丽江黄芩ScutellarialikiangensisDiels为唇形科黄芩属植物，生于海拔2500～3100m的山地干燥灌丛或草坡上，主产于云南西北部，在当地常以黄芩地方品种进行使用，具有清热、消炎、解毒等功效[1,2,3],可用于热病发热、咳嗽、痢疾、吐血等症，其用药历史悠久，但关于化学成分和药理活性的研究不够深入。刘美兰等[4]从丽江黄芩中分离得到6个黄酮类化合物；刁红梅等[5]发现丽江黄芩与正品黄芩的化学成分具有一定差异，并且抗菌活性优于后者。本实验对丽江黄芩根部95%乙醇提取物的化学成分进行研究，利用多种色谱学手段进行分离，波谱学方法进行结构鉴定，从中分离鉴定了13个化合物，其中3、5～6、8、10～13为首次从该植物中分离得到。

1、材料

AV-400MHz型超导核磁共振谱仪(瑞士Bruker公司);Mat-95质谱仪(美国Finnigan公司);显微熔点仪(温度未校正)(日本Yanaco公司);柱层析硅胶(200～300、300～400目)、薄层层析硅胶H(青岛海洋化工厂);SephadexLH-20柱(瑞典Pharmacia公司);氘代试剂(美国CIL公司)。所用试剂为分析纯(中国天津市化学试剂一厂)或工业纯(云南汕滇药业)。

丽江黄芩于2018年采自云南省丽江市，经云南中医药大学张洁副教授鉴定为唇形科植物丽江黄芩ScutellarialikiangensisDiels的根。

2、提取与分离

取丽江黄芩根的粗粉0.75kg,以8倍量90%乙醇加热回流提取4次，回收溶剂得醇提浸膏(178.9g),加入适量水混悬至悬浮液，用乙酸乙酯萃取3次，合并3次萃取液，回收溶剂，得浸膏43.5g,记为Fr.A;剩余水溶液继续用正丁醇萃取3次，合并3次萃取液，回收溶剂，得浸膏66.8g,记为Fr.B。

Fr.A组分经硅胶柱，以石油醚、石油醚-乙酸乙酯(100∶1～5∶1)、三氯甲烷-甲醇(100∶1～1∶1)梯度洗脱，经TLC检查合并划分为9个流分A-1～A-9。A-5流分经硅胶柱，石油醚-乙酸乙酯(40∶1～5∶1)梯度洗脱得8个流分，流分3经硅胶柱，石油醚-乙酸乙酯(40∶1)洗脱纯化，重结晶分离得化合物1(18.7mg);流分6经硅胶柱，石油醚-乙酸乙酯(30∶1)洗脱纯化，再经SephadexLH-20柱纯化，丙酮洗脱分离得化合物7(21.3mg);流分8经硅胶柱，环己烷-乙酸乙酯(20∶1)洗脱纯化，再经SephadexLH-20柱纯化，丙酮洗脱分离得化合物2(18.5mg)。A-8流分经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(60∶1～5∶1)梯度洗脱得6个流分，流分2经硅胶柱，石油醚-乙酸乙酯(40∶1)洗脱纯化，再经SephadexLH-20柱纯化，三氯甲烷-甲醇(3∶2)洗脱分离得化合物12(12.6mg);流分4经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(10∶1)洗脱纯化和重结晶，分离得化合物3(22.6mg);流分6经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(10∶1)洗脱，再经SephadexLH-20柱纯化，三氯甲烷-甲醇(3∶2)洗脱分离得化合物8(14.6mg)。

Fr.B组分经硅胶柱，以三氯甲烷、三氯甲烷-甲醇(100∶1～1∶1)梯度洗脱，经TLC检查合并划分为9个流分B-1～B-9。B-2流分经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(100∶1～20∶1)梯度洗脱得7个流分，流分3经硅胶柱三氯甲烷-甲醇(15∶1)洗脱，再经SephadexLH-20柱纯化，丙酮洗脱分离得化合物13(9.8mg);流分5经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(10∶1)洗脱纯化，重结晶分离得化合物4(16.1mg)。B-6流分经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(40∶1～1∶1)梯度洗脱得5个流分，流分1经硅胶柱三氯甲烷-甲醇(15∶1)洗脱纯化，再经SephadexLH-20柱纯化，三氯甲烷-甲醇(3∶2)洗脱分离得化合物5(13.8mg);流分2经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(15∶1)洗脱纯化，再经SephadexLH-20柱纯化，丙酮洗脱分离得化合物9(15.2mg);流分3经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(10∶1)洗脱纯化，重结晶分离得化合物10(19.4mg)。B-8流分经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(50∶1～10∶1)梯度洗脱得9个流分，流分4经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(20∶1)洗脱纯化，重结晶分离得化合物11(10.3mg);流分6经SephadexLH-20柱纯化三氯甲烷-甲醇(3∶2)洗脱，再经硅胶柱，三氯甲烷-甲醇(5∶1)洗脱纯化和重结晶，分离得化合物6(8.9mg)。

3、结构鉴定

化合物1:黄色针状结晶(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:284.3[M]+,分子式C16H12O5。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.51(1H,s,5-OH),10.80(1H,s,7-OH),8.08(2H,d,J=6.5Hz,H-2′,6′),7.62(3H,m,H-3′～5′),6.99(1H,s,H-3),6.32(1H,s,H-6),3.87(3H,s,8-OCH3);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.0(C-2),105.0(C-3),182.0(C-4),156.2(C-5),99.1(C-6),157.3(C-7),127.7(C-8),150.0(C-9),103.7(C-10),130.8(C-1′),126.2(C-2′,6′),129.2(C-3′,5′),132.0(C-4′),61.0(8-OCH3)。以上数据与文献[6]基本一致，故鉴定为汉黄芩素。

化合物2:黄色结晶(丙酮),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:270.2[M]+,分子式C15H10O5。1H-NMR(400MHz,C5D5N)δ:7.92(2H,m,H-2′,6′),7.28(3H,m,H-3′～5′),7.20(1H,s,H-3),6.57(1H,s,H-8);13C-NMR(100MHz,C5D5N)δ:164.5(C-2),104.9(C-3),183.1(C-4),147.0(C-5),130.8(C-6),155.2(C-7),95.3(C-8),151.2(C-9),105.2(C-10),133.5(C-1′),127.3(C-2′,6′),129.6(C-3′,5′),133.0(C-4′)。以上数据与文献[7]基本一致，故鉴定为黄芩素。

化合物3:黄色粉末(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:446.4[M]+,分子式C21H18O11。1H-NMR(400MHz,C5D5N)δ:8.07(2H,m,H-2′,6′),7.57(3H,m,H-3′～5′),7.04(1H,s,H-3),6.84(1H,s,H-8),5.23(1H,d,J=7.2Hz,H-1″),4.04～3.18(6H,m,H-2″～6″);13C-NMR(100MHz,C5D5N)δ:163.5(C-2),108.2(C-3),183.8(C-4),152.3(C-5),130.8(C-6),155.5(C-7),95.0(C-8),153.0(C-9),103.7(C-10),132.6(C-1′),127.5(C-2′,6′),131.0(C-3′,5′),133.2(C-4′),100.8(C-1″),75.1(C-2″),77.3(C-3″),72.8(C-4″),77.6(C-5″),170.8(C-6″)。以上数据与文献[8]基本一致，故鉴定为黄芩苷。

化合物4:黄色粉末(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:254.2[M]+,分子式C15H10O4。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.85(1H,s,5-OH),10.93(1H,s,7-OH),8.05(2H,d,J=8.0Hz,H-2′,6′),7.62(3H,m,H-3′～5′),6.95(1H,s,H-3),6.56(1H,d,J=2.1Hz,H-8),6.77(1H,d,J=2.1Hz,H-6);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.6(C-2),105.7(C-3),182.2(C-4),161.7(C-5),99.4(C-6),164.8(C-7),94.6(C-8),158.0(C-9),104.4(C-10),131.2(C-1′),126.9(C-2′,6′),129.6(C-3′,5′),132.4(C-4′)。以上数据与文献[9]基本一致，故鉴定为白杨素。

化合物5:白色针状结晶(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:430.4[M]+,分子式C21H18O10。1H-NMR(400MHz,C5D5N)δ:7.92(2H,m,H-2′,6′),7.48(3H,m,H-3′～5′),7.05(1H,s,H-3),6.94(1H,d,J=1.6Hz,H-8),6.11(1H,d,J=1.6Hz,H-6),5.35(1H,d,J=7.2Hz,H-1″),4.73～4.47(4H,m,H-2″～5″);13C-NMR(100MHz,C5D5N)δ:164.3(C-2),110.1(C-3),183.4(C-4),163.0(C-5),100.2(C-6),163.6(C-7),94.7(C-8),156.1(C-9),106.5(C-10),133.2(C-1′),126.7(C-2′,6′),129.3(C-3′,5′)133.8(C-4′),101.8(C-1″),74.6(C-2″),77.9(C-3″),73.4(C-4″),78.1(C-5″),170.2(C-6″)。以上数据与文献[8]基本一致，故鉴定为白杨素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物6:白色针状结晶(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:430.4[M]+,分子式C21H18O10。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:13.52(1H,s,5-OH),8.19(2H,m,H-2′,6′),7.62(1H,d,J=7.9Hz,H-4′),7.57(2H,d,J=7.9Hz,H-3′,5′),7.01(1H,s,H-3),4.78(1H,d,J=9.9Hz,H-1),4.73(1H,d,J=9.6Hz,H-1″),3.90(1H,m,H-2),3.86(1H,m,H-2″,4″),3.78(1H,m,H-6),3.67(1H,m,H-5″),3.56(1H,m,H-6),3.45(1H,m,H-4),3.31(1H,m,H-3),3.27(1H,m,H-5),3.12(1H,m,H-3″);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:163.5(C-2),104.8(C-3),182.4(C-4),157.1(C-5),108.3(C-6),161.2(C-7),105.3(C-8),155.2(C-9),104.0(C-10),131.0(C-1′),129.2(C-2′,6′),126.9(C-3′,5′)132.0(C-4′),74.1(C-1″),69.6(C-2″),72.8(C-3″),68.4(C-4″),70.1(C-5″),73.2(C-1),70.9(C-2),78.9(C-3),60.4(C-4),81.9(C-5),61.2(C-6)。以上数据与文献[10]基本一致，故鉴定为白杨素-6-C-α-L-阿拉伯吡喃糖基-8-C-β-D-葡萄吡喃糖苷。

化合物7:黄色粉末(氯仿),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:284.3[M]+,分子式C16H12O5。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.98(1H,s,5-OH),7.87(2H,dd,J=8.0,1.7HzH-2′,6′),7.52(3H,m,H-3′～5′),6.67(1H,s,H-3),6.62(1H,s,H-8),4.03(3H,s,6-OCH3);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:164.4(C-2),106.2(C-3),183.3(C-4),153.5(C-5),132.1(C-6),155.4(C-7),93.7(C-8),152.3(C-9),105.5(C-10),130.6(C-1′),126.5(C-2′,6′),129.3(C-3′,5′),131.6(C-4′),61.1(6-OCH3)。以上数据与文献[11]基本一致，故鉴定为千层纸素A。

化合物8:白色针状结晶(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:460.4[M]+,分子式C22H20O11。1H-NMR(400MHz,C5D5N)δ:7.83(2H,d,J=7.5Hz,H-2′,6′),7.60(3H,m,H-3′～5′),6.59(1H,s,H-3),6.12(1H,s,H-8),4.65(1H,d,J=7.4Hz,H-1″),4.51-4.12(4H,m,H-2″～5″),3.78(3H,s,6-OCH3);13C-NMR(100MHz,C5D5N)δ:161.6(C-2),100.9(C-3),183.0(C-4),153.6(C-5),134.1(C-6),156.2(C-7),94.9(C-8),157.2(C-9),104.9(C-10),132.2(C-1′),123.0(C-2′,6′),130.2(C-3′,5′),133.7(C-4′),101.0(C-1″),74.1(C-2″),77.6(C-3″),70.4(C-4″),77.9(C-5″),169.2(C-6″),60.7(6-OCH3)。以上数据与文献[8]基本一致，故鉴定为千层纸素A-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物9:黄色粉末(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:256.3[M]+,分子式C12H16O6。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.99(1H,s,5-OH),10.83(1H,s,2′-OH),7.86(1H,dd,J=8.5,1.8Hz,H-6′),7.39(1H,t,J=9.8Hz,H-4′),7.05(1H,d,J=8.5Hz,H-3′),7.04(1H,s,H-3),6.99(1H,d,J=8.5Hz,H-5′),6.57(1H,s,H-8),3.76(3H,s,6-OCH3);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:161.3(C-2),108.5(C-3),182.3(C-4),152.6(C-5),131.3(C-6),157.4(C-7),94.2(C-8),152.6(C-9),104.1(C-10),117.3(C-1′),156.7(C-2′),117.0(C-3′),132.7(C-4′),119.4(C-5′),128.5(C-6′),59.9(6-OCH3)。以上数据与文献[12]基本一致，故鉴定为韧黄芩素Ⅱ。

化合物10:黄色粉末(甲醇),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:476.4[M]+,分子式C22H20O12。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:12.89(1H,s,5-OH),10.85(1H,s,2′-OH),7.89(1H,dd,J=8.0,1.7Hz,H-6′),7.42(1H,ddd,J=8.0,7.4,1.7Hz,H-4′),7.11(1H,s,H-3),7.08(1H,d,J=7.4Hz,H-3′),7.06(1H,s,H-8),7.02(1H,d,J=8.0Hz,H-5′),5.59(1H,d,J=4.4Hz,2″-OH),5.48(1H,d,J=7.4Hz,H-1″),5.34(2H,dd,J=7.2,2.2Hz,3″,4″-OH),4.20～3.38(4H,m,H-2″～5″),3.77(3H,s,6-OCH3);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:162.0(C-2),108.8(C-3),182.5(C-4),152.5(C-5),132.4(C-6),156.0(C-7),93.9(C-8),152.3(C-9),105.9(C-10),117.1(C-1′),156.9(C-2′),117.1(C-3′),132.9(C-4′),119.3(C-5′),128.5(C-6′),99.3(C-1″),72.8(C-2″),75.6(C-3″),71.2(C-4″),75.2(C-5″),170.1(C-6″),60.3(6-OCH3)。以上数据与文献[12]基本一致，故鉴定为韧黄芩素Ⅱ-7-O-β-D-吡喃葡萄糖醛酸苷。

化合物11:淡黄色粉末(氯仿),HCl-Mg反应呈阳性，EI-MSm/z:548.6[M]+,分子式C26H28O13。1H-NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:13.52(1H,s,5-OH),8.09(2H,m,H-2′,6′),7.05(2H,d,J=8.5Hz,H-3′,5′),7.01(1H,s,H-3),5.03(1H,m,H-1),4.11～3.05(4H,m,H-2″～5″),3.84～3.05(4H,m,H-2″～5″);13C-NMR(100MHz,DMSO-d6)δ:164.2(C-2),104.0(C-3),182.5(C-4),157.1(C-5),108.3(C-6),163.5(C-7),105.3(C-8),152.4(C-9),104.8(C-10),120.5(C-1′),129.1(C-2′),116.5(C-3′),161.2(C-4′),116.5(C-5′),129.1(C-6′),104.1(C-1″),73.8(C-2″),69.1(C-3″),81.9(C-4″),69.6(C-5″),70.1(C-6″),76.7(C-1),69.6(C-2),74.1(C-3),68.4(C-4″),79.3(C-5),61.2(C-6)。以上数据与文献[13]基本一致，故鉴定为芹菜素-6-C-β-D-吡喃木糖基-8-C-β-D-吡喃半乳糖苷。

化合物12:黄色粉末(氯仿),EI-MSm/z:236.3[M]+,分子式C10H20O6。1H-NMR(400MHz,CD3OD)δ:3.91(1H,d,J=9.6Hz,H-3′),3.80(1H,m,H-5′),3.74(1H,dd,J=11.8,3.2Hz,H-4′),3.74(1H,dd,J=11.2,1.0Hz,H-6′),3.69(1H,d,J=12.0Hz,H-2′),3.66(1H,d,J=12.1Hz,H-1′),3.65(1H,dd,J=12.0,2.0Hz,H-6),3.57(2H,m,H-1),1.54(2H,m,H-2),1.47(2H,m,H-3),0.98(3H,t,J=7.2Hz,H-4);13C-NMR(100MHz,CD3OD)δ:61.8(C-1),33.5(C-2),20.7(C-3),14.5(C-4),63.7(C-1′),101.7(C-2′),70.8(C-3′),71.7(C-4′),71.2(C-5′),65.3(C-6′)。以上数据与文献[14]基本一致，故鉴定为正丁基-O-β-D-吡喃果糖苷。

化合物13:无色油状液体，EI-MSm/z:334.6[M]+,分子式C20H30O4。1H-NMR(400MHz,CDCl3)δ:7.70(2H,dd,J=3.3,5.7Hz,H-3,6),7.51(2H,dd,J=3.3,5.7Hz,H-4,5),4.29(4H,t,J=6.7Hz,H-2′,2″),1.74～1.66(4H,m,H-3′,3″),1.46～1.38(4H,m,H-4′,4″),1.23(4H,s,H-5′,5″),0.94(6H,t,J=7.4Hz,H-6′,6″);13C-NMR(100MHz,CDCl3)δ:132.6(C-1,2),129.1(C-3,6),131.3(C-4,5),167.9(C-1′,1″),65.8(C-2′,2″),30.8(C-3′,3″),29.9(C-4′,4″),19.4(C-5′,5″),13.9(C-6′,6″)。以上数据与文献[15]基本一致，故鉴定为邻苯二甲酸二正戊酯。

4、讨论

丽江黄芩与滇黄芩同为云南民族药的药用资源，主要含有黄酮苷元(化合物3、5～6、8、11)和黄酮苷(化合物1～2、4、7、9～10),化学成分较为相似，但丽江黄芩还含有非黄酮(化合物12～13),其中3、5～6、8、10～13为首次从该植物中分离得到。近年来研究表明，黄酮类具有抗氧化、抗炎、抗菌、调节脂代谢、抗肿瘤等作用，且毒性较小，已成为研究热点[16,17,18,19,20];本实验发现，化合物1具有较好的抗炎、抗肿瘤活性[21],2具有抗肿瘤、抗菌、抗炎、保肝、抗糖尿病等多种药理活性[22],3具有抗炎、抗凋亡、抗氧化、保护神经元等药理活性[23],4具有抗炎、抗氧化、抗病毒、抗癌等药理活性[24],7具有抗炎、抗肿瘤、抗病毒、保护血管等药理活性[25]。本研究探寻丽江黄芩的化学成分，明确其药理活性研究基础，阐明其用药依据，可为其他民族药的考察奠定理论基础。

参考文献:

[1]杨本雷,于惠祥.中国舞族药学[M].昆明:云南民族出版社,2004:78.

[2]中国科学院《中国植物志》编辑委员会.中国植物志(第六十五卷)[M].北京:科学出版社,2002:192.

[3]郑进,张超,钱子刚.云南民族医药大辞典[M].上海:上海科学技术出版社,2019:2673.

[4]刘美兰,李曼玲.中药丽江黄芩黄酮成分的研究[J].中草药,1988,19(2);2-4.

[5]刁红梅,吴秀蓉,肖朝江,等.三种滇西地区药用黄苓属植物与正品黄芩抗菌活性研究[J].中国民族民间医药,2020,29(12)37-41.

[6]季鹏,王国凯,刘劲松,等.马兰中的五个酚性化合物[J].天然产物研究与开发,2014,26(2):55-21459.

[7]段绪红,张学文,秦梦,等.东亚小金发藓化学成分研究[J].中草药,2020,51(15):3863-3868.

[8]付胜男,虎春艳,刘海鸥,等.滇黄芩地上部分化学成分的分离鉴定[J].中国实验方剂学杂志,2018,24(10):93-97.

[9]向康林,韩庆通,赵琳,等.粘毛黄芩全草的化学成分研究[J].中草药,2019,50(24):5917-5923.

[10]姚雪,程云霞,陈龙,等.黄芩化学成分的研究[J].中成药,2020,42(11):2935-2940.

[11]夏少立,曹悦,李庆林,等.新疆—枝蒿的化学成分研究[J].中草药,2020,51(13):3393-3398.

[12]韩庆通,肖凯,蔡云,等.念珠根黄芩中的黄酮类化合物[J].中国中药杂志,2017,42(9):1699-1703.

[13]梁东,刘彦飞,郝志友,等.珍珠菜中黄酮及Megastigmane类化学成分研究[J].天然产物研究与开发,2015,27(7):1171-1175;1139.

[14]王涵,司函瑞,焦玉凤,等.大白菜的化学成分研究[J].天然产物研究与开发,2020,32(8):1343-1347.

[15]廖铁松,沈云亨,李影,等.巴西甘菊花化学成分研究(Ⅱ)[J].中药材,2019,42(11):2551-2556.

[22]朱亚南,杨七妹,张硕,等.黄芩苷与黄芩素药理作用及机制研究进展[J.时珍国医国药,2020,31(4):921-925.

[23]秦少坤,平鑫,芦晔,等.黄芩苷抗神经元损伤作用机制的研究[J].中成药,2020,42(9):2412-2416.

文章来源：林玉萍,付胜男,王蒙蒙,李欣坪,乔雪,华燕.丽江黄芩根化学成分的研究[J].中成药,2021,43(09):2399-2403.