摘要:目的:调查使用SysmexUF-5000i全自动尿液分析仪测定尿液有形成分的参考值范围。方法:收集到空军军医大学西京医院进行健康体检者8004例的新鲜中段尿液,采用UF-5000i全自动尿液分析仪对尿液中红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌等有形成分进行定量检测分析。结果:不同性别健康体检者尿液中红细胞、白细胞、上皮细胞、细菌比较,差异有统计学意义(P<0.05)。采用UF-5000i全自动尿液分析仪测定尿液有形成分的参考值范围,红细胞:男性0.0~14.4个/μL,女性0.0~25.9个/μL;白细胞:男性0.0~10.1个/μL,女性0.0~19.9个/μL;上皮细胞:男性0.0~5.6个/μL,女性0.0~53.4个/μL;管型:男性0.0~0.69个/μL,女性0.0~0.55个/μL;细菌:男性0.0~33.0个/μL,女性0.0~867.3个/μL。结论:按照不同性别建立尿液有形成分参考区间,可为临床诊疗提供更加科学合理的参考依据。
尿液常规检查被誉为“体外无创性肾活检”,对泌尿系统疾病的早期诊断、鉴别诊断、疗效观察、预后判断、群体普查都具有重要意义[1]。SysmexUF-5000i全自动尿液分析仪作为SysmexUF系列最新型号,已逐渐被应用,但由于没有广泛适用于各个地区、各种机型的生物参考区间,目前大多数实验室均使用仪器厂家提供的生物参考区间或沿用UF-1000i标准。本实验室在使用SysmexUF-5000i全自动尿液分析仪初期,沿用UF-1000i生物参考区间,发现存在漏诊等问题,易导致结果误判。考虑地域、性别及机型的不同会给尿液有形成分正常参考值范围带来很大影响[2],本研究依据我国卫生行业标准《临床实验室检验项目参考区间的制定:WS/T402-2012》[3],调查使用SysmexUF-5000i全自动尿液分析仪测定尿有形成分的生物参考区间。现将研究结果报道如下。
1、资料与方法
1.1一般资料
收集2019年4-10月到本科进行健康体检者新鲜中段尿液,剔除不合格标本,共纳入8004例健康体检者的标本,健康体检者中男性5175例,年龄10~93岁,平均(45±14)岁;女性2829例,年龄12~89岁,平均(42±12)岁。剔除标准:(1)患有泌尿系统疾病的标本;肾功能异常的标本;女性在月经期内的标本;(2)经干化学分析仪检测,红细胞、白细胞、蛋白、葡萄糖、亚硝酸盐任意一项为阳性的标本;尿比重低于1.005的标本;(3)UF-5000i检测白细胞、红细胞≥UF-1000i参考区间3倍的标本;UF-5000i酵母菌参数阳性的尿液标本。
1.2仪器与试剂
采用SysmexUF-5000i全自动尿液分析仪及其配套试剂和质控品;SysmexUC-3500全自动尿液干化学分析仪及其配套质控和试纸条。
1.3质量控制
SysmexUF-5000i全自动尿液分析仪、SysmexUC-3500全自动尿液干化学分析仪使用前已进行校准且结果符合厂家标准,每日开机后及关机前分别对SysmexUF-5000i全自动尿液分析仪、SysmexUC-3500全自动尿液干化学分析仪进行高、低2个水平室内质控监控,保证在室内质控在控、仪器状态正常的情况下进行试验。
1.4方法
使用一次性无菌带盖塑料尿管收集上述健康体检者新鲜中段尿液8~10mL,严格按照仪器说明书进行操作,于标本采集后2h内完成检测。
1.5参考区间验证
随机选取40例健康体检者尿液标本,其中健康体检者中男性、女性各20例,严格按照仪器说明书进行操作,2h内完成检测,计算比率。比率(%)=测定结果在参考范围内的例数/总测定例数×100%,比率≥90%为验证通过[4]。
1.6统计学处理
应用SPSS23.0软件对所有数据进行统计分析。采用Kolmogorov-Smirnov方法对数据进行正态性检验,若数据呈正态性分布,以表示,采用t检验;若数据呈非正态分布,则以M(P25~P75)表示[5],采用非参数秩和检验,以P<0.05为差异有统计学意义。
2、结果
2.1不同性别健康体检者尿液有形成分测定结果
不同性别健康体检者尿液中红细胞、白细胞、上皮细胞、细菌比较,差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
表1UF-5000i全自动尿液分析仪对8004例健康体检者尿液有形成分测定结果[M(P25~P75),个/μL]
2.2不同性别健康体检者尿液有形成分参考区间
经UF-5000i全自动尿液分析仪测定的尿红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌均呈非正态分布,故参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)[6]和国际临床化学联合会(IFCC)[7]建议的统计学方法,即以P95作为参考范围上限,男、女健康人群尿沉渣参考值范围见表2。
2.3参考区间验证结果
40例健康体检者的标本中红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌测定结果均在所建立的生物参考区间范围内,比率均为100%,故验证通过,见表3。
表2UF-5000i全自动尿液分析仪检测健康体检者尿液有形成分的参考值范围(个/μL)
表3UF-5000i全自动尿液分析仪生物参考区间验证结果
3、讨论
UF-5000i全自动尿液分析仪作为SysmexUF系列最新型号,基于流式细胞技术和特异性核酸荧光染色技术的基本原理,并在检测信号中新增加了消偏振侧向散射光,能够捕捉具有双折射性的结晶成分,减少检测中结晶对于红细胞等有形成分的干扰;检测通道升级为无核通道和有核通道的双通道,可有效区分红细胞、黏液丝、结晶等无核成分和上皮细胞,减少检测中对于管型等成分的干扰。不同实验室由于检测环境和机型的不同,会造成尿液沉渣参考值范围略有差异[8],因此,建立符合本实验室自身检测系统、就诊人群的参考值范围不仅是检验结果标准化、规范化的要求,也是为了满足临床和患者的需要[9]。本研究使用UF-5000i全自动尿液分析仪测定8004例健康体检者(其中男性5175例,女性2829例)的新鲜中段尿液,建立了红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌等尿液有形成分的参考值范围,并对参考区间进行验证。
研究结果显示,健康体检者尿液中红细胞、白细胞、上皮细胞、管型、细菌在不同性别之间差异均有统计学意义(P<0.05),这与丛玉隆等[10]、李伟等[11]研究结果相似。除管型外,健康体检女性尿液中红细胞、白细胞、上皮细胞、细菌均高于健康体检男性,与闫利明等[12]报道一致,这可能与男、女性生理解剖结构存在差异有关,在建立尿液有形成分参考区间时,应按性别分别建立参考区间更为客观、严谨。另外,在查阅文献时发现,有研究者提出,尿液有形成分参考区间在不同年龄区间、妊娠等特殊时期也会存在一些差异[13,14,15],应分别建立与之相适应的参考区间。但由于本次实验标本来源的关系,未研究年龄、妊娠等因素对尿液有形成分参考区间的影响,在之后的调查中,有待进一步研究。
虽然UF-5000i全自动尿液分析仪有诸多优点,但在研究中发现,同UF-1000i全自动尿液分析仪一样,在对于真菌、结晶、小圆上皮细胞等特殊尿液成分的识别还是不够,仍有假阴性和假阳性的出现。由于尿液成分复杂,干扰因素多,而UF-5000i全自动尿液分析仪是根据尿液有形成分的大小及核酸量的多少进行非形态学分类,其检测结果只能作为筛选[16],不能完全替代显微镜镜检。在实际临床工作中,UF-5000i全自动尿液分析仪仍需结合尿液干化学、尿沉渣显微镜镜检结果共同判断,才能为临床和患者提供更加准确的结果。本研究另随机选取40例(男、女性各20例)健康体检者新鲜尿液对参考区间进行验证,比率均为100%,故验证结果可以接受,说明本实验室可引用该参考区间。
综上所述,实验室在建立尿液有形成分参考区间时,应考虑地域、年龄、性别、机型等,建立符合自身实验室和就诊人群的参考区间。另外,考虑到UF-5000i全自动尿液分析仪对尿液特殊成分的识别力不够,建议在临床使用中,联合尿干化学、尿沉渣显微镜镜检共同判断,以提高结果的准确性,为临床诊疗提供更加科学合理的参考依据。
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