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微柱凝胶法对新生儿溶血病的检测价值分析

2024-10-29 54 上传者：管理员

摘要：目的：对新生儿溶血病应用微柱凝胶法检测的临床价值进行分析。方法：在2022年1月—2023年1月河南省生殖妇产医院生产的疑似新生儿溶血病的患儿中抽取142例患儿作为研究对象，均采用试管法与微柱凝胶法来进行溶血三项试验。结果：142例患儿血型分别为A型45例、B型46例、O型51例，共确诊31例，其中A型21例、B型10例、O型0例。三种血型患儿直接抗人免疫球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验中，血型为A型的新生儿溶血病患儿检出率最高，均高于B型和O型，差异均有统计学意义（χ2=4.785、5.683、4.874、5.463,P<0.05）；确诊的患儿中，5例新生儿的溶血三项试验均为阳性，1例新生儿的直接抗人免疫球蛋白试验和游离抗体试验结果同为阳性，3例新生儿的直接抗人免疫球蛋白试验和抗体释放试验结果同为阳性，4例新生儿的游离抗体试验和抗体释放试验结果同为阳性，18例新生儿的抗体释放试验结果为阳性；就血型抗原的检出率而言，微柱凝胶法为100%，高于试管法的98.59%，差异均有统计学意义（χ2=4.783,P<0.05）；就溶血三项试验的阳性率而言，微柱凝胶法分别为7.04%、7.75%、38.73%，均高于试管法的4.93%、4.23%、14.79%，差异均有统计学意义（χ2=5.683、11.783、4.781,P<0.05）。结论：新生儿溶血病应用微柱凝胶法检测具有操作简单、特异性强、灵敏度和准确度高的特点，对早期诊断、及时治疗以及降低病死率具有重要意义。

关键词：
发病率较高
微柱凝胶法
新生儿溶血病
检测价值
胆红素脑病
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作为临床上一种较为常见并且发病率较高的新生儿疾病，新生儿溶血病的出现会损伤新生儿的神经细胞，进而引发胆红素脑病、核黄疸等后遗症，对患儿的生活质量、身体健康以及生长发育均造成严重的影响[1]。血清学诊断是目前临床检测该病的主要方式，试管法则是传统以及常规的血型鉴定方式，但是这种方式具有较高的假阴性，敏感性较低，并且检测结果易受到多种因素的干扰[2]。基于此，本研究对新生儿溶血病患儿进行研究，在检测中应用微柱凝胶法，并与传统试管法进行对照研究，现将结果报告如下。

1、资料与方法

1.1一般资料

在2022年1月—2023年1月河南省生殖妇产医院生产的疑似新生儿溶血病的患儿中抽取142例患儿纳入观察对象，患儿均存在程度不同的黄疸、高胆红素血症、贫血、肝脾肿大等相关症状，其中男性77例、女性65例；年龄8 h～10 d，平均年龄（2.33±0.21) d。本研究已经样本医院医学伦理委员会审批通过。

1.2方法

1.2.1血型检测

抽取患儿的EDTA-K2抗凝全血约2～3 mL，按照3 000 r/min的转速来对血液标本进行10 min的离心处理，将血清和压积红细胞进行分离。（1）试管法：将50μL的压积红细胞放入试管内，采用生理盐水洗涤3次后进行控干，并在试管中加入生理盐水950μL（形成5%红细胞悬液）[3]，在空白对照试管以及含有抗A、抗B、抗Rh (D）试剂的试管中分别加入5%红细胞悬液50μL，按照3 000 r/min的转速来进行2 min的离心处理，然后对血型进行鉴定。（2）微柱凝胶法：在离心机中放入微柱凝胶新生儿血型检测卡，先按照900 r/min的转速来进行2 min的离心处理，再按照1 500 r/min的转速来进行3 min的离心处理，在1 mL的生理盐水中加入8μL的压积红细胞（形成0.8%红细胞悬液），分别在微柱血型卡的对照、抗A、抗B、抗Rh(D）孔中加入50μL的0.8%红细胞悬液，在常温环境中放入离心机中进行5 min的离心处理，对血型结果进行观察。

1.2.2直接抗人免疫球蛋白试验

(1）试管法：在新试管中加入抗人免疫球蛋白试剂100μL以及5%红细胞悬液50μL，离心处理后对结果进行判定[4]。（2）微柱凝胶法：将0.8%红细胞悬液加入血型不完全抗体检测卡的G孔中，进行5 min的离心处理，对结果进行判定。

1.2.3游离抗体试验

(1）试管法：分别取标记游离A、B、O的3支试管，将5%红细胞悬液和血清加入其中，进行1 h的37℃水浴，采用生理盐水洗涤3次后滴入抗人免疫球蛋白试剂2滴，对其进行离心处理，对是否出现凝集现象进行观察，如果出现凝集，则判定为阳性[5]。（2）微柱凝胶法：分别将50μL血清和0.8%红细胞悬液加入抗人免疫球蛋白卡Ac、Bc、Oc的孔中，采用FYQ型免疫微柱孵育机对其进行15 min的孵育，离心处理后对结合进行判断[6]。

1.2.4抗体释放试验

采用放散试剂盒将500μL的压积红细胞制备放散液。（1）试管法：分别将5%红细胞悬液、放散液放入试管中，进行1 h的37℃水浴，3洗后滴入抗人免疫球蛋白试剂2滴，离心处理后对凝集情况进行观察，如果出现凝集，则判定为阳性[7]。（2）微柱凝胶法：分别将50μL的0.8%红细胞悬液和放散液放入抗人免疫球蛋白卡的Ac、Bc、Oc孔中，采用FYQ型免疫微柱孵育机对其进行15 min的孵育，离心处理后进行判断。

1.3统计学方法

数据采用SPSS 23.0软件进行统计分析。计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用t检验。计数资料以例数和百分比（%）表示，组间比较采用χ2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1不同血型的新生儿溶血病检出情况

142例患儿血型分别为A型45例、B型46例、O型51例，共确诊31例，其中A型21例、B型10例、O型0例；三种血型患儿直接抗人免疫球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验中，血型为A型的新生儿溶血病患儿检出率最高，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1不同血型的新生儿溶血病检出情况

2.2溶血三项试验结果分布及结果判断情况

确诊的新生儿中，5例新生儿的溶血三项试验均为阳性，1例新生儿的直接抗人免疫球蛋白试验和游离抗体试验结果同为阳性，3例新生儿的直接抗人免疫球蛋白试验和抗体释放试验结果同为阳性，4例新生儿的游离抗体试验和抗体释放试验结果同为阳性，18例新生儿的抗体释放试验结果为阳性，见表2。

表2溶血三项试验结果分布及结果判断情况

2.3两种检验方法的结果情况

就血型抗原的检出率而言，微柱凝胶法高于试管法，差异有统计学意义（P<0.05）。试管法未检出的2例中，1例为弱A抗原，1例为弱D抗原。就溶血三项试验的阳性率而言，微柱凝胶法均高于试管法，差异有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3、讨论

作为一种新生儿期较为常见的临床疾病，新生儿溶血病是由于母婴血型不合导致的，患儿会出现程度不同的贫血、黄疸、肝脾肿大等症状，病情较轻的患儿在接受及时有效的治疗后一般均可治愈，不会对身体健康和未来生长发育造成影响，但是如果病情严重的患儿以及诊断、治疗不及时的患儿，则会引起高胆红素血症、重度溶血性贫血等严重情况，甚至有可能出现心力衰竭、肾盂积水、脑瘫、生长发育不良以及智力障碍等严重并发症及后遗症，使其死亡率大幅度增加。因此，加强该病的早期诊断至关重要，确保在新生儿出现问题时能够得到及时有效地治疗，从而降低并发症、后遗症发生率以及死亡率。研究资料[8]显示，ABO血型不合是最为常见的新生儿溶血病，占总患病人数的1/2以上，这主要是由于母体为O型血，但是新生儿为B型或者A型血导致的。

表3两种检验方法的结果情况

产前血清检查能够通过抗体筛查、血型鉴定、效价测定以及抗体鉴定来对新生儿溶血病发生的可能性以及病情来进行预测，但是新生儿溶血三项试验则是该病确诊的最有效证据。试管检测是目前临床上一直采用的主要方式，由于在检验过程中需要反复、多次地对血液样本中红细胞采用生理盐水进行洗涤，检测过程较为复杂，并且结果受到人为因素的干扰较大，因此诊断准确性并不尽如人意。近年来，随着医疗检测技术以及医疗科学技术水平的高速发展，微柱凝胶技术在临床上的应用也越来越广泛。这种检测方法具有较强的特异性、较高的灵敏度以及准确性，在检验过程中对红细胞悬液、血清、放散液的需求量相对较小，通过对凝胶浓度的调节来区分阴阳性；这种免疫学测量技术在检验过程中不需要对红细胞进行清洗，可以直接通过含有大分子溶液的微柱来进行抗人球蛋白试验，进而明显提高了检测灵敏度；除此之外，这种检验方法易操作，过程简单，不需要操作者具有很高的操作技术，并且检测结果肉眼可见，不需要依赖显微镜，也不需要操作者具备丰富的鉴别经验。但是这种检验方法也存在一定的缺点，由于新生儿体内抗原发育不完全，因此采集到的血液中一般只存在较少的抗原位点，凝聚反应较难实现，这也是与其他两项试验相比，抗人球蛋白中阳性率相对较低的原因所在。

本次研究结果显示：142例患儿血型分别为A型45例、B型46例、O型51例，共确诊31例，其中A型21例、B型10例、O型0例；三种血型患儿直接抗人免疫球蛋白试验、游离抗体试验、抗体释放试验中，血型为A型的新生儿溶血病患儿检出率最高，分别为11.11%、15.56%、71.11%，高于B型的8.70%、6.52%、47.83%；其余组别的不同检验项目结果，差异无统计学意义；确诊的患儿中，5例新生儿的溶血三项试验均为阳性，1例新生儿的直接抗人免疫球蛋白试验和游离抗体试验结果同为阳性，3例新生儿的直接抗人免疫球蛋白试验和抗体释放试验结果同为阳性，4例新生儿的游离抗体试验和抗体释放试验结果同为阳性，18例新生儿的抗体释放试验结果为阳性；就血型抗原的检出率而言，微柱凝胶法为100%，高于试管法的98.59%；就溶血三项试验的阳性率而言，微柱凝胶法分别为7.04%、7.75%、38.73%，高于试管法的4.93%、4.23%、14.79%。

综上所述，新生儿溶血病应用微柱凝胶法检测的临床价值显著，具有操作简单、特异性强、灵敏度高、准确度高等特点，对早期诊断、及时治疗以及降低病死率均具有重要意义。

参考文献:

[1]华月琴,丁小花. O型血孕产妇产前血清免疫球蛋白G抗体效价与新生儿溶血病的关系研究[J].现代医学与健康研究电子杂志,2023,7(1):104-105.

[2]钱姣,高秦盈,程淑凤,等.微柱凝胶技术在ABO新生儿溶血病患儿输血前检验中的应用价值[J].临床医学研究与实践,2020,5(34):130-131.

[3]夏帮坤,张杏杏,刘婷婷.溶血三项网织红细胞及血清总胆红素联合检测对新生儿溶血病的诊断价值[J].安徽医学,2022,43(11):1327-1328.

[4]段灵,陈萍,胡红兵.直接抗球蛋白试验和总胆红素与白蛋白比值联合检测在ABO新生儿溶血病导致的严重高胆红素血症中的临床意义[J].临床输血与检验,2022, 24(5):600-601.

[5]胡三强,杨帆,张鑫,等.微柱凝胶技术在ABO血型不合新生儿溶血病诊断及输血前检验中的应用分析[J].中国现代药物应用,2022,16(16):116-117.

[6]阿斯木古丽·艾比胡加,哈力亚·阿尔夏拜,邱芬,等. Rh缺失型D-杂合子致新生儿溶血病的血型血清学检测及家系调查[J].农垦医学,2022,44(4):332-336.

[7]姜丹丹,丁建娥,邵淑玲,等.孕晚期孕妇血管内皮钙黏蛋白水平和IgG抗A/B抗体效价对ABO型胎儿新生儿溶血病的产前诊断价值[J].现代妇产科进展,2022,31(5):352-353.

[8]张生吉,卓家余,孟晓蓉,等.探讨不同方法对新生儿溶血病诊断阳性率的影响[J].现代医药卫生,2021,37(18):3160-3161.

文章来源:曹丽幸,包杰,陈丹.微柱凝胶法对新生儿溶血病的检测价值分析[J].黑龙江医学,2024,48(20):2489-2491.