柳叶菜风毛菊Saussurea epilobioides Maxim.为菊科风毛菊属的多年生草本植物。风毛菊全世界约计400余种，广泛分布于欧洲、亚洲［1］，中国近200余种且多分布于西南和西北部地区。该属类药物作为民间常用草药，用于治疗风湿痹痛、妇科疾病、高原反应、腰疼腿痛等疗效较好［2］。风毛菊属植物具良好抗炎、抗肿瘤、抗菌等生物活性［3］，然而鲜有关于柳叶菜风毛菊的报道。为进一步拓展风毛菊属植物的化学成分，本实验运用多种现代分离技术手段对柳叶菜风毛菊进行化学成分研究，从其70%乙醇提取物中分析获得15个化合物，分别鉴定为hexadecane（1）、大 黄 素 甲 醚（2）、β-sitostenone（3）、芹 菜 素（4）、lumichrome（5）、芹 菜 素-7-O-β-D-葡 萄 糖 苷（6）、p-hydroxybenzaldehyde（7）、scopoletin（8）、1-ribityl-2,3-diketo-1,2,3,4-tetrahydro-6,7-dimethyl-quinoxaline（9）、syringicacid（10）、3-hydroxy-4-methoxybenzoic acid（11）、4-羟 基 苯 甲 酸（12）、1,2,4-苯 三 酚（13）、3,4-dihydroxybenzoic acid（14）、thymine（15）。其中，化合物2、9、15系首次从风毛菊属植物中分离得到。

1、仪器与材料

Brukeravance 600、Brukeravance 700核磁共振仪（德国Bruker公司）；Triple TOF 5600型质谱仪（美国ABSciex公司）；LC-XR20高压液相色谱仪（日本Shimadzu公司）；NP7005C半制备液相色谱仪（江苏汉邦科技有限公司）；YMC-ActusTriart C18色谱柱（深圳凯米斯科技有限公司）；200~300目正相色谱硅胶（青岛海洋化工厂）；色谱级乙腈、甲醇（赛默飞世尔科技有限公司）；其他试剂均为分析纯（安徽泽升科技有限公司）；水（超纯水）；MS304S分析天平（梅特勒-托利多仪器上海有限公司）。柳叶菜风毛菊药材于2021年10月采自甘肃定西，并经江西中医药大学钟国跃教授鉴定为菊科风毛菊属植物柳叶菜风毛菊Saussurea epilobioides Maxim.。

2、提取与分离取

14 kg的干燥柳叶菜风毛菊，在常温下浸泡24 h，加入10倍量体积分数为70%的乙醇溶液，回流提取2次（2.5 h/次），将提取液混合并浓缩，得浸膏1.5 kg。浸膏溶于水中，依次加入石油醚、乙酸乙酯萃取，得石油醚萃取物113.6 g、乙酸乙酯萃取物63.8 g、余下部分物质140.5 g。取余下部分物质置于大孔吸附树脂中，依次使用水以及3种体积分数分别为30%、60%、95%的乙醇溶液进行洗脱，最后获得水洗脱部位浸膏50.3 g，3种乙醇部位浸膏分别27.3 g、23.8 g和13.7 g。石油醚萃取物（113.6 g）经硅胶柱色谱，用石油醚-乙酸乙酯（80∶1~8∶1）梯度洗脱，得到化合物1（2.1 g）、化合物2（11.6 mg）和化合物3（11.2 mg）。95%乙醇部位浸膏（13.7 g），通过硅胶柱色谱分离，用甲醇-二氯甲烷（1∶80~1∶8）梯度洗脱，得到8个组分（Fr.1~Fr.8）。Fr.2经半制备HPLC纯化，得到化合物4（7.7 mg，tR=28 min）。Fr.5经半制备HPLC纯化，得到化合物5（5.4 mg，tR=16 min）与化合物6（8.9 mg，tR=58 min）。60%乙醇部位浸膏（23.8 g），使用硅胶柱色谱处理，合并后得到7个组分（Fr.a~Fr.g）。组分Fr.a经半制备HPLC纯化，分别得化合物7（7.8 mg，tR=17 min）、化合物8（6.7mg，tR=25 min）。化合物9（8.6 mg，tR=39 min）。取30%乙醇部位浸膏（27.3 g），通过硅胶柱色谱分离，以甲醇-二氯甲烷（1∶80~1∶2）梯度洗脱，合并得到6个组分（Fr.A~Fr.F）。组分Fr.A经硅胶柱色谱分离，以甲醇-二氯甲烷（1∶50~1∶20）梯度洗脱，得到化合物10（7.6 mg）、化合物11（6.1 mg）和化合物12（7.2 mg）。组分Fr.F经硅胶柱色谱分离得6个子流份，子流份5经半制备HPLC纯化，得到化合 物13（8.7 mg，tR=12 min）、化 合 物14（9.4 mg，tR=38 min）以及化合物15（8.1 mg，tR=17 min）。

3、结构鉴定化合物

1：白色结晶，分子式C26H54，HR-ESIMS m/z：365.422 6［M-H］-。1H-NMR（600 MHz，CDCl3）δ：0.92（6H，t，J=7.2 Hz，H-1，26），1.31（48H，m，H-2~25）；13C-NMR（150 MHz，CDCl3）δ：14.12（C-1，26），22.72（C-2，25），31.96（C-3，24），29.40（C-4，23），29.70（C-5，21，6，22）。经与文献［4］相对比，确定化合物1为二十六烷。化 合 物2：黄 色 固 体 状，分 子 式C16H12O5，HR-ESI-MS m/z：285.257 3［M+H］+。1H-NMR（600MHz，CDCl3）δ：7.11（1H，s，H-2），7.66（1H，d，J=1.74 Hz，H-4），7.40（1H，d，J=2.58 Hz，H-5），6.72（1H，d，J=2.58 Hz，H-7），2.45（3H，s，-Me），3.96（3H，s，-OMe）；13C-NMR（150 MHz，CDCl3）δ：166.58（C-1），162.53（C-3），106.80（C-4），120.32（C-5），148.12（C-6），124.54（C-7），165.22（C-8），190.84（C-9），182.91（C-10），55.54（-OMe），22.69（-Me）。经与文献［5］相对比，确定化合物2为Physcion。化合物3：白色固体状，分子式C29H50O，HRESI-MS m/z：413.363 4［M+H］+。1H-NMR（600 MHz，CDCl3）δ：5.74（1H，s，H-4），0.73（3H，s，H-18），1.20（3H，s，H-19），0.82（4H，m，H-21，26，27，29）；13C-NMR（150 MHz，CDCl3）δ ：35.70（C-1），33.88（C-2），123.74（C-4），171.77（C-5），32.97（C-6），32.06（C-7），34.00（C8），53.82（C-9），39.63（C-10），21.03（C-11），38.62（C-12），42.40（C-13），55.88（C-14），24.20（C-15），28.20（C-16），56.01（C-17），11.98（C-18），17.39（C-19），36.13（C-20），18.71（C-21），35.63（C-22），26.06（C-23），45.83（C-24），29.15（C-25），19.83（C-26），19.03（C-27），23.07（C-28），11.98（C-29），199.72（-C=O）。经与文献［6］相对比，确定化合物3为豆甾-4-烯-3-酮。化合物4：深黄色粉末，分子式C15H10O5，HRESI-MS m/z：269.045 7［M-H］-。1H-NMR（500 MHz，CD3OD）δ：7.81（2H，J=8.4 Hz，H-2'，6'），6.54（1H，s，H-3），6.87（2H，d，J=8.5 Hz，H-3'，5'），6.15（1H，d，J=1.8 Hz，H-6），6.42（1H，d，J=2 Hz，H-8）；13C-NMR（125MHz，CD3OD）δ：120.30（C-1'），164.82（C-2），128.11（C-2'，6'），115.69（C-3'，5'），182.57（C-4），161.98（C-4'），161.44（C-5），98.83（C-6），164.94（C-7），93.71（C-8），158.09（C-9）。经与文献［7］相对比，确定化合物4为Versulin。化合物5：浅黄绿色粉末，分子式C12H10N4O2，HR-ESI-MS m/z：241.073 4［M-H］-。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ ：7.89（1H，s，H-6），2.44（3H，s，7-CH3），2.47（3H，s，8-CH3），7.68（1H，s，H-9）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：150.82（C-2），161.91（C-4），130.36（C-4a），142.72（C-5a），129.61（C-6），137.71（C-7），20.06（7-Me），139.24（C-8），20.03（8-Me），126.3（C-9），145.94（C-9a）。经与文献［8］相对比，确定化合物5为二甲基异咯嗪。化合物6：淡黄色粉末，分子式C21H20O10，HRESI-MS m/z：431.099 5［M-H］-。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ ：5.04（1H，d，J=7.6 Hz，H-1''），7.92（2H，d，J=8.5 Hz，H-2'，6'），6.84（1H，s，H-3），6.90（2H，d，J=8.5 Hz，H-3'，5'），6.41（1H，overlapped，H-6），6.80（1H，s，H-8'）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ ：121.30（C-1'），99.95（C1''），164.71（C-2），129.04（C-2'，6'），73.53（C2''），103.48（C-3），116.47（C-3'，5'），77.61（C3''），182.42（C-4），161.54（C-4'），69.96（C-4''），162.00（C-5），76.86（C-5''），100.31（C-6），61.01（C-6''），163.38（C-7），95.24（C-8），157.38（C-9），105.77（C-10）。经与文献［9］相对比，确定化合物6为芹黄素-7-O-β-D-葡萄糖苷。化合物7：黄色油状物，分子式C7H6O2，HRESI-MS m/z：123.453 4［M+H］+。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.72（2H，d，J=8.5 Hz，H-2，6），6.79（2H，d，J=8.7 Hz，H-3，5），9.73（1H，s，-CHO）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：132.56（C-2，6），116.73（C-3，5），190.56（-CHO）。经与文献［10］相对比，确定化合物7为4-羟基苯甲醛。化合物8：白色结晶状，分子式C10H8O4，HRESI-MS m/z：191.049 4［M+H］+。1H-NMR（700 MHz，CD3OD）δ ：6.10（1H，d，J=9.1 Hz，H-3），7.76（1H，d，J=9.8 Hz，H-4），7.02（1H，s，H-5），3.81（1H，s，6-OCH3），6.68（1H，s，H-8）；13C-NMR（175 MHz，CD3OD）δ ：162.65（C-2），111.22（C3），144.73（C-4），106.04（C-5），151.52（C-6），146.15（C-7），103.36（C-8），149.52（C-9），108.91（C-10），55.44（-OMe）。 经 与 文 献［11］相对比，确定化合物8为东莨菪素。化合物9：白色结晶，分子式C15H20N2O6，HRESI-MS m/z：324.324 6［M+H］+。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：3.99（1H，d，J=13.7 Hz，H-1'），4.51（1H，dd，J=14.3，4.0 Hz，H-1'），4.04（1H，m，H-2'），3.53（2H，m，H-3'，4'），6.89（1H，s，H-5），3.60（1H，m，H-5'），3.40（1H，m，H-5'），7.30（1H，s，H-8），2.16（3H，s，H-11），2.19（3H，s，H-12）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ ：45.00（C-1'），156.23（C-2），68.59（C-2'），154.31（C-3），74.05（C-3'），73.17（C-4'），116.57（C-5），63.92（C-5'），131.70（C-6），131.38（C-7），117.00（C-8），125.36（C-9），123.86（C-10），19.74（C-11），19.20（C-12）。经与文献［12］相对比，确定化合物9为1-ribityl-2,3-diketo-1,2,3,4-tetrahydro6,7-dimethyl-quinoxaline。化合物10：白色粉末，分子式C9H10O5，HR-ESIMS m/z：221.042 1［M+Na］+。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ ：7.32（2H，s，H-2，6），3.87（6H，s，8，9-OCH3）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ ：121.25（C-1），106.81（C-2，6），55.30（3，5-OMe），147.33（C-3，5），140.56（C-4）。经与文献［13］相对比，确定化合物10为Syringate。化合物11：淡紫色粉末，分子式C8H8O4，HRESI-MS m/z：168.183 3［M+H］+。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.55（2H，overlapped，H-2，6），3.87（3H，s，4-OMe），6.80（1H，d，J=8.0 Hz，H-5）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ ：114.24（C-2），147.77（C-3），150.34（C-4），54.90（4-OMe），112.41（C-5），123.66（C-6）。 经 与 文 献［14］相对比，确定化合物11为异香兰酸。化合物12：浅黄色结晶，分子式C7H6O3，HRESI-MS m/z：139.255 7［M-H］-。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.84（2H，d，J=8.5 Hz，H-2，6），6.76（2H，d，J=8.3 Hz，H-3，5）；13C-NMR（150MHz，CD3OD）δ：121.75（C-1），131.53（C-2，6），115.14（C-3，5），161.78（C-4），169.06（C=O）。经与文献［15］相对比，确定化合物12为4-羟基苯甲酸。化合物13：褐色粉末，分子式C6H6O3，HRESI-MS m/z：125.024 4［M-H］-。1H-NMR（600 MHz，CD3OD）δ：7.40（2H，overlapped，H-3，5），6.77（1H，d，J=8.2 Hz，H-6）；13C-NMR（150 MHz，CD3OD）δ：122.32（C-1），144.53（C-2），114.21（C-3，5），149.62（C-4），116.30（C-6）。 经 与 文 献［16］相对比，确定化合物13为1,2,4-Trihydroxybenzene。化合物14：浅棕色结晶，分子式C7H6O4，HRESI-MS m/z：154.026 5［M-H］-。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.25（1H，overlapped，H-2），7.23（1H，d，J=8.3 Hz，H-5），6.72（1H，d，J=8.2 Hz，H-6）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ ：122.17（C-1，6），117.47（C-2），146.06（C-3），150.21（C-4），115.26（C-5），168.49（C-7）。经与文献［17］相对比，确定化合物14为protocatechuic acid。化合物15：无色粉末，分子式C5H6N2O2，HRESI-MS m/z：126.024 8［M+H］+。1H-NMR（600 MHz，DMSO-d6）δ：7.22（1H，s，H-6），1.69（3H，s，H-7）；13C-NMR（150 MHz，DMSO-d6）δ：151.92（C-2），165.36（C-4），108.07（C-5），138.58（C-6），12.24（C-7）。经与文献［18］相对比，确定化合物15为thymine。

4、讨论

本研究对柳叶菜风毛菊的70%乙醇提取物进行分离，得到15个化合物，包括3个苯丙素类、6个酚酸类、1个蒽醌类和5个其他类化合物,其中化合物2、9、15是首次从该属植物中分离得到。从分离得到的化合物可知，很多化合物具有良好的生物活性，如大黄素甲醚（化合物2）属于蒽醌类化合物，具有抗肿瘤、抗炎等活性［19］；芹菜素（化合物4）为黄酮类化合物，具有抗类风湿关节炎的作用［20］；东莨菪素（化合物8）为香豆素类化合物，具有抗肿瘤、抗骨质疏松、抗炎等活性［21］。此外，6个酚酸类化合物具有良好的抗氧化活性。本研究进一步丰富了柳叶菜风毛菊中化学成分的结构类型，为其质量标志物的发掘和质量评价标准的建立提供了科学依据。

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基金资助:国家重点研发计划项目(2019YFC1712302,2019YFC1712304);

文章来源:梁小云,刘杠杠,李志强,等.柳叶菜风毛菊化学成分研究[J].江西中医药,2025,56(02):63-66.