摘要:目的:对比分析不同胎龄囊胚(D5,D6)移植后临床结局情况,旨在为探讨其发育潜能。方法:对于2016年1月~2017年12月期间到我市妇幼保健院接受IVF/ICSI-ET助孕行囊胚冻融移植的患者进行回顾性分析,将移植囊胚数以及囊胚形成的时间作为分组依据,划分为单D5组(75周期)、单D6组(93周期)、双D5组(660周期)、双D6组(350周期)。观察、统计不同组别患者的临床结局情况,并对比评价。结果:D5、D6冻融囊胚复苏率分别为97.25%、93.12%,对比(P<0.05),且呈现出依次降低的现象。对比胚胎着床率、妊娠率情况,单D5组较单D6组高(P<0.05)。D5、D6双囊胚冻融移植妊娠率分别为75.00%、40.54%,对比(P<0.05),且呈现出依次降低的现象;胚胎着床率分别为55.56%、40.54%,对比(P<0.05),且呈现出依次减少的现象。对比多胎率,双D5组较双D6组高(P<0.05),对比流产率(P>0.05)。结论:就囊胚发育潜能而言,D5、D6囊胚呈现出依次降低的现象,但是D6囊胚仍然具有一定几率的妊娠率,D5的妊娠结局更为理想。
随着囊胚体外培养体系的不断优化,囊胚培养与移植得到了较快的发展与应用,囊胚培养理论上经过了一个再筛选过程,更有利于挑选有发育潜能的胚胎,可以使胚胎发育与子宫内膜的同步化更好,进而提高着床率,增加活产率,减少移植胚胎数的同时并未降低妊娠率,减少了多胎妊娠及相关并发症的发生[1]。近年来,传统程序化冷冻技术已经显露除了自身不足,玻璃化冷冻技术的出现弥补了其劣势。在受精之后的第5、6、7天,胚胎都存在一定的几率发育成为囊胚。卵裂期胚胎移植完成之后,如果对剩下的胚胎进行培养,并利用玻璃化冷冻技术,是能够提高妊娠几率的,这也为临床中进行单囊胚移植提供了基础性的支持[2,3]。而对于不同发育天数的囊胚的发育潜能的差别,有研究表明:在新鲜周期中移植D5囊胚的临床妊娠率、着床率都高于D6囊胚[4];在冻融囊胚周期中,D5和D6囊胚移植后的临床妊娠率、着床率无显著差异[5,6]。但也有研究认为,D5冻融囊胚移植较D6具有较高的临床妊娠率、种植率及活胎分娩率[7]。鉴于此,本文就我市妇幼保健院收治的行囊胚冻融移植患者进行关于不同胎龄囊胚(D5,D6)移植后临床结局情况回顾性研究,具体结果如下。
1、资料与方法
1.1一般资料
选择2016年1月~2017年12月期间到我市妇幼保健院接受体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)治疗,新鲜周期促排卵方案为卵泡期长方案,行囊胚解冻移植的患者。纳入标准:(1)年龄小于37岁,(2)BMI指数不超过23kg/m2;(3)经过宫腔镜检查,显示宫腔形态没有异常。(4)排除移植失败2次以上患者。(5)伴有习惯性流产史者;(6)存在纵隔子宫等会影响到宫腔形态病情。
1.2方法
所选择研究对象均接受囊胚冻融移植。具体方法:
1.2.1囊胚复苏
选用商品化解冻试剂(Kitazato公司,日本),严格按照操作说明进行囊胚复苏。将囊胚放入到囊胚培养液当中,置于三气培养箱温度37℃,培养时间为2h后,于倒置显微镜下观察囊胚存活情况与恢复情况并记录。复苏过程中如果存在坏死囊胚,则需要再次进行解冻,在再次解冻的时候需要遵循移植冻融囊胚≤2个的原则;若没有第2个囊胚能够单独解冻,进行单囊胚移植。
1.2.2子宫内膜准备工作
均接受激素替代E-P周期,在月经的第2d服用戊酸雌二醇,给药时间以及剂量均根据实际情况而定,若内膜厚度转变为7mm,且给药时间≥10d,便可检测雌二醇(E2)、孕酮(P)等指标,若E2>200pg/ml,P<1.5ng/ml,便可行黄体酮肌注,持续6d后行冻融囊胚移植。
1.3妊娠结果判定指标
移植后的12d行血清β-HCG检查,移植后30d接受B超检查见孕囊者,则视为临床妊娠;显示不存在孕囊,为生化妊娠。妊娠周期≤12周流产视为早期流产。
1.4统计学方法
研究数据纳入SPSS20.0分析,计数资料以百分率(%)表示,行卡方χ2检验,P<0.05为差异,有统计学意义。
2、结果
2.1不同组间年龄对比
不同组之间年龄对比中,P>0.05无统计学差别,见表1。
表1不同组间年龄对比
2.2冻融囊胚相同发育时间解冻复苏对比
D5及D6冻融囊胚复苏率分别为97.25%、93.12%,对比(P<0.05),且呈现出依次降低的现象。详见表2。
表2冻融囊胚相同发育时间解冻复苏对比
2.3不同组别单囊胚移植冻融囊胚移植妊娠情况对比
对比胚胎着床率、妊娠率情况,单D5组较单D6组高(P<0.05)。详见表3。
表3不同组别单囊胚移植冻融囊胚移植妊娠情况对比
2.4不同组别双囊胚移植冻融囊胚移植妊娠情况对比
D5及D6双囊胚冻融处理流产率与宫外孕率没有统计学差异外,移植妊娠率对比(P<0.05),胚胎着床率对比(P<0.05),多胎率对比(P<0.05),DD5组均高于DD6组,有统计学差异。详见表4。
表4不同组别双囊胚移植冻融囊胚移植妊娠情况对比
2.5在相同发育时间单、双囊胚移植冻融囊胚妊娠情况对比
若移植发育时间相同,单囊胚组的妊娠率,流产率与多胎率均远低于双囊胚组,具有统计学差异。详见5、6。
表5单、双D5妊娠结局对比
表6单、双D6妊娠结局对比
3、讨论
近年来,辅助生殖技术得到了较为迅猛的发展,妊娠率也得到了较大的提升;随着全囊胚冷冻技术的出现,极大降低了卵巢过度刺激综合征等对子代以及胚胎着床率所带来的负面影响[8,9]。同卵裂期胚胎进行对比,冻融囊胚和子宫内膜的容受性更为理想,因此临床妊娠率较高。通常情况下,囊胚的体积较大,细胞不仅数量多,种类也更是繁多,且还存在囊腔,所以如果行传统的冷冻方式,很容易出现冰晶。玻璃化冷冻技术的出现,有效弥补了上述劣势;其主要是在极低的温度中,进行快速的降温,并将高黏度液体中的细胞转变为玻璃样固体(迅速),所以对囊胚的冷冻结果进行了典型的改善。经过临床研究以及动物实验,均证明玻璃化重复囊胚冷冻效果接近新鲜周期。随着对玻璃化冷冻技术的不断改善,技术已经越来越成熟,且在多个妇幼保健院中得到了普遍的应用[10]。
综上所述,就囊胚发育潜能而言,D5及D6呈现出依次降低的现象,但是D6囊胚仍然具有一定几率的妊娠率,D5的妊娠结局更为理想。对于年轻、身材矮小、子宫畸形、宫颈机能不全、瘢痕子宫(剖宫产、子宫肌瘤剔除术后)、OHSS高风险或既往合并孕期并发症的患者,建议选择性D5/D6单囊胚移植,在获得满意临床妊娠率的同时,可显著降低各种并发症的发生。
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