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国产与进口尼莫地平片溶出曲线相似性分析

2021-01-28 1574 上传者：管理员

摘要：目的：采用光纤溶出度分析方法,评价国产与进口尼莫地平片溶出曲线的相似性。方法：不同pH值条件下模拟胃肠道环境,采用光纤药物溶出度实时测定仪,在测定波长238nm处,分别测定国产与进口尼莫地平片的溶出曲线,通过相似因子法比较溶出曲线的相似性。结果：在不同pH值条件下测定溶出曲线,通过f2因子比较,7个厂家的尼莫地平片溶出曲线有显著差异。结论：光纤药物溶出度仪能准确测定数据,真实地描绘溶出曲线,为改进药品制剂和检测药品质量方面提供真实参考数据。

关键词：
f2因子
光纤药物溶出度实时测定仪
尼莫地平
溶出曲线
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尼莫地平是1,4-二氢吡啶类钙离子拮抗剂,其主要作用为抑制血管平滑肌细胞外钙离子内流,临床上主要用于缺血性脑血管疾病、蛛网膜下腔出血、突发性耳聋及轻、中度高血压等[1]。溶出度是口服药品固体制剂的重要质量指标[2],《中华人民共和国药典》2015年版规定,尼莫地平片溶出度测定采用普通溶出仪,按照溶出度释放度测定法(通则0931第二法)[3]。该药物生产厂家较多,当前我国国家药品监督部门开展的“国家仿制药质量一致性评价”工作[4,5],要求国产与原研药品生物等效,因此在模拟的胃肠道环境下,在各种溶出介质中均具有相似的溶出度曲线[6,7,8],这对于控制药品工艺将起到重要作用。笔者在本研究采用光纤药物溶出度实时测定仪(fiber-opticmedicinedissolutionprocessmonitoringsystem-601,FODT-601)测定[9],以德国拜耳公司原研生产尼莫地平片为对照,随机选取国内6个厂家生产的尼莫地平片,按一致性评价原则采用水、pH值6.8磷酸盐缓冲液、pH值1.2盐酸、pH值4.5醋酸盐缓冲液4种溶出介质模拟胃肠道环境,双波长法扣除辅料,无需滤过,通过FODT-601直接测定该药物的吸光度,不用稀释溶出液,减少人工环节和误差,并通过仪器自动测定,实现原位、实时、直接获得完整的溶出度曲线,计算f2因子,对相似性进行评价[10],为仿制药质量一致性评价考察药物溶出度提供检测手段。

1、材料

1.1药品与试剂

尼莫地平对照品(中国食品药品检定研究院,批号:100270-200002,含量:100%);尼莫地平片(A厂,拜耳医药保健有限公司,规格:每片30mg,批号:BJ18197;B厂,产地:山西,规格:每片20mg,批号:131245;C厂,产地:西安,规格:每片20mg,批号:E1406009;D厂,产地:杭州,规格:每片20mg,批号:140311;E厂,产地:河北,规格:每片20mg,批号:023140204;F厂,产地:天津,规格:每片20mg,批号:140403;G厂,产地:郑州,规格:每片20mg,批号:140402)。磷酸二氢钾、氢氧化钠、冰醋酸、醋酸钠、浓盐酸均为分析纯,水为纯化水。

1.2仪器与设备

光纤药物溶出度实时测定仪(型号:FODT-601,上海富科思生物技术发展有限公司)、电子分析天平(型号:AB135-S,梅特勒-托利多仪器公司,感量为0.01mg)、真空脱气仪(型号:ZKT-18,天大天发仪器有限公司)。

2、方法与结果

2.1溶液的制备

2.1.1溶出介质

①水[含0.3%十二烷基硫酸钠(sodiumdodecylsulfate,SDS)];②pH值1.2盐酸溶液(含0.3%SDS)③pH值4.5醋酸盐缓冲液(含0.3%SDS)④pH值6.8磷酸盐缓冲液(含0.3%SDS)。

2.1.2对照品溶液

精密称取尼莫地平对照品6.81,6.62,6.74,6.81mg,分别置于100mL量瓶中,使用4种溶出介质分别溶解、稀释至刻度,制成对照品溶液。精密量取浓度为68.1,66.2,67.4,68.1μg·mL-1的尼莫地平对照品溶液5.0,10.0,15.0,20.0,28.0mL,分别置于50mL量瓶中,作为系列浓度溶液。

2.2专属性考察

取浓度为34.2μg·mL-1尼莫地平对照溶液在FODT-601的6个通道上在220～550nm波长范围内扫描光谱。结果238nm波长处吸光度符合测定要求,确定该测定波长,采用550nm为参比波长,用双波长法消除辅料干扰。

2.3线性关系考察

分别精密量取“2.1.2”项系列溶液,进样测定,以相对百分浓度(C)为纵坐标,吸光度(A)为横坐标,进行溶出度实验。相对百分浓度(C)范围,水:20.43%～114.32%;pH值1.2盐酸溶液:19.86%～111.23%;pH值4.5醋酸盐缓冲液20.22%～113.24%;pH值6.8磷酸盐缓冲液20.43%～114.42%。线性曲线的回归方程见表1～4。

表1溶出介质为水(含0.3%SDS)时的回归方程

表2溶出介质为pH值1.2盐酸溶液(含0.3%SDS)的回归方程

表3溶出介质为pH值4.5醋酸盐缓冲液(含0.3%SDS)的回归方程

2.4精密度实验

取“2.1.2”项的对照品溶液,在FODT-601上24h内连续测定6次A值,结果A值RSD=0.68%(n=6);连续测定6d,结果A值RSD=1.13%(n=6),说明该方法日内精密度及日间精密度均为良好。

表4溶出介质为pH值6.8磷酸盐缓冲液(含0.3%SDS)的回归方程

2.5回收率实验

精密称取尼莫地平药粉适量(相当于尼莫地平5mg),置100mL量瓶中,用溶媒溶解稀释至刻度,分别加入尼莫地平对照品约12.0,18.0,22.0mg,配制成低、中、高浓度供试品溶液各3份,用溶媒稀释至刻度,摇匀。同法制备其他3种溶媒的供试品溶液。分别在FODT-601上测定A值,代入标准方程,计算方法回收率。结果4种低、中、高浓度供试品溶液平均回收率为95.4%～102.3%,RSD为2.12%～3.52%(n=3),说明该方法的准确度较好。见表5。

2.6稳定性实验

量取溶出实验过程中30min时溶出液适量,分别于室温放置0,4,8,12,24h,在FODT-601上238nm波长处扫描测定A值,24h内连续测定5次,测得吸光度的RSD=2.60%,表明该供试品溶液在24h内稳定性良好。

2.7溶出曲线测定

采用FODT-601,转篮法,2mm的测定探头,溶媒900mL,转速:100r·min-1,温度:(37±0.5)℃,打开溶出仪监测系统输入溶出度测定参数,扫描空白溶液之后,在经脱气处理的溶媒中投入药片,开始监测:时间30min。在4种溶媒里测定7个不同厂家的溶出曲线结果:原位在线监测,每分钟采样1次,将7个厂家每个厂家12片药片平均值汇总后,得到30min内平均溶出曲线,对4种不同溶媒中不同厂家药片平均曲线比较,见图1。同一厂家在不同溶媒中的平均溶出曲线比较见图2。

结果表明:参比制剂A厂在4种溶媒中的实时溶出曲线及溶出百分率均>80%,但是在pH值6.8磷酸盐缓冲液中溶出速度较快。B、C厂在4种溶出介质中溶出百分率均小于<65%。D厂在4种不同溶媒中溶出曲线显示:在pH值1.2盐酸和水中溶出百分率<60%,pH值4.5醋酸盐缓冲液、pH值6.8磷酸盐缓冲液中溶出百分率均>60%,在pH值6.8磷酸盐缓冲液中溶出速度较慢。E厂在4种溶媒中溶出曲线趋势较一致,在水中溶出速度较快,溶出百分率均<80%。F厂在4种溶媒中溶出曲线趋势不一致,溶出百分率均<70%。G厂在4种溶媒中溶出曲线趋势较一致,但溶出百分率均<70%。综合以上得出:在4种溶媒中,6个厂家药品终点溶出百分率均<80%,只有原研药厂A厂的终点溶出百分率>80%。

表5尼莫地平回收率实验结果

图1不同厂家产品在不同溶媒中的溶出曲线(n=12)

本研究用A厂作为参比制剂,将A厂溶出85%时间为Ta,取样时间为1/4Ta,2/4Ta,3/4Ta,Ta,且溶出量超过85%取样点不超过一个,第一个取样时间点溶出量的(n=12)不超过20%,其余取样点的RSD不超过10%。f2值见表6。

表6显示,只有在水中,E、F与原研药(参比制剂)比较后f2值大于50,与参比制剂A厂溶出曲线具有相似性,其余药厂在4种溶出介质中相似因子比较f2值均低于50,曲线与参比制剂无相似性。

图2不同厂家产品在不同溶媒的溶出曲线

表66个厂家与参比制剂比较的f2值

3、讨论

描绘完整的溶出曲线可以反映药物体外溶出行为,进一步判断生产工艺是否符合规定。人体消化道体液的pH值全范围(pH值1.2～6.8)差异较大,在不同pH值条件下药物溶出不同会导致吸收效果有较大差异,仿制药与原研药多条特征溶出曲线对比后,尽可能一致,才能确保口服固体制剂对于不同患者均有较高的生物利用度[10]。本研究参照日本橙皮书及国家“仿制药质量一致性评价工作方案”指导原则中规定,在4种不同pH值模拟胃肠液中测定尼莫地平片的溶出曲线,用f2法进行相似性比较,在水中只有E、F两厂f2值>50,与A厂溶出曲线相似,其余均无相似性。从结果可以看出,本研究实验7个厂家药品在4种溶出介质中4溶出曲线的一致性较差,受试制剂与A厂参比制剂比较,在模拟人体各种胃肠液环境中体外溶出曲线相似性较低,还需引起注意,改善制剂工艺水平。

《中华人民共和国药典》2015年版中规定[3],在尼莫地平片测定溶出度时,普通溶出仪测定过程中,手工取液后滤过并稀释,紫外分光光度计测定吸光度后再计算累积溶出百分率,当终点结果符合要求后,还需手动拟合曲线。步骤复杂,并产生较多不必要人为实验误差。本研究采用“光纤药物溶出度实时测定方法”测定溶出曲线[9],采用双波长法自动扣除辅料对测定的干扰,调节光程探头测定吸光度,不需要稀释,节省人工时间,减少人为误差,实现原位、实时、测定获得溶出曲线,软件进行f2计算,获得曲线相似性结果。数据来源真实、方便、准确。

目前《中华人民共和国药典》溶出度标准是单一介质、测定终点溶出度及溶出限度来质控药品溶出度,很难全面评价一种剂型的仿制药品的溶出曲线。为使患者服用不同厂家药物的临床疗效一致,仿制药必须与原研药进行质量对比和生物等效性研究[4]。仿制药一致性评价不仅包括体内生物等效性评价,也包括系统的药学质量评价[5],多种溶出介质下的溶出曲线测定能够模拟口服制剂的体内药动学过程,是药学质量评价的重要过程。我国正在开展“仿制药质量一致性评价”工作,并规定指导原则及实施细则与方案,溶出度实验的重要性已深入人心,且国家药品审评中心也已制定强制性要求,目的就在于提升药品的质量与品质。本研究采用的实验方法以仿制药一致性评价指导原则为根据,对仿制药溶出曲线进行全面的研究,为提高我国药品制剂水平提供新的技术方法。

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