无效3(3/20,15%)例。配血不合病例中，输血有效或部分有效17(17/20,85%)例。结论 AIHA患者的输血疗效与交叉配血结果并无直接联系，在调节干预自身免疫内环境并排除同种意外抗体导致的配血不相合前提下，配血不合的AIHA患者在充分权衡利弊的情况下，必要时可输血，选择ABO、Rh系统抗原同型血液，可提高输血安全性和有效率。

关键词：
AIHA
交叉配血
意外抗体
自身免疫性溶血性贫血
输血疗效
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自身免疫性溶血性贫血(autoimmune hemolytic anemia, AIHA)是由于机体免疫功能紊乱、产生自身抗体、导致红细胞破坏加速(溶血)超过骨髓代偿时发生的贫血[1]。AIHA大多起病缓慢，但多数会因溶血而导致严重贫血，AIHA患者往往需要输血治疗。由于AIHA患者的免疫血清学特点较为复杂，难以找到血清学相合的血液输注，输血前交叉配血不合或输血后贫血反而加重，甚至危及患者的生命[2]。我们通过分析AIHA患者抗体类型与输血疗效的关系，为该类患者临床输血策略提供参考依据。

1、对象与方法

1.1 研究对象

2021年1月—2023年10月本地区医院输血科(血库)送检至本站输血研究室的AIHA患者标本25份，每份标本2管，1支干燥管(用于酸放散实验)和1支EDTA抗凝管(用于热放散实验)。

1.2 试剂与仪器

单克隆抗-A、抗-B(批号：20200609、20201119、20210302、20210608)、单克隆抗-C(批号：20193001、2021002),单克隆抗-c(批号：20193101、20213002)、单克隆IgG抗-D(批号：20190826、20210401、20211115)、单克隆IgM抗-D(批号：20201809、20213101),以上试剂均为上海血液生物公司产品；IgM+IgG抗-D(MILLIPORE公司，批号：BME1903A、BME1906B、BMB2002A);抗体鉴定谱细胞(批号：20210903、20211102、20220216、20220506、20220714、20221018)、抗体筛选细胞(批号：20220325、20220701)、ABO反定型红细胞(批号：01220601)、酸放散液(批号：20212101、20222101),以上试剂均为广东营安生物公司产品；抗体筛选细胞(批号：20217015、20217056、20217064、20227016、20227053)、抗体鉴定谱细胞(批号：20210329)、ABO反定型红细胞(20215313、20215341、20215351、20225301、20225313、20225346)、多特异性抗-IgG,C3d(批号：20195002、20205001)、单克隆IgM抗-E(批号：20193202、20203202、20213201)、单克隆IgM抗-e(批号：20193301、20203301、20223301),以上试剂均为上海血液生物公司产品；凝聚胺介质(珠海贝索公司，批号：A191101、A200802、A211002)。TD-3A血型血清学专用离心机(长春博研公司);KA-2200免疫血液学专用离心机(久保田公司);DKZ-2电热恒温水浴箱(上海精宏实验设备公司)、JUL9B0 ShakeTemp恒温振荡水浴箱(Julabo公司)。

1.3 方法

1.3.1 ABO血型鉴定

采用试管法做正定型和反定型试验，试验均按照单克隆抗-A、抗-B、ABO反定型红细胞试剂说明书操作。

1.3.2 Rh系统分型试验

抗-C、抗-c、IgG抗-D、IgM抗-D、IgM抗-E、IgM抗-e、IgM+IgG抗-D检测按试剂说明书方法进行试验。

1.3.3 直接Coombs试验

取患者标本的红细胞用生理盐水洗涤3～5次，然后用洗涤后的红细胞配制成浓度为3%～5%的红细胞悬液。用多特异性抗-IgG、C3d试剂与患者红细胞悬液做直接Coombs试验，抗-IgG试剂和抗-C3d试剂分别与患者红细胞悬液混合离心、观察结果。

1.3.4 抗体筛查与鉴定试验

试验按照说明书方法进行，经过1次离心、2次离心、放置4℃ 5 min环境下后离心观察结果，然后做间接抗人球蛋白试验或用凝聚胺试剂进行试验。

1.3.5 交叉配血试验

以供者血红细胞和患者的血清(或血浆)作为主侧，用盐水法、间接抗人球蛋白试验和(或)凝聚胺试验进行配血，配血同时做自身对照试验。

1.4 输血治疗

患者输注4 U洗涤红细胞，在输血治疗后24 h检测Hb改善情况和观察临床症状，疗效判断标准：Hb≥16 g/L即临床贫血症状消失视为有效；Hb为5～10 g/L即贫血症状缓解视为部分有效；Hb≤5 g/L即贫血症状未改善或加重视为无效。[5]

2、结果

2.1 AIHA患者标本ABO血型正反定型结果

25份AIHA患者标本中ABO正反定型相符17份(68%),正反定型不符8例份(32%)。

2.2 AIHA患者标本抗体筛查与鉴定结果

AIHA患者标本抗体筛查与鉴定结果见表1, Rh分型、直接Coombs试验、与Rh系统相关的抗体类型、20例输血疗效相关性结果分析见表2。

表1 AIHA患者标本Rh血型抗体筛查与鉴定结果

表2 AIHA患者Rh分型、直接Coombs试验、与Rh系统相关的抗体类型、20例输血疗效相关性结果分析

2.3 直接Coombs试验结果

25份AIHA患者标本直接Coombs试验阳性22份，其中抗-C3d+抗-IgG阳性16(72.8%)份，单抗-C3d阳性3(13.6%)份，单抗-IgG阳性3(13.6%)份。

2.4 交叉配血结果

25份AIHA患者标本中主侧配血相合6(6/25,24%)份，不相合19(19/25,76%)份。主侧配血相合：3(3/6,50%)份为自身抗体阳性，抗体筛查阴性，直接Coombs试验阳性，供血者Rh系统的抗原表型与患者相同；3(3/6,50%)份为直接Coombs试验阴性，体内存在同种抗体。主侧配血不相合：18(18/19,94.7%)份为直接Coombs试验阳性，自身抗体阳性，存在无特异性的抗体；1(1/19,5.3%)份为自身抗体+同种抗体阳性。

2.5 输血治疗的疗效

25名AIHA患者中有5名因没有进行输血治疗或转院而无法追踪，其余20名进行了输血治疗并追踪到输血后的实验室数据，其中配血不合共有14例，输血有效或部分有效占85%,见表3。

表3 20例AIHA患者的交叉配血试验结果、配血情况及输血疗效

3、讨论

AIHA患者的发病机制至今还没有明确，现普遍认为是与自身免疫功能紊乱、红细胞膜蛋白成分异常、遗传等因素有关。AIHA患者治疗的首要是控制自身原发病，一般不需要或不建议输血，但这类患者往往因为患有严重贫血而需要输血治疗，且反复输血的情况也不少见[3,4,5,6]。AIHA患者输血问题较为复杂并有输血免疫学风险的特征，所以AIHA患者输血治疗具有较高风险[7,8]。

我们通过对AIHA患者抗体筛查与交叉配血试验结果与输血疗效关联性进行分析，发现抗体筛查结果与配血结果、输血疗效并无直接联系。14例自身抗体+无特异性抗体的AIHA患者配血不相合，选择与Rh系统抗原同型的供血者配血，给予与配血试验中凝集强度最弱的血液输注，输血有效和部分有效达到78.6%(11/14)。5例自身抗体+同种抗体+特异性同种抗体的AIHA患者中有4例为Rh血型抗体。绝大部份的类抗体和同种抗体都是Rh血型系统，对AIHA患者进行Rh抗原分型有助于这类抗体鉴定[9]。通过交叉配血，选择Rh同型血液输血，可以提高输血有效率。3例自身抗体+同种抗体+无特异性同种抗体的AIHA患者输血无效，甚至临床症状更差。这类患者的发病原因不明确，体内的自身抗体使病情加快发展，细胞凝集强度很高甚至溶血，这使得血型鉴定(包括RhD抗原分型)、抗体筛查和鉴定的难度极高[10]。这类患者更容易增加输血反应的机率，因此不建议输血治疗，而选择药物干预等手段。本研究因病例数量较少，无法判断输血治疗的同时使用抗免疫药物或激素类的药物对最终疗效有无影响，还需进一步探究。

综上所述，针对AIHA患者，在调节干预自身免疫内环境并排除同种意外抗体的配血不相合情况下，应充分权衡利弊，必要时选择ABO、Rh系统抗原同型血液输注，可提高输血安全性和有效率。

参考文献:

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[2]张联博,李欣,田勇.自身免疫性溶血性贫血输血治疗方案回顾性分析[J].哈尔滨医科大学学报,2022,56(1):76-79.

[3]王娟,王文婷,胡兴斌,等.AIHA患者红细胞不相容输注疗效分析[J].临床血液学,2021,34(10):737-739.

[4]杨茹,罗燕平,何欣.自身免疫性溶血性患者自身抗体合并抗-Wr~A1例[J].中国输血杂志,2019,32(7):718-720.

[6]刘力铭.输血科152例自身免疫性溶血性贫血患者不规则抗体筛查结果分析[J].医学理论与实践,2021,34(15):2690-2692.

[7]兰炯采.加强对自身免疫性溶血性贫血输血前试验的研究[J].中国输血杂志,2012,25(4):295-296.

[8]上海市医学会输血专科分会,上海市输血质量控制中心.自身免疫性溶血性贫血患者输血前试验及临床输血专家共识[J].中国输血杂志,2017,30(7):663-664.

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基金资助:番禺区科技计划项目(预立项目:2021-Z04-076);