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医院获得性呼吸机相关性肺炎患者的致病微生物的种类及耐药性研究
摘要：目的 分析医院获得性呼吸机相关性肺炎患者的致病微生物的种类及耐药性。方法 选取新疆军区总医院2017年3月—2019年6月期间228例医院获得性呼吸机相关性肺炎患者作为研究对象，采用全自动微生物鉴定仪对下呼吸道痰液样本进行细菌鉴定，用纸片扩散法进行药敏试验。结果 从228例患者的228份痰液样本中分离出279株致病微生物。主要革兰阴性菌为鲍曼不动杆菌（53株，19.00%）、铜绿假单胞菌（42株，15.05%）和嗜麦芽窄食假单胞菌（39株，13.98%）；主要革兰阳性菌为金黄色葡萄球菌（19株，6.81%）；主要真菌为白色假丝酵母菌（29株，10.39%）。鲍曼不动杆菌对亚胺培南、妥布霉素、米诺环素、美罗培南、阿米卡星的耐药率较低，均<20%；铜绿假单胞菌对亚胺培南、妥布霉素、米诺环素、阿米卡星的耐药率较低，均<10%；嗜麦芽窄食假单胞菌对20种抗菌药物的耐药性均>20%；金黄色葡萄球菌对亚胺培南、美罗培南、氯霉素、链霉素、利奈唑酮、利福平、阿米卡星的耐药率较低，<20%；白色假丝酵母菌对6种药物的耐药性均较低，<10%。结论 鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食假单胞菌为医院获得性呼吸机相关性肺炎的主要致病菌，不同菌株的耐药性不同。
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医院获得性肺炎（HAP）是指患者入院治疗时未感染且不处于潜伏期，而在入院48h后在医院内获得的肺炎[1]，包括医院治疗时已被感染但尚无明显症状，在出院后48h内出现感染的肺炎[2,3]。呼吸机相关性肺炎（VAP）是指应用呼吸机机械通气48h后发生的肺炎，通常将拔管撤机48h内发生的肺炎也归于呼吸机相关性肺炎[4]，是医院获得性肺炎中最常见和最严重的肺炎。呼吸机相关性肺炎延长患者的住院时间、增加抗生素使用的种类、增加治疗费用[5]。目前，致病微生物的耐药问题日益严重，成为感染性疾病治疗面临的难题。致病微生物可对多种抗生素产生耐药性，严重威胁人类生命健康[6]。本研究对新疆军区总医院呼吸机相关性肺炎的致病微生物进行鉴定，分析其分布特征及耐药特点，以期为医院获得性呼吸机相关性肺炎的防控和治疗提供依据。
1、对象与方法
1.1研究对象
选取新疆军区总医院2017年3月—2019年6月期间医院获得性呼吸机相关性肺炎患者作为研究对象。诊断符合中华医学会呼吸病学分会感染学组制定的《中国成人医院获得性肺炎与呼吸机相关性肺炎诊断和治疗指南（2018年版）》的标准[7]。
1.2痰液样本采集
使用一次性封闭吸痰管或纤维支气管镜通过人工气道采集医院获得性呼吸机相关性肺炎患者下呼吸道深部的痰液样本。低倍镜下鳞状上皮细胞<10个，中性粒细胞>25个的样本作为合格样本。合格样本在采集后2h内送检。
1.3致病微生物的分离及鉴定
按照《全国临床检验操作规程》第三版进行致病微生物的分离培养。将痰液样本接种在麦康凯培养基（MAC）或沙氏琼脂培养基（青岛海博生物技术有限公司产品）上，34℃培养箱中培养24h。然后采用法国生物梅里埃VITEK2全自动微生物鉴定仪进行鉴定。
1.4药敏试验
采用纸片扩散法（K-B法）进行药敏试验。共选择32种常见抗生素，包括5-氟胞嘧啶、阿米卡星、阿莫西林钠克拉维酸钾、氨苄西林、氨曲南、氟康唑、复方新诺明、红霉素、环丙沙星、利福平、利奈唑酮、链霉素、两性霉素B、氯霉素、美罗培南、咪康唑、米诺环素、哌拉西林、青霉素G、庆大霉素、四环素、酮康唑、头孢吡肟、头孢曲松、头孢噻肟、头孢他啶、头孢西丁、妥布霉素、万古霉素、亚胺培南、伊曲康唑、左氧氟沙星。参考2013版的CLSI-M100-S23判定结果，结果表示为敏感、中介和耐药。本研究将中介计入耐药。
1.5质控菌株
质控菌株包括大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853、肺炎链球菌ATCC49619、金黄色葡萄球菌ATCC25923。质控菌株均购自中国工业微生物菌种保藏管理中心。
1.6统计学分析
使用Excel2007软件对数据进行整理及制表，计数数据表示为频数和百分比，组间比较采用卡方检验。计量数据结果表示为平均值±标准差（），组间比较采用t检验。P<0.05表示差异具有统计学显著性。
2、结果
2.1致病微生物的分布
从228例患者的228份痰样本中分离出279株致病微生物，其中革兰阴性菌189株，占67.74%；革兰阳性菌41株，占14.70%；真菌49株，占17.56%。革兰阴性菌主要为鲍曼不动杆菌（53株，19.00%）、铜绿假单胞菌（42株，15.05%）和嗜麦芽窄食假单胞菌（39株，13.98%）；革兰阳性菌主要为金黄色葡萄球菌（19株，6.81%）；真菌主要为白色假丝酵母菌（29株，10.39%）。见表1。
表1本研究分离的致病微生物
2.2革兰阴性菌的耐药性
鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食假单胞菌的耐药情况如表2所示。鲍曼不动杆菌对亚胺培南、妥布霉素、米诺环素、美罗培南、阿米卡星的耐药率较低，均<20%，而对左氧氟沙星、头孢西丁、头孢曲松、氨曲南、氨苄西林的耐药率较高，均>60%。铜绿假单胞菌对亚胺培南、妥布霉素、米诺环素、阿米卡星的耐药率较低，均低于10%，而对头孢西丁、头孢他啶、头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林钠克拉维酸钾的耐药率较高，均超过60%。嗜麦芽窄食假单胞菌对本研究中的20种抗菌药物的耐药性均超过20%，其中，嗜麦芽窄食假单胞菌对亚胺培南、头孢西丁、头孢他啶、氨曲南、阿米卡星的耐药性超过80%。
表2本研究中主要革兰阴性菌的耐药性
2.3革兰阳性菌的耐药性
金黄色葡萄球菌为革兰阳性菌中的最常见致病微生物，本研究分析了金黄色葡萄球菌对15种常见革兰阳性菌抗生素的耐药性（表3）。金黄色葡萄球菌对亚胺培南、美罗培南、氯霉素、链霉素、利奈唑酮、利福平、阿米卡星的耐药率较低，均低于20%，而对青霉素G和红霉素的耐药率均高于50%。
表3本研究中金黄色葡萄球菌的耐药性
2.4真菌的耐药性
白色假丝酵母菌对6种常见抗生素的耐药情况见表4。白色假丝酵母菌对6种抗生素的耐药性均较低，对两性霉素B的耐药率为6.90%，对5-氟胞嘧啶和伊曲康唑的耐药率为3.45%。
表4白色假丝酵母菌的耐药性
3、讨论
革兰阴性菌是获得性呼吸机相关性肺炎的主要致病微生物种类。本研究发现，革兰阴性菌中主要是鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌和嗜麦芽窄食假单胞菌；革兰阳性菌主要是金黄色葡萄球菌；主要致病性真菌是白色假丝酵母菌，与王龙梅和苏家琼等人的研究结果一致[8,9]，提示在全国范围内导致呼吸机相关肺炎的主要革兰阳性菌和真菌的分布具有一定的相似性。
本研究分析了3种常见革兰阴性菌的耐药情况。鲍曼不动杆菌对多种药物具有天然的抗性，其可产生一种能水解碳青霉烯类药物的β-内酰胺酶，此外药物介导的基因突变也可增加鲍曼不动杆菌的耐药性，因此其耐药性呈现出逐年升高的趋势[10]。本研究中，鲍曼不动杆菌对亚胺培南、妥布霉素、米诺环素、美罗培南、阿米卡星的耐药率较低，均<20%，而对左氧氟沙星、头孢西丁、头孢曲松、氨曲南、氨苄西林的耐药率较高，均>60%。铜绿假单胞菌的耐药机制与产生β-内酰胺酶、ESBLs酶等灭活酶有关。本研究中，铜绿假单胞菌对头孢西丁、头孢他啶、头孢曲松、氨苄西林、阿莫西林钠克拉维酸钾的耐药率均≥60%。嗜麦芽窄食单胞菌可产生多种β-内酰胺酶，对多种抗生素耐药。本研究中嗜麦芽窄食假单胞菌对20种抗生素的耐药性均>20%，其中，对亚胺培南、头孢西丁、头孢他啶、氨曲南、阿米卡星的耐药性>80%。
金黄色葡萄球菌为革兰阳性菌中的最常见致病菌，不仅可以产生β-内酰胺酶水解β-内酰胺类抗生素，而且还可以编码产生青霉素结合蛋白2a，从而产生耐药性[10]。本研究中金黄色葡萄球菌对青霉素G和红霉素的耐药率均>50%。金黄色葡萄球菌属于葡萄球菌属，在自然界内广泛存在，其可寄生在人和动物的鼻前庭黏膜、腹股沟、口咽部、肠道等部位，引起败血症、食物中毒、腹泻等多种感染。
白色假丝酵母菌通常少量存在于人体的口腔、呼吸道、肠道等部位且不引起疾病，而当机体免疫力降低时，其可大量繁殖并引起疾病。本研究发现白色假丝酵母菌对6种药物的耐药性均较低，对氟康唑、酮康唑和咪康唑都敏感。
参考文献：
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阿依努尔,贾旭东,陈慧,代兆华.呼吸机相关性肺炎致病微生物种类及耐药性分析[J].中国国境卫生检疫杂志,2020,43(04):285-288.
基金:邢台市科技计划项目(2016ZC315)
患者脑血管在未受到外伤刺激的情况下出现的脑出血现象为自发性脑出血，具有较高的致残率及死亡率[1]。其中最为严重的则是脑深部功能区脑出血，严重威胁患者生命安全[2]。常规开颅手术虽可以使患者脑内血肿得到清除，但该术式对患者造成的伤害较大，还会对其脑功能区造成实质性损伤，不利于患者预后[3]。
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乳腺疾病是临床常见和多发疾病，不仅影响广大育龄期女性后代的繁育和家庭的和谐，还严重威胁其健康和生活质量[1]。乳腺疾病中威胁最大的为乳腺癌，研究[2]显示2014年中国女性乳腺癌发病率达41.82/10万，居女性恶性肿瘤发病率的首位。近年来，随着生活方式的转变，我国乳腺疾病发生率逐年上升且呈低龄化趋势。
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2020-08-21
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