摘要:目的 探讨慢性牙周炎患者口腔菌群改变情况,并分析其与血清维生素D水平的关系。方法 选取本院收治的100例慢性牙周炎患者作为研究组,并选取同期100名健康体检者作为对照组。检测并比较两组受试者口腔菌群与血清维生素D水平。根据血清25羟基维生素D3[25(OH)D3]水平将患者进一步分为维生素D正常组(n=49)、维生素D不足组(n=31)与维生素D缺乏组(n=20)。比较三组患者口腔菌群,并应用Pearson法分析慢性牙周炎患者口腔菌群改变与血清维生素D水平的关系。结果 研究组口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌相对含量以及Shahnon指数均高于对照组(P<0.05),口腔乳杆菌相对含量、25(OH)D3水平低于对照组(P<0.05);口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌相对含量以及Shahnon指数在维生素D缺乏组、维生素D不足组、维生素D正常组依次降低(P<0.05),口腔乳杆菌相对含量则依次升高(P<0.05);慢性牙周炎患者口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌、Shahnon指数均与25(OH)D3呈负相关(P<0.05),口腔乳杆菌则与25(OH)D3呈正相关(P<0.05)。结论 慢性牙周炎患者口腔菌群失调,且口腔菌群改变与血清维生素D水平有关。
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慢性牙周炎是临床常见口腔疾病之一,多是由牙结石、牙菌斑等局部因素引起的牙周支持组织破坏的慢性炎症性疾病[1]。人体口腔菌群处于动态平衡状态,可以阻止外源致病菌的入侵,发挥生理性屏障的作用。但随着平衡被打破,会引起牙周炎等口腔疾病,且当口腔菌群及其代谢产物进入血液循环系统时,更会引起全身性系统疾病,影响患者治疗效果和预后[2]。研究[3]发现,口腔菌群失调是影响牙周炎发生的关键因素,且维生素D水平降低与牙周炎、牙龈炎等牙周病的发病存在一定关系[4]。25羟基维生素D3[25(OH)D3]是维生素D在体内经肾脏代谢分解的活性成分,具有抗炎、平衡代谢的作用[5]。基于此,本研究探究慢性牙周炎患者口腔菌群变化情况,并分析其与血清维生素D水平的关系,以期为临床治疗提供借鉴。
1、资料与方法
1.1一般资料选取2021年6月至2023年8月本院收治的100例慢性牙周炎患者作为研究组,并选取同期100名健康体检者作为对照组。研究组中男56例、女44例;年龄(52.02±5.22)岁。对照组中男52例、女48例;年龄(52.89±5.47)岁。另根据相关文献[6],将100例慢性牙周炎患者根据25(OH)D3水平进行亚组分组,其中25(OH)D3≥50nmol/L(20ng/mL)者归为正常组(n=49),30nmol/L≤25(OH)D3<50nmol/L(20ng/mL)者归为不足组(n=31),25(OH)D3<30nmol/L(12ng/mL)者归为缺乏组(n=20)。纳入标准:(1)研究组符合慢性牙周炎相关诊断标准[7];(2)对照组为体检正常、无口腔疾病的健康人群;(3)口内余留牙>20颗,每个区均留有牙,且至少有一个位点探诊深度超过5mm。排除标准:(1)6个月内有牙周病治疗史,近3个月使用抗菌漱口液;(2)妊娠期妇女;(3)合并恶性肿瘤、自身免疫性疾病;(4)近3个月内行免疫抑制剂或抗生素等进行治疗者;(5)系统性炎症疾病、肝肾损伤或外伤者;(6)伴有血液系统疾病;(7)口服维生素D者;(8)月经期女性;(9)种植牙、佩戴义齿者;(10)既往维生素D缺乏症、维生素D缺乏性佝偻病。两组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。
1.2方法(1)口腔菌群检测:清晨统一使用饮用水漱口,清洁口腔杂物,做咀嚼动作刺激唾液腺分泌唾液,以一次性无菌管收集唾液标本3mL,放于无菌洁净玻璃器皿,用无菌移液器分装500μL于无菌EP管中,置于4℃冰箱保存备用。所有受试者采集样本前2h避免饮食、刷牙以及使用牙线。使用DNA提取试剂盒对唾液标本中DNA进行提取和纯化,使用Nanodrop2000超微量分光光度计对DNA纯度和浓度进行检测,将合格的唾液DNA标本进行PCR扩增,采用16SrRNA可变区(V3-V4)引物进行扩增,上游引物:5’-ACTCCTACGGGAGGCAGCAG-3’,下游引物:5’-GGACTACHBGGGTWTCTAAT-3’,产物以2%琼脂糖凝胶进行电泳,最后使用IlluminaHiseq2500高通量测序平台对合格文库进行测序,并计算口腔中常见菌群的相对含量,并采用QIME软件分析菌群多样性,计算菌群Shahnon、Simpson、Chao1多样性指数。(2)维生素D检测方法:采集受试者空腹静脉血3mL,1h内完成血清分离,置于-80℃冰箱内保存待检,通过酶联免疫吸附法检测血清25(OH)D3水平。
1.3观察指标(1)研究组与对照组口腔菌群和血清维生素D水平比较;(2)维生素D正常组、维生素D不足组与维生素D缺乏组口腔菌群比较;(3)慢性牙周炎患者口腔菌群与血清维生素D水平的关系分析。
1.4统计学方法采用SPSS18.0软件进行数据分析,计量资料表示为(x-±s),两样本比较采用t检验,多样本比较采用单因素方差分析;计数资料表示为n(%),采用χ2检验;应用Pearson法分析慢性牙周炎患者口腔菌群与血清维生素D水平的关系;以P<0.05为差异有统计学意义。
2、结果
2.1口腔菌群和血清维生素D水平比较研究组与对照组Simpson指数、Chao1指数比较,差异均无统计学意义(t=0.644、1.751,P>0.05);研究组口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌相对含量以及Shahnon指数均高于对照组(t=7.851、3.886、4.830、3.271、2.162、2.347、3.115、2.356、2.724,P<0.05),口腔乳杆菌相对含量、25(OH)D3水平低于对照组(t=11.106、5.930,P<0.05)。见表1。
表1研究组与对照组口腔菌群和血清维生素D水平比较[(x-±s),n=100]
2.2正常组、不足组与缺乏组口腔菌群比较正常组、不足组与缺乏组Simpson指数、Chao1指数比较,差异均无统计学意义(P>0.05);口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌相对含量及Shahnon指数在缺乏组、不足组、正常组依次降低(P<0.05),口腔乳杆菌相对含量则依次升高(P<0.05)。见表2。
表2正常组、不足组、缺乏组口腔菌群比较[(x-±s)]
2.3慢性牙周炎患者口腔菌群与血清维生素D水平的关系分析慢性牙周炎患者口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌、Shahnon指数均与血清维生素D水平呈负相关(P<0.05),口腔乳杆菌与25(OH)D3呈正相关(P<0.05),Simpson指数、Chao1指数则均与25(OH)D3无相关性(P>0.05)。见表3。
表3慢性牙周炎患者口腔菌群与血清维生素D水平的关系分析
3、讨论
本研究中,研究组口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌数量以及Shahnon指数均高于对照组,口腔乳杆菌数量、25(OH)D3水平低于对照组,提示口腔菌群紊乱、血清维生素D水平降低可能与慢性牙周炎的发生发展有关。慢性牙周炎患者受多种因素的影响,口腔内生态环境发生改变,导致口腔内常居病原菌毒力增强或过度繁殖,进而引发牙周组织发生慢性感染性疾病[8]。慢性牙周炎患者随着病情的进展,宿主—微环境的稳态遭到破坏,微生物菌群协同聚集,增强了口腔菌群的毒力,细菌的物质代谢合成、离子转运等功能也发生改变,促使细菌在炎症环境中定植,进而形成恶性循环,加重慢性牙周炎患者病情进展程度。有关研究[9]也证实,口腔菌群失调会导致炎症反应,破坏牙龈屏障,导致牙周炎患者骨质流失,影响口腔健康,加重慢性牙周炎患者病情。维生素D是维持血钙磷浓度和调节钙磷代谢的重要物质,并具有维持骨骼和钙稳态的作用[10]。相关研究[11]证实,维生素D有利于保护患者口腔健康,具有抗炎和抗牙齿矿化的作用,且25(OH)D3作为巨噬细胞抗菌防御反应系统中的关键调节因子,可以促进巨噬细胞产生抗菌物质,参与牙周炎患者的免疫调节。
本研究结果显示,随着慢性牙周炎患者血清维生素D水平的降低,各口腔菌群数量和口腔菌群多样性变化也出现变化,且经Pearson相关性分析显示,慢性牙周炎患者口腔链球菌、具核梭杆菌、二氧化碳嗜纤维菌、黏性放线菌、牙龈卟啉单胞菌、中间普氏菌、变黑普氏菌、伴放线杆菌以及Shahnon指数均与血清维生素D水平呈负相关,口腔乳杆菌则与25(OH)D3呈正相关,以上均说明慢性牙周炎患者口腔菌群改变可能与血清维生素D水平有关。维生素D属于类固醇激素之一,在进食时会和脂肪一同吸收,并在体内通过酶的作用向25(OH)D3转化。25(OH)D3具有刺激素样的生理特性,可与维生素D受体结合,据有关研究报道[12],25(OH)D3可以通过作用于相关免疫靶细胞,调节机体炎症反应,增强机体抗感染能力。因此,维生素D缺乏会导致免疫反应上调,口腔中促炎细胞因子水平升高,口腔菌群数量和多样性增加,进而破坏牙周组织,影响牙周健康。
参考文献:
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基金资助:河南省高等学校重点科研项目计划(19A320051);
文章来源:付航宇,张洁,贾靖,等.慢性牙周炎患者口腔菌群改变及其与血清维生素D水平的关系研究[J].贵州医药,2025,49(08):1231-1233.
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