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IMP-3和Cyclin B1在鼻咽癌中的表达水平及临床

2023-11-20 60 上传者：管理员

摘要：目的探讨胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3(IMP-3)和细胞周期蛋白B(Cyclin B1)在鼻咽癌(NPC)中的表达水平及临床意义。方法回顾性选取NPC患者56例，另选取同期行鼻咽部活检病理证实为慢性鼻咽炎(CN)的组织样本26例作为对照组。采用免疫组化法检测2组中IMP-3和Cyclin B1的表达，分别分析蛋白表达与NPC患者临床病理特征的关系，采用Spearman等级相关分析法分析IMP-3和Cyclin B1蛋白表达的相关性。结果 IMP-3蛋白在NPC组织中的阳性表达率为75.00%,在CN组织中的阳性表达率为1.61%;Cyclin B1蛋白在NPC组织中的阳性表达率为69.64%,在CN组织中的阳性表达率为7.69%;2组间IMP-3和Cyclin B1蛋白的阳性表达率比较，NPC组均高于CN组，差异有统计学意义(P<0.05)。NPC组织中IMP-3蛋白的高表达与年龄、TNM分期有相关性(P<0.05),Cyclin B1蛋白的高表达与TNM分期、淋巴结转移有相关性(P<0.05);经Spearman等级相关分析法分析，IMP-3和Cyclin B1蛋白表达无相关性(γ=0.195,P=0.102)。结论 NPC组织中IMP-3和Cyclin B1蛋白均呈现高表达，IMP-3和Cyclin B1蛋白与NPC的发生及发展密切相关。

关键词：
免疫组织化学
慢性鼻咽炎
细胞周期蛋白B
胰岛素样生长因子ⅡmRNA结合蛋白3
鼻咽癌
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鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma, NPC)是发生于鼻咽顶壁及咽隐窝的恶性肿瘤，发病具有较强的区域性，在我国南方地区高发，可能与环境因素有关，其发病机制尚不明确，研究[1]认为其发生与多种癌基因和抑癌基因相互作用有密切关系。鼻咽癌早期无典型临床表现，发病部位较为隐秘，且易发生淋巴结转移或远处转移，患者早期行积极化疗后5年生存率达80%,但部分中晚期患者肿瘤已发生局部浸润及远处转移，患者远期生存预后不佳[2]。临床影像学技术及化疗手段不断更新发展，患者经临床治疗后NPC局部区域的控制取得显著成果，但淋巴结及远处转移率仍未得到有效控制[3]。因此，疾病早期诊断、精准治疗以及预后等是临床研究重点，因此研究鼻咽癌转移的分子机制、确定NPC发生发展的靶向标志物势在必行[4]。胰岛素样生长因子Ⅱ mRNA结合蛋白3(Insulin-like growth factor Ⅱ mRNA binding protein 3,IMP-3)与癌症密切相关，一般在胚胎组织中表达，成年机体正常组织中较为少见，当细胞发生癌变时，去分化的同时重新分泌胚胎时期特有的蛋白，因此在多种肿瘤组织中发现IMP-3表达[5]。细胞周期蛋白B(Cyclin B1)是细胞周期G2/M期的关键检查点蛋白，在染色体凝集、核膜破裂和纺锤体组装等细胞有丝分裂过程中均有参与，在胃癌、肺癌等多种肿瘤内均呈高表达，与恶性肿瘤表型密切相关[6]。临床研究[7]表明，咽部鳞癌Cyclin B1高表达患者生存时间、5年生存率均低于Cyclin B1低表达患者，提示Cyclin B1高表达可能与NPC化疗抵抗有关，其可能是肿瘤治疗的新靶点。本研究采用免疫组化法检测NPC组织中IMP-3、Cyclin B1的表达，探讨IMP-3、Cyclin B1在NPC发生发展中的作用，并对其二者的相关性进行分析，现报告如下。

1、材料与方法

1.1 一般资料

回顾性选取本院2016年1月至2020年12月收治的经鼻咽部组织活检且病理确诊为NPC患者56例，患者术前均未进行化疗及放疗治疗。根据WHO组织学分型可将鼻咽癌样本分为鼻炎未分化型非角化性癌22例，分化型非角化性癌24例，低分化鳞状细胞癌10例；其中男性30例，女性26例；年龄38～72岁，平均(51.47±6.38)岁；按照TNM分期标准：Ⅰ期11例，Ⅱ期18例，Ⅲ期20例，Ⅳ期7例；经病理活检或穿刺活检诊断为鼻咽癌转移32例，无转移24例。另选取同期于本院行鼻咽部活检病理证实为CN的组织样本26例作为对照组，其中男性19例，女性7例；年龄35～70岁，平均(50.32±6.19)岁。

1.2 检测方法

经组织石蜡包埋后切片，67 ℃烤片2 h。二甲苯脱蜡、梯度乙醇水化处理。抗原修复采用枸橼酸钠缓冲液，内源性过氧化物酶的活性去除采用3%过氧化氢孵育10 min, IMP-3和Cyclin B1以1∶100浓度稀释后滴加至切片，并置于冰箱中冷藏过夜。滴加二抗，37 ℃孵育20 min, PBS漂洗后滴加DAB溶液显色5 min。苏木精复染后封片观察。上述操作以PBS缓冲液代替一抗作为阴性对照。

1.3 检测结果

由2名病理诊断工作经验丰富的医师采用独立双盲法判定免疫组化结果，独立阅片，在显微镜200倍镜下评估。肿瘤细胞染色呈浅黄、不均匀着色，判定为弱染色；呈黄褐色、着色比较均匀，则判定为中等染色；呈棕褐色、着色均匀，则判定为强染色。采用半定量积分法判定结果，随机观察10个高倍视野(×400):①细胞强度染色：不染色0分、弱染色1分、中等染色2分、强染色3分；②阳性细胞占血液细胞总数：0～5%得0分，>5%～25%得1分，>25%～50%得2分，>50%～75%得3分，>75%～100%得4分。两项得分相加，≥4分为阳性。

1.4 统计学方法

采用SPSS 24.0统计软件分析所得数据，计数资料以n(%)表示，组间比较采用χ2检验，2种蛋白表达的相关性分析采用Spearman等级相关分析法。P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1 IMP-3和Cyclin B1在NPC及CN组织中的表达情况

IMP-3蛋白在NPC组织中的阳性表达率为75.00%,在CN组织中的阳性表达率为1.61%,2组间IMP-3蛋白的阳性表达率比较，NPC组高于CN组，差异有统计学意义(P<0.05)。Cyclin B1蛋白在NPC组织中的阳性表达率为69.64%,在CN组织中的阳性表达率为7.69%,2组间IMP-3蛋白的阳性表达率比较，NPC组高于CN组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 IMP-3和Cyclin B1在NPC及CN组织中的表达情况(例，%)

2.2 IMP-3和Cyclin B1蛋白的表达与NPC临床病理特征的关系

NPC组织中IMP-3表达与年龄、TNM分期有相关性(P<0.05),与性别、组织学分型、淋巴结转移无相关性(P>0.05);NPC组织中Cyclin B1表达与TNM分期、淋巴结转移有相关性(P<0.05),与性别、年龄、组织学分型无相关性(P>0.05)。见表2。

表2 IMP-3和Cyclin B1蛋白的表达与NPC临床病理特征的关系(例，%)

2.3 IMP-3和Cyclin B1在NPC组织中表达的相关性

在IMP-3阳性表达的42例NPC组织中，Cyclin B1阳性表达有33例，在IMP-3阴性表达的14例NPC组织中，Cyclin B1阳性表达有6例。经Spearman等级相关分析法分析，IMP-3和Cyclin B1蛋白的表达无相关性(γ=0.195,P=0.102)。见表3。

表3 IMP-3和Cyclin B1在NPC组织中表达的相关性/例

3、讨论

NPC是我国常见的一类头颈部恶性肿瘤，其发病部位位于鼻咽部及咽隐窝部黏膜上皮组织，病理上可分为角化型、非角化型以及基底样鳞状细胞癌，目前临床治疗NPC主要是通过放疗、化疗等进行，但其不良反应较大，局部复发及转移率较高[8]。IMP又称为肿瘤过表达K同源区域包含蛋白，属于IMP家族，此外该家族中还包括IMP-1、IMP-2和IMP-3[9]。IMP-3基因位于染色体7p11.5,由mRNA转录而成，由多个氨基酸残基组成，分子量约为64 KD,在胞浆内形成独特的核蛋白颗粒(RNP),富集在核周区域包含2个RNA结合结构域(RRMs)和C末端4个KH结构域[10]。在胚胎发育早期IMP-3表达较为广泛，且与编码胰岛素样生长因子Ⅱ(IGF-Ⅱ)mRNA高度特异性结合，参与其各项活动调节，通过影响IGF-Ⅰ的表达，调节细胞生长[11]。既往研究[12]显示，卵巢浆液性癌患者肿瘤组织中IMP-3阳性表达率显著上升，而非肿瘤组织中未发现阳性表达，IMP-3水平是肿瘤细胞增殖及转移的关键标志物，且IMP-3阳性表达的卵巢浆液性癌组织恶性程度较高。Elshafey等[13]在涎腺粘液表皮样癌的研究中也证实，癌组织中IMP-3异常高表达，且与临床病理参数密切相关，可用作早期诊断、预后评估的指标。本研究中，IMP-3蛋白在NPC组织中的阳性表达率为75.00%,在CN组织中的阳性表达率为1.61%,提示IMP-3蛋白在NPC肿瘤组织中呈现高表达。此外，进一步研究发现NPC组织中IMP-3蛋白的表达水平与年龄、TNM分期等临床病理参数有关。

Cyclin B1基因定位于染色体5q12,包括9个外显子和8个内显子，分别由2个不同的转录起始位点转录生成组成型表达蛋白和G2/M期细胞周期调节蛋白[14],其编码产物包含出核序列及入核序列，两种序列通过自身磷酸化的改变使Cyclin B1可在细胞质和细胞核之间穿梭，Cyclin B1在整个细胞周期中始终处于动态平衡[15]。既往研究[16]显示，多种细胞周期调控因子在乳腺癌的发病过程中均异常表达，Cyclin B1的表达与乳腺癌有丝分裂指数和增殖指数密切相关。本研究中，Cyclin B1蛋白在NPC组织中的阳性表达率为69.64%,在CN组织中的阳性表达率为7.69%,Cyclin B1蛋白的表达水平与NPC的TNM分期、淋巴结转移情况有关。提示Cyclin B1蛋白在NPC肿瘤组织中呈现高表达，Cyclin B1可能涉及肿瘤的发生与发展，参与肿瘤淋巴结的转移过程。相关研究[17]表明，Cyclin B1在食管鳞状细胞癌中的高表达能够降低顺铂和紫杉醇对细胞凋亡的诱导，其可作为判断食管鳞状细胞癌患者预后的标志物，在患者无远处转移生存率、无病生存率、无反复生存率和总生存率方面具有良好的预测效能，可能成为治疗食管鳞状细胞癌特定靶点。

综上所述，NPC组织中IMP-3和Cyclin B1蛋白均呈现高表达，IMP-3和Cyclin B1蛋白与NPC的发生及发展密切相关，但二者间表达无明显相关性，IMP-3和Cyclin B1蛋白各自参与肿瘤的发生与发展。

参考文献:

[1]张维彬,黄荣熙,黄娅.鼻咽癌组织中PTTG和cyclinD1蛋白的表达及临床意义[J].检验医学与临床,2019,16(8):1031-1033.

[2]张宏伟,陈菊华.血清神经膜蛋白2与鼻咽癌EB病毒抗体及其DNA的相关性分析[J].中国医师杂志,2019,21(11):1688-1692.

[7]朱红,曾亮,谢志海,等.Cyclin D1和Cyclin B1在鼻咽癌中表达的免疫组织化学研究[J].中国现代医学杂志,2004,14(11):103-105.

[10]汤红平,陈国艳,梁冠男,等.IMP3在乳腺癌和癌前病变中的表达及临床意义[J].齐齐哈尔医学院学报,2019,40(12):1455-1458.

[12]贺红梅,邵长好,白金猛,等.IMP3､P16､HE4､Ki67､P53在卵巢浆液性肿瘤中表达的生物学意义､鉴别诊断及预后的研究[J].临床和实验医学杂志,2020,19(23):2537-2540.

[14]冷远秀,徐林,陈芳,等.细胞周期蛋白B1在恶性肿瘤中的研究进展[J].重庆医科大学学报,2021,46(1):1-4.

[16]唐加步,姚运红,欧阳清,等.人乳腺癌端粒酶基因RNA与雌激素受体､细胞周期蛋白B1､C-erbB-2相关性研究[J].现代医药卫生,2021,37(1):30-33.

基金资助:2019年河南省医学科技攻关计划联合共建项目(编号:LHGJ20190954);

文章来源:李赞峰,朱卿文,吴蔚等.IMP-3和Cyclin B1在鼻咽癌中的表达水平及临床意义[J].实用癌症杂志,2023,38(11):1777-1780.