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凉山州某地HIV-1感染育龄妇女获得性耐药情况及相关因素分析

2024-06-21 87 上传者：管理员

摘要：目的分析凉山地区某县HIV-1感染育龄妇女获得性耐药(ADR)情况及其相关因素。方法以2023年1-9月在凉山地区某县治疗随访的105例HIV-1感染育龄妇女为研究对象，采集并分离血液标本，将标本用于HIV-1 RNA和HIV-1 DNA定量检测以及HIV-1基因型耐药检测。结果 105例研究对象中，HIV-1 RNA以0～50 copies/mL为主(69.5%),HIV-1 DNA以101～1 000 copies/106 cells为主(67.6%),HIV-1亚型以CRF07＿BC重组型为主(88.6%)，初始cART方案以2 NRTIs+1 NNRTIs为主(90.5%)。105例研究对象中，21例发生ADR(20.0%)，其中HIV-1 RNA基因型耐药检出发生ADR的11例(10.5%),HIV-1 DNA基因型耐药检出发生ADR的10例(9.5%)。105例研究对象中，32例(30.5%)出现耐药突变位点。与NNRTIs有关的耐药突变有9例(8.6%),K103KN/N/S是主要耐药突变位点；与NRTIs有关的耐药突变有3例(2.9%),M184MV/MI/V是主要耐药突变位点；与整合酶抑制剂(INSTIs)有关的耐药突变有7例(6.7%),A128T是主要耐药突变位点；11例(10.5%)同时针对NNRTIs和NRTIs出现耐药突变；1例同时针对NNRTIs、NRTIs及INSTIs出现耐药突变；1例同时针对NNRTIs及INSTIs出现耐药突变。无针对PIs的耐药突变出现。经单因素Logistic回归分析显示cART时间、年龄、初始cART方案、HIV-1感染途径及HIV-1亚型与ADR发生无统计学关联。结论凉山地区某县HIV-1感染育龄妇女ADR发生率与凉山地区总体耐药率接近，但耐药突变位点复杂多样，耐药突变导致的耐药主要以单纯NNRTIs耐药、NRTIs和NNRTIs同时耐药为主，而NNRTIs和NRTIs作为cART的一线用药，在HIV治疗中占据重要地位，因此需加强耐药监测，进一步提升治疗质量。

关键词：
HIV/AIDS患者
抗反转录病毒治疗
育龄妇女
艾滋病病毒
获得性耐药
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c ART的应用，极大降低了HIV/AIDS患者相关疾病的发病率和病死率[1]。同时，由于c ART广泛使用和HIV-1自身变异性强，导致HIV-1耐药情况逐渐增多，是治疗和预防艾滋病的巨大挑战[2]。因此，监测各个地区HIV-1耐药成为一种治疗策略[3]。

研究表明，近年来凉山地区HIV-1耐药率呈上升趋势[4]。获得性耐药（Acquired drug resistance,ADR）是指个体接受c ART后发生的耐药[5]。HIV-1感染育龄妇女作为一个特殊群体，性行为活跃，且有通过怀孕、分娩、哺乳等途径传播HIV-1可能。目前对于HIV-1感染育龄妇女ADR研究较少，而了解这部分人群耐药情况不仅关系到感染者自身的身心健康，也影响一个地区和民族的人口质量[6]。本研究旨在分析凉山地区某县HIV-1感染育龄妇女ADR情况，为了解当地HIV-1耐药株的传播及育龄妇女c ART方案的制定提供依据。

1、对象与方法

1.1 研究对象

2023年1-9月在凉山地区某县随访的105例HIV-1感染者。纳入标准：1）年龄15～49岁女性，对于小于18岁的患者在取得其监护人同意后进行数据收集；2）接受c ART≥6个月；3)HIV-1RNA或HIV-1 DNA pol区基因扩增成功；4）自愿参加本研究；排除标准：临床资料不完整病例。本研究经越西县第一人民医院医学伦理委员会批准（编号：KY202212-02）。

1.2 方法

1.2.1 临床资料获取

人口学资料和c ART相关资料通过查阅研究对象的门诊或住院病历获取。

1.2.2 标本采集

用EDTA K2抗凝管采集研究对象外周静脉全血10 m L，分离血浆和血细胞并冻存于-80℃超低温冰箱待检。将血浆和血细胞标本送至东莞微量精准医学检验实验室进行HIV-1 RNA和HIV-1 DNA定量检测以及HIV-1基因型耐药检测。本研究使用的所有试剂均由广州海力特生物科技有限公司生产，技术服务由东莞微量精准医学检验实验室提供。

1.2.3 HIV-1 RNA定量检测

使用HIV-1 RNA核酸提取纯化试剂盒（货号：SUPI-1010-1）提取血浆HIV-1 RNA；采用PCR法对血浆HIV-1 RNA进行定量检测。

1.2.4 HIV-1 DNA定量检测

使用HIV-1 DNA核酸提取纯化试剂盒（货号：SUPI-1015）提取血细胞HIV-1 DNA；采用PCR法对血细胞HIV-1 DNA进行定量检测。

1.2.5 HIV-1基因型耐药检测

将提取的血浆HIV-1 RNA和血细胞HIV-1 DNA采用PCR法扩增HIV-1 pol区基因，其中扩增蛋白酶区与反转录酶区的片段长度与整合酶区的片段长度均为1 100 bp左右；使用Sanger测序法对PCR扩增产物进行测序；使用美国斯坦福大学HIV耐药数据库进行HIV-1亚型鉴定、耐药数据分析和解释，确定耐药突变位点及对不同药物耐药程度。根据评分标准将耐药程度分为：敏感、潜在耐药、低度耐药、中度耐药和高度耐药。根据2014年WHO指南推荐意见[7]，将符合低度耐药、中度耐药或高度耐药中的任意一种情况判定为耐药。本研究对所有研究对象均进行了HIV-1 RNA基因型耐药检测，若HIV-1 RNA基因型耐药检测成功，则以HIV-1 RNA基因型耐药检测结果为准；若HIV-1 RNA基因型耐药检测失败，则再次进行HIV-1 DNA基因型耐药检测，并以HIV-1 DNA基因型耐药检测结果为准。

1.3 统计分析

采用SPSS 27.0软件进行数据整理和统计分析。计数资料采用频数和百分数表示，年龄及c ART时间采用M(P25,P75）描述。采用单因素Logistic回归分析识别是否发生ADR相关的变量，所有检验均采用双侧检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1 基本信息

105例研究对象，平均年龄35.0(31.0,40.0）岁，c ART时间4.0(3.0,6.0）年，经性途径感染HIV-1占81.9%，初始c ART方案以2 NRTIs+1NNRTIs为主的占90.5%,CRF07＿BC重组型占88.6%，见表1。

表1 研究对象基本信息及ADR单因素Logistic回归分析

对105例研究对象均进行HIV-1 RNA及HIV-1DNA检测，69.5%的研究对象HIV-1 RNA为0～50 copies/m L,67.6%的研究对象HIV-1 DNA为101～1 000 copies/106 cells，见表2。

2.2 HIV-1耐药突变位点及耐药情况分析

105例研究对象中，23例成功进行了HIV-1 RNA基因型耐药检测，其最低HIV-1 RNA为51 copies/m L。82例成功进行了HIV-1 DNA基因型耐药检测，其最低HIV-1 DNA为25 copies/106 cells。105例研究对象中，32例出现耐药突变位点，结果有4例耐药突变导致潜在耐药，有21例耐药突变导致不同程度的ADR发生。根据WHO指南[7]，只将21例不同程度ADR的患者纳入耐药情况分析，因此，总体ADR发生率为20.0%(21/105）。在21例ADR研究对象中，HIV-1 RNA基因型耐药检出发现11例（10.5%,11/105),HIV-1 DNA基因型耐药检出发现10例（9.5%,10/105）。关于32例出现耐药突变位点的研究对象，与NNRTIs有关的耐药突变有9例（8.6%,9/105),K103KN/N/S是主要的耐药突变位点，EFV和NVP是主要的耐药药物，9例中有3例导致潜在耐药。与NRTIs有关的耐药突变有3例（2.9%,3/105),M184MV/MI/V是主要的耐药突变位点，FTC和3TC是主要的耐药药物；与整合酶抑制剂（Integrase inhibitors,INSTIs）有关的耐药突变有7例（6.7%,7/105),A128T是主要耐药突变位点，均为次要突变，未发现由此导致的耐药。有11例（10.5%,11/105）同时针对NNRTIs和NRTIs出现耐药突变，11例中有1例导致潜在耐药；有1例（1.0%,1/105）同时针对NRTIs、NNRTIs及INSTIs出现耐药突变，有1例（1.0%）同时针对NNRTIs及INSTIs同时出现耐药突变。在105例研究对象中，与NNRTIs有关的耐药突变位点累计有22例（21.0%,22/105），与NRTIs有关的耐药突变位点累计有14例（13.3%,14/105），与IN-STIs有关的耐药突变位点累计有9例（8.6%,9/105）。未发现针对PIs的耐药情况（表3）。各耐药突变位点分布情况见图1。

表2 研究对象HIV病毒载量基本信息

2.3 发生ADR相关因素分析

以是否发生ADR为因变量，依次以c ART时间、年龄、初始c ART方案、HIV-1感染途径和HIV-1亚型为自变量进行单因素Logistic回归分析。按P<0.05纳入标准，结果显示c ART时间、年龄、初始c ART方案、HIV-1感染途径及HIV-1亚型与是否发生ADR无统计学关联，见表1。

3、讨论

本研究中HIV-1亚型主要为CRF07＿BC重组型，这与董敖渤等、刘梅等[8,9]报道结果一致。本研究HIV-1耐药主要以NNRTIs和NRTIs为主，这与既往研究结果HIV-1耐药多以NNRTIs和NRTIs为主结论相符[10,11]，但与张燕等[4]报道的四川地区耐药以NNRTIs为主的结果有所不同，可能原因是本研究对象仅为育龄妇女，而张燕等[4]报道的研究对象为四川所有年龄段的HIV-1感染者。根据既往四川地区报告的结果[12,13]显示男性HIV-1感染者占比多，老年感染者日渐增多，与本研究限定的研究对象仅为育龄女性不同。同时，杨薇等[14]对凉山州HIV-1感染者随访检测的研究表明，女性较男性HIV-1感染者随访检测率更高，这也使得女性群体在随访过程中可能更早发现是否发生耐药，这些因素都可能与育龄妇女较四川全年龄段人群在主要耐药药物上出现差异相关。

当HIV-1 RNA处于较低水平或低于检出下限时，使用HIV-1 RNA进行基因型耐药检测成功率低，可采用HIV-1 DNA进行基因型耐药检测[15]，这与本团队前期研究结果一致[16]，故本研究针对HIV-1 RNA在50～1 000 copies/m L和HIV-1 RNA<50copies/m L同样进行了耐药检测。既往研究已证实，与NNRTIs有关的耐药突变中，K103 N/KN突变可降低HIV-1感染者对EFV和NVP的敏感性，导致EFV和NVP耐药[17,18,19]。与NRTIs有关的耐药突变中，M184MV/MI/V突变主要导致恩曲他滨和3TC耐药[20]，这与本研究结论一致。与INSTIs有关的耐药突变主要为A128T，但未导致实际耐药发生，该结果与既往研究报道的整合酶区突变多为非多态性突变，不降低INSTIs敏感性结论相符[21,22]。本研究部分耐药结果是通过HIV-1 DNA进行检测的，但需要注意的是HIV-1 DNA基因型耐药是否会进展成HIV-1 RNA基因型耐药还需要进一步验证。

图1 各耐药突变位点的分布情况

表3 耐药突变位点及耐药程度分析（n=105)

本研究中，HIV-1感染育龄妇女总体ADR为20.0%，与凉山地区耐药率（27.7%）相近[4]。既往有研究报道[23]c ART时间是ADR的重要相关因素，c ART时间越长，发生ADR的风险越高，这与本研究结果不一致，可能原因为本研究样本较少，导致结果不具明显代表性。另外，本研究并未发现HIV-1感染途径及初始治疗方案等与ADR的相关，但袁丹等[24]报道了四川省HIV-1耐药与感染途径、初始治疗方案等相关，这与本研究结果亦有所差异。

本研究具有一定局限性，首先，本研究采用Sanger测序法在低频率耐药突变时，灵敏度较低。其次，对于HIV-1 RNA基因型耐药检测失败患者可以进行HIV-1 DNA基因型耐药检测，虽已有相关报道证实HIV-1 DNA基因型耐药检测在病毒载量低的患者中，其灵敏度较HIV-1 RNA耐药检测更高[15,16]，但其临床参考意义还需更多研究进行验证。

综上，凉山地区某县HIV-1感染育龄妇女ADR发生率与凉山地区耐药率相近，耐药突变位点复杂多样，耐药突变导致的耐药主要以单纯NNRTIs耐药、NRTIs和NNRTIs同时耐药为主，而NNRTIs和NRTIs作为c ART的一线用药，这两类药物发生耐药将加大抗病毒治疗难度。因此，建议加强艾滋病健康宣教的同时，加强HIV-1耐药监测，从而更有利于当地c ART开展。同时由于HIV-1感染育龄妇女的特殊性，尽早发现HIV-1耐药并针对性调整治疗方案，可进一步提高HIV-1感染育龄妇女c ART成功率，降低HIV-1经母婴传播风险。

参考文献:

[1]曹汴川,黄喆,肖科,等.获得性免疫缺陷综合征患者合并机会性感染的淋巴细胞亚群和HIV-1病毒载量的特点分析[J].中国感染与化疗杂志,2020, 20(5):481-486.

[3]林俊潇,王红珠,李聪聪,等.治疗失败的HIV感染者HIV-1亚型及耐药突变位点分析[J].上海预防医学,2023, 35(3):224-228.

[4]张燕,李一平,周玚,等. 2016-2019年四川地区HIV-1抗病毒治疗患者治疗效果及耐药性分析[J].国际检验医学杂志,2022, 43(8):973-978.

[6]冯颖,李月飞,何倩,等.育龄期女性HIV感染者心理韧性､歧视感知､社会资本影响因素分析[J].中国优生与遗传杂志,2023, 31(5):901-907.

[8]董敖渤,肖琳,梁姝,等.凉山彝族自治州HIV/AIDS抗病毒治疗前HIV-1耐药情况及其影响因素分析[J].中华流行病学杂志,2019, 40(6):648-653.

[9]刘梅,周仙,丁苹,等.凉山州某县抗病毒治疗失败的HIV/AIDS患者耐药特点分析[J].国外医药(抗生素分册),2023,44(2):136-140.

[10]熊丽,郜敏,李玲等.2017-2021年广元市HIV-1病毒学抑制失败感染者耐药情况分析[J].预防医学情报杂志,2024,40(4):385-390.

[11]吴玉灵,杨东智,李宗倍,等. 2020年银川市HIV-1感染者基因亚型及耐药分析[J].病毒学报,2022, 38(5):1160-1165.

[12]裴晓迪,袁风顺,刘莉,等. 2012-2017年四川省50岁及以上艾滋病病毒感染者/艾滋病患者流行特征分析[J].预防医学情报杂志,2019, 35(6):559-564.

[13]石世宇,曹汴川,黄秋玲,等.抗病毒治疗失败的HIV感染/AIDS老年患者基因型耐药特点分析[J].中国感染与化疗杂志,2023, 23(6):686-690.

[14]杨薇,袁业伟,喻航,等. 2021年四川省凉山州HIV/AIDS病人随访检测及其影响因素分析[J].寄生虫病与感染性疾病,2023, 21(4):215-220, 229.