摘要:目的:探讨SperMagic在冻融微量精子周期中的临床应用。方法:回顾性分析2015年3月至2018年4月在郑州大学第一附属医院生殖医学中心经皮附睾精子抽吸术(TESA)、经皮睾丸穿刺精子抽吸术(PESA)及显微取精手术所获微量精子经冻融操作后行卵胞质内单精子注射助孕的无精症患者的资料,共87个周期。根据有无经SperMagic处理进行初分组:SperMagic组,经SperMagic处理,44个周期;Control组,未经SperMagic处理,43个周期。进一步根据精子来源分组:A1组,经SperMagic处理TESA,33个周期;A2组,经SperMagic处理PESA,11个周期;B1组,未经SperMagic处理TESA,6个周期;B2组,未经SperMagic处理PESA,37个周期。比较两组间实验室指标如2PN受精率、总受精率、卵裂率、优质胚胎形成率;妊娠结局如生化妊娠率、种植率、早期流产率、临床妊娠率等。结果:SperMagic组卵泡刺激素高于Control组,差异有统计学意义(P<0.05)。SperMagic组总受精率低于Control组,卵裂率、D3优质胚胎率高于Control组,差异有统计学意义(均P<0.05)。各亚组间各项指标比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:微量精子解冻时加入SperMagic可提高胚胎卵裂率及D3优质胚胎率,可能影响胚胎受精率,在微量精子冷冻保存临床应用中起一定积极作用。
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在孕龄人群中,男性因素不育约占不孕因素的1/3[1]。对于生精功能严重低下的患者,微量精子冷冻技术的创新为此类稀少精子者提供了更好的保障,成为此类患者生育亲代的唯一的希望[2]。相关研究表明SperMagic在宫腔内人工授精、常规补救卵胞质内单精子注射助孕的辅助生殖技术中起积极作用,有效改善精子活力[3,4]。本研究将通过回顾性分析2015年3月至2018年4月于郑州大学第一附属医院生殖中心采用SperMagic改善冻融微量精子活动力行ICSI助孕的87例新鲜周期临床数据,探讨其在提高冻融微量精子活力,保存男性生育力方面的临床影响。
1、对象与方法
1.1研究对象
女方排除高龄(年龄≤38岁)、子宫畸形、内分泌异常、多囊卵巢综合征、子宫内膜异位症、遗传及重大疾病等不孕因素,男方排除遗传因素、畸形精子、重大疾病等因素。无精子症诊断标准为3次精液分析无精,经皮附睾精子抽吸术、经皮睾丸穿刺精子抽吸术诊断性穿刺活检可见成熟精子。收集2015年3月至2018年4月因无精症行微量精子冷冻保存、于女方取卵日使用冻精进行ICSI助孕患者的资料共87个周期,患者对本研究表示理解与支持,数据仅用于科学研究,伦理审查编号为:2019-KY-78。
1.2分组
根据有无经SperMagic处理进行初分组:SperMagic组,经SperMagic处理,44个周期;Control组,未经SperMagic处理,43个周期。进一步根据精子来源分组:A1组,经SperMagic处理TESA,33个周期;A2组,经SperMagic处理PESA,11个周期;B1组,未经SperMagic处理TESA,6个周期;B2组,未经SperMagic处理PESA,37个周期。
1.3微量精子的获取及冻融
TESA、PESA组织加入1mLSpermRinse培养液,观察有精者,采用稀少精子冷冻方案冷冻[2]。解冻时,观察到D级精子行ICSI前加入SperMagic,孵育10min后观察,找到活力好的精子行ICSI注射。
1.4观察指标
比较两组间实验室指标如2个原核(pronucleus,2PN)受精率、总受精率、卵裂率、优质胚胎形成率;妊娠结局如生化妊娠率、种植率、早期流产率、临床妊娠率等。
1.5统计学方法
采用SPSS21.0统计软件进行数据处理分析。符合正态分布的计量资料以均数±标准差(x±s)表示,不符合正态分布的计量资料采用中位数和四分位间距M(P25,P75)表示,组间比较采用独立样本t检验或秩和检验;计数资料以频数和率(%)表示,组间比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
2、结果
2.1基础资料
SperMagic组女方年龄、体质量指数、抗缪勒管激素、促性腺激素总量、扳机日内膜厚度指标与Control组比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。见表1。SperMagic组与Control组男方年龄、不孕年限、男方基础内分泌(黄体生成素、睾酮、泌乳素、雌激素)指标比较,差异无统计学意义(均P>0.05);SperMagic组卵泡刺激素高于Control组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
表1SperMagic组与Control组女方基线资料情况比较[M(P25,P75)]
表2SperMagic组与Control组男方基线资料情况比较[M(P25,P75)]
2.2实验室指标情况
SperMagic组总受精率低于Control组,卵裂率、D3优质胚胎率高于Control组,差异有统计学意义(均P<0.05)。见表3。各亚组间各项指标比较,差异无统计学意义(均P>0.05)。见表4。
表3SperMagic组与Control组实验室指标情况比较
表4各亚组实验室指标比较
3、讨论
冻融微量精子行ICSI的辅助生殖技术为无精症患者生育亲生子代带来了希望,其最大程度增大了此类患者获得子代的可能性[5]。目前,已有研究证明在极度严重少、弱精症、无精症患者精液中添加SperMagic可明显改善精子活力[6],且不会影响胚胎早期发育[7]。本研究回顾性分析了SperMagic在此类助孕技术中的实验室结局,以期对临床应用SperMagic的疗效评估提供一定的帮助。
有研究认为,睾丸精子和附睾精子的ICSI结局没有差别[8,9],国内外多篇文献报道表明冻融睾丸、附睾精子与新鲜精子行ICSI注射后的受精率、临床妊娠率及流产率差异无统计学意义[10,11]。本研究结果显示,SperMagic组卵裂率较Control组高,分析原因是SperMagic的加入很好的筛选了具有较高DNA完整性或较低DNA碎片的精子,此类精子的形态和染色质结构已基本成熟,遗传物质完整可使卵子正常受精和卵裂[12]。
SperMagic作为美国专利产品,其有效成分作用于精子膜受体,通过膜Ca2+通道增强Ca2+内流,从而增加微管的动态运动,最终加快精子的前进速度。研究报道,SperMagic具有显著提高冷冻解冻、TESE、PESA、少精子、弱精子的进展和运动能力,提高男性不孕因素治疗周期中的临床结局[13]。
本研究的创新之处在于,对稀少精子解冻后加入SperMagic的实验及临床结局进行统计学分析,细化评估了SperMagic的临床效应。本研究结果显示,SperMagic在微量精子解冻周期中的临床应用对于卵裂率差异有统计学意义,提示其具有临床积极作用。SperMagic组卵泡刺激素高于Control组,提示临床操作者可能更倾向于对由卵泡刺激素所致活力差的精子使用SperMagic。另本研究结果提示SperMagic可能影响成熟卵子受精及优质胚胎形成,受精率及优质胚胎率差异有统计学意义。本研究样本量较小,仍需进一步的大样本数据进行统计求证。
综上所述,对于因无精症需提前行微量精子冻存助孕的患者,使用SperMagic提高其精子活力,有利于改善实验室卵裂率及D3优质胚胎率。
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期刊名称:生殖医学杂志
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