首页 > 论文范文 > 农业科技论文 > 畜牧综合论文 > 兽医学论文 > 河南省奶牛布鲁氏菌病流行率及传播风险因素分析

河南省奶牛布鲁氏菌病流行率及传播风险因素分析

2020-12-04 120 上传者：管理员

摘要：为估算河南省平顶山市奶牛布鲁氏菌病的流行率，分析可能的场间传播风险因素，对该地区68个奶牛养殖场（户）进行流行病学调查。采用虎红平板凝集和试管凝集试验垂直检测方法，估计的奶牛布鲁氏菌病群体表观流行率（AP）为11.76%，个体AP为2.22%（95%CI,1.97%2.49%），真实表观流行率（TP）为0.28%（95%CI,0.12%0.50%）。Logistic回归分析表明，场区没有有效隔离、不能自繁自养、调入奶牛没有隔离栏舍是奶牛布鲁氏菌病场间传播的潜在风险因素。建立的回归模型拟合度较好（P=0.05）,ROC曲线面积为0.871（95%CI,0.8170.964），预测概率较好。结果表明，平顶山市奶牛布鲁氏菌病流行率较低，整体控制效果良好，但存在一些潜在场间传播风险因素，需要加强防范，并应持续开展净化工作。本研究可为该地区奶牛布鲁氏菌病防控策略改进及净化示范区工作推进提供数据支持。

关键词：
奶牛
布鲁氏菌病
横断面研究
流行率
风险因素
加入收藏

布鲁氏菌病（brucellosis）是由布鲁氏菌属（Brucella）细菌引起的一种慢性多器官损伤性传染病，为世界上分布最广泛的人兽共患病之一，临床以生殖器官和胎膜发炎，母畜流产、乳腺炎、不育和各种组织（如睾丸、关节）炎症为主[1,2]。布鲁氏菌主要引起牛、羊、猪、鹿、犬等哺乳动物和人类患病，包括6个种19个生物型。动物布鲁氏菌病主要由羊种、牛种和猪种布鲁氏菌感染引起，对人类健康和畜牧业发展影响严重，为此世界动物卫生组织将其列为须通报动物疫病，我国将其列为二类动物疫病[3,4]。

平顶山市位于河南省中南部，奶牛养殖规模化程度高，存栏100头以上的养殖场有14家，分布在叶县、郏县、鲁山县、宝丰县，其中存栏1000头以上的5家，其余9家存栏100～500头，小奶牛场及散养户逐渐退出。目前，河南省布鲁氏菌病的免疫政策是，对种畜和奶畜不免疫，对其他畜种实行全面免疫，做到应免尽免，所有畜间布鲁氏菌病免疫场群全部建立免疫档案。但平顶山市计划建立奶牛“两病”净化示范区，对奶畜不进行布鲁氏菌病免疫。因此，研究平顶山市奶牛布鲁氏菌病场群流行率及场间传播风险因素具有重要意义。本研究以平顶山市所有奶牛为目标群，采用横断面研究方法，估计平顶山市奶牛布鲁氏菌病场群流行率和个体流行率，同时分析场间传播的可能风险因素，以期为该市推进奶牛布鲁氏菌病净化示范区工作提供建议。

1、材料与方法

1.1目标群与抽样策略

2019年平顶山市共有68个奶牛养殖场（户），存栏13811头奶牛。本研究目标群是平顶山市所有奶牛养殖场。鉴于平顶山市奶牛养殖在全省的净化示范作用，以其所有奶牛养殖场（户）允许采集样品的奶牛为研究对象，最终采集12755份样品。

1.2样本收集及实验室检测

按照抽样策略采集样品，分离血清后，按照虎红平板凝集试验方法进行检测；对检测阳性场（户）内所有奶牛，采用试管凝集试验进行复检。虎红平板和试管凝集试验，均按照GB/T18646—2018[5]方法进行。

1.3病例定义

个体水平：采用垂直检测方法（虎红平板凝集+试管凝集），检测为阳性的动物。

场群水平：场内有1只及以上阳性个体的场群为阳性场，无阳性个体的为阴性场；1个村的所有养殖户作为1个场群。

1.4问卷调查

以场（户）为单位，采用问卷调查方式，了解平顶山市奶牛布鲁氏菌病场间传播风险因素。调查问卷涵盖布鲁氏菌病相关的所有风险因素，包括结构布局、人员管理、饲养情况、生物安全、防疫管理、监测、临床症状等。

1.5数据收集及分析

将实验室检测和问卷调查结果录入Excel软件，获取风险因素分析相关数据，计算并描述布鲁氏菌病场间传播风险因素；应用SPSS和Epiinfo软件，对收集的数据进行统计学分析。

1.6敏感性和特异性计算

根据布鲁氏菌病检测方法有关研究[6]，设定虎红平板凝集试验敏感性（Se）和特异性（Sp）分别为：Se1=95%,Sp1=80%；试管凝集试验分别为：Se2=85%,Sp2=90%。根据公式Se=Se1×Se2,Sp=1-(1-Sp1)(1-Sp2)[7]，计算出垂直检测Se=81%,Sp=98%。

1.7流行率计算

表观流行率（AP）=检测阳性数量/检测总数；真实流行率（TP)=(AP+Sp-1）/（Se+Sp-1);95%置信区间：95%CI=p±Z[p(1-p）/n]1/2。式中，p为流行率，Z为标准正态分布中概率为0.05所对应的值，n为抽样数量[8]。

2、结果与分析

2.1流行率

本研究对平顶山市有奶牛养殖的8个县（区）全部的68个奶牛养殖场（户）所养奶牛进行抽样，共采集血清样品12755份进行布鲁氏菌病检测。根据检测结果，计算出平顶山市奶牛布鲁氏菌病个体AP为2.22%(95%CI,1.97%～2.49%),TP为0.28%(95%CI,0.12%～0.50%）；检出阳性场群6个（阳性场/户23个，1个村的所有散养户作为1个场群），AP为11.76%（因奶牛养殖场/村抽样量不同，HSe、HSp不确定，无法计算群体TP）。具体结果见表1。

表1平顶山市各区（县）奶牛布鲁氏菌病流行率

注：计算场群流行率时，1个村的所有散养户作为1个场群。

2.2阳性场（户）空间分布

平顶山市8个奶牛养殖区（县）中，舞钢市、卫东区及叶县没有发现布鲁氏菌病，其他5个区（县）均有阳性场（户）检出，场群阳性率为8.33%～33.33%，主要分布在平顶山市北部和西部区域（图1）。

图1平顶山市奶牛布鲁氏菌病地理分布

2.3风险因素

2.3.1单因素风险因素

采用横断面研究方法，对68个场（户）进行流行病学问卷调查，共涉及与奶牛布鲁氏菌病场间传播有密切关系的14项风险因素。调查问卷中，养殖模式、病死牛无害化处理、购买精液/供体牛进行布鲁氏菌病检测并确定为阴性，数据一致度高，不能进行单因素分析。单因素分析结果（表2）显示，场区未有效隔离、没有独立TMR（全日粮）搅拌机、不能自繁自养、调入奶牛没有隔离栏舍、场区入口无有效消毒设施、允许经纪人进入生产区等6个因素具有统计学意义（P<0.05），与平顶山市奶牛布鲁氏菌病发生存在关联。

2.3.2多因素风险因素

按照Logistic回归的流程和方法进行多因素分析[9]。结果（表3）显示，场区没有有效隔离、不能自繁自养、调入奶牛没有隔离栏舍在病例组和对照组之间差异显著（P<0.05），是平顶山市布鲁氏菌病传播的主要风险因素。模型的回归方程logit(P)=-7.567+2.550X1+2.556X2+1.704X3。经HosmerLemeshow检验，该模型拟合较好（P>0.05），曲线下面积为0.871(95%CI,0.817～0.964）。模型的ROC曲线见图2。

表2平顶山市奶牛布鲁氏菌病单因素风险分析结果

表3平顶山市奶牛布鲁氏菌病多因素风险分析结果

3、讨论

平顶山市奶牛养殖规模化程度高，生物安全措施较完善，养殖模式单一，对奶畜不进行布鲁氏菌病免疫。往年的监测结果显示，平顶山市奶牛布鲁氏菌病场群流行率和个体流行率均不高，加上其特殊的养殖环境，符合建设奶牛布鲁氏菌病净化示范区的条件，因此选择平顶山市进行河南省奶牛“两病”净化示范区项目建设。为了解真实情况，推进项目开展，本研究以平顶山市所有奶牛养殖场（户）和3月龄以上未怀孕奶牛为研究对象进行横断面研究，得到平顶山市奶牛布鲁氏菌病的流行率及场间传播可能的风险因素。

图2奶牛布鲁氏菌病风险因素Logistic回归模型的ROC曲线

目前，虎红平板凝集试验及试管凝集试验依然是奶牛布鲁氏菌病检测的国际通用方法，但其敏感性不高，并不是最佳方法[6]。ELISA检测方法也被广泛应用于奶牛布鲁氏菌病检测，敏感性高，但其稳定性不够好，易出现血清交叉问题[10,11]。因此，诊断试验方法的缺乏也提升了奶牛布鲁氏菌病防控难度。对于个体流行率方面，本研究采用虎红平板凝集及试管凝集试验垂直检测的方法，试验特异性可达98%，阳性预测值为47.9%，阴性预测值为99.6%，假阳性率较高，这会极大提升错杀率。同时，由于流行率及试验敏感性不高，根据检测结果得出的个体AP和TP分别为2.22%和0.28%，两者差别较大。本研究将场（户）检测结果与空间地理分析（GIS）相结合，分析阳性场（户）在平顶山市的地理分布情况，发现阳性场（户）分布比较分散，在8个有奶牛养殖的县（区）中，5个县（区）出现布鲁氏菌病检测阳性场（户），包括湛河区2个养殖户，汝州市、宝丰县、鲁山县、郏县各1个养殖场。存在布鲁氏菌病检测阳性县（区）的场群阳性率差别较大，最高为33.33%，最低为8.33%，同时个体阳性率与场群阳性率之间存在差异。

本研究共对68个场（户）进行了问卷调查，根据病例定义，确定病例组和对照组数量，分析了奶牛养殖场（户）间布鲁氏菌病流行的风险因素。单因素风险因素分析结果表明，场区没有有效隔离、没有独立TMR（全日粮）搅拌机、不能自繁自养、调入奶牛没有隔离栏舍、场区入口无有效消毒设施、允许经纪人进入生产区等6个因素具有统计学意义（P<0.05），与平顶山市奶牛布鲁氏菌病发生存在关联。通过建立平顶山市奶牛布鲁氏菌病发生的Logistic回归模型，发现场区没有有效隔离、调入奶牛没有隔离栏舍、不进行自繁自养为主要风险因素（P<0.05）。该模型可以对87.1%(95%CI,0.817～0.964）的场（户）进行解释。国内外相关文献[2,12,13]报道，存栏量为1～10头、从经纪人那里购买种畜、在奶牛集中村中养殖、没有专用的犊牛产房、最近12个月内出现流产等均为风险因素。而本研究发现，做不到场区有效隔离、自繁自养，无调入奶牛隔离栏舍为主要风险因素，这与本地区的生产实际相符合。

本研究采用虎红平板凝集及试管凝集试验垂直检测的方法进行样品检测，由于个体流行率不高，导致阳性预测值较低，假阳性率高。但受客观因素影响，目前只能采用此种方法进行检测；问卷调查发现，养殖模式、病死牛无害化处理、购买精液/供体牛进行布鲁氏菌病检测并确定为阴性等因素与奶牛布鲁氏菌病传播密切相关，数据一致度高，这可能与当地奶牛养殖规模化程度高，统一进行无害化处理相关。

根据研究结果，建议平顶山市所有奶牛养殖场严格按照要求建立有效隔离带，场区位置要与主要交通干道、居民生活区、屠宰场、交易市场有效隔离，同时积极推进散户奶牛养殖退出工作，或者建立集中养殖小区；养殖场必须坚持自繁自养；所有奶牛养殖场要建立病牛、新调入奶牛隔离栏舍。

5、结论

研究发现：平顶山市奶牛布鲁氏菌病流行率较低，整体控制效果良好，但存在场区没有有效隔离、不能自繁自养、调入奶牛没有隔离栏舍等奶牛布鲁氏菌病场间传播潜在风险因素。因此，应消除这些潜在传播风险因素，持续推进奶牛布鲁氏菌病净化示范区建设。

参考文献：

[1]闫建超.布鲁氏菌病流行特征综述[J].临床医药文献电子杂志,2019,6(29):183-184.

[3]高莎莎.布鲁氏菌病实验室诊断方法的研究进展[J].山东畜牧兽医,2019,40(9):69-73.

[5]国家质量监督检验检疫总局.动物布鲁氏菌病诊断技术:GB/T18646—2018[S].北京:中国标准出版社,2002.

[7]黄保续.兽医流行病学[M].北京:中国农业出版社,2010.

[8]沈朝建,王幼明.兽医流行病学调查与监测[M].北京:中国农业出版社,2013.

[9]宇传华.SPASS与统计分析[M].北京:电子工业出版社,2006.

[10]吴星星,李爱巧,程维疆.动物布鲁氏菌病5种血清学检测方法的应用比较和分析评价[J].草食家畜,2020(2):56-60.

[11]吴星星,李爱巧,杨启元,等.布鲁氏菌病诊断方法的研究进展[J].新疆畜牧业,2013(1):16-20.