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SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性位点与孕妇易栓风险的关联性研究

2025-07-04 20 上传者：管理员

摘要：目的研究SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性位点与温州籍和非温州籍孕妇易栓风险的关联性。方法选取2022年12月—2023年11月温州籍孕妇354例及非孕妇514例，非温州籍孕妇184例及非孕妇91例。采集外周血，提取基因组DNA,利用MassARRAYSNP基因分型平台检测rs2227589位点多态性，利用SPSS26.0软件进行统计学分析。结果SERPINC1基因rs2227589位点在温州籍、非温州籍女性人群中均存在CC、CT、TT3种基因型，其中在温州籍妊娠组和非妊娠组中的分布频率分别为42.1%和39.5%,42.9%和48.4%,15.0%和12.1%,在非温州籍妊娠组和非妊娠组中的分布频率分别为44.6%和48.4%,45.1%和37.4%,10.3%和14.3%,均符合Hardy-Weinberg遗传平衡定律。SERPINC1基因rs2227589的CC基因型在非温州籍非妊娠组人群的检出频率高于温州籍非妊娠组人群，但差异无统计学意义(P>0.05),在妊娠组中温州籍与非温州籍人群间差异无统计学意义(P>0.05)。共显性遗传分析模型显示3种基因型在温州籍妊娠组和非妊娠组、非温州籍妊娠组和非妊娠组人群中的差异均无统计学意义(均P>0.05)。进一步对非温州籍女性人群中各基因型的独立效应进行回归分析，显示TT基因型在非妊娠组中的分布频率高于妊娠组，但差异无统计学意义(P>0.05,OR=0.691,95%CI:0.325～1.470)。结论SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性位点与温州籍、非温州籍孕妇易栓风险的发生、发展无显著相关性。

关键词：
rs2227589位点
SERPINC1基因
单核苷酸多态性
妊娠
易栓症
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易栓症指各种遗传性和获得性缺陷导致机体高凝状态,易导致血栓形成[1]。妊娠会造成血液高凝状态,易导致女性复发性流产,国外研究[2]发现SERPINC1基因突变会导致孕妇出现易栓症,因此对于有血栓栓塞风险的孕妇应当进行易栓基因检测评估。抗凝血酶作为抗丝氨酸蛋白酶抑制剂家族成员,是由432个氨基酸编码的单链糖蛋白,由肝脏合成和分泌,具有强大的抗凝活性,可以与凝血酶和凝血因子Ⅸa、Ⅹa、Ⅺa、Ⅻa活性中心的丝氨酸残基结合,从而发挥抗凝作用[3]。遗传性抗凝血酶缺乏症是一种罕见的常染色体显性遗传病,具有外显不全的特性,主要由SERPINC1基因突变引起,临床表现为血栓形成及血栓栓塞[4]。SERPINC1基因位于1号染色体q23.1-25区域,长13.5kb,含7个外显子和6个内含子[5]。SERPINC1基因突变具有临床异质性,变异类型包括点突变、剪接以及小片段插入/缺失突变,这些突变中90%以上是点突变。在HGMD数据库中,错义/无义突变占所有突变的55.0%,小片段缺失或插入引起的移码突变占26.5%,剪接突变占7.6%,其他类型突变占10.9%[6]。国内关于SERPINC1基因单核苷酸多态性位点对易栓风险影响的报道较少。基于SERPINC1基因突变会影响抗凝血酶活性从而导致血栓栓塞事件发生这一事实[7],探讨SERPINC1基因多态性与妊娠易栓症之间的关联性具有重要意义。鉴于SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性位点与孕妇易栓风险之间的关联性研究较少,本研究选取温州籍与非温州籍女性人群,分为妊娠和非妊娠两组,采用队列对比研究,阐述SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性位点与妊娠易栓风险之间的关联性。报道如下。

1、对象与方法

1.1研究对象

收集2022年12月—2023年11月在温州市中心医院就诊的非温州籍孕妇184例,年龄20~45岁,非孕妇91例,年龄20~80岁;温州籍孕妇354例,年龄20~46岁,非孕妇514例,年龄20~95岁。所有研究对象知情同意并签署同意书,采集研究对象入院时的一般临床资料(姓名、性别、年龄、身份证号码、妊娠状态),按照组别分为妊娠组和非妊娠组,采用户籍地追溯法界定户籍归属,调查后剔除3代内的近亲标本,最后进行SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性位点检测。本研究经过温州市中心医院伦理审查委员会审批。

1.2方法

入组研究对象均采集外周血2ml(EDTA抗凝管),基因组DNA提取使用长沙三济生物科技有限公司的核酸提取及纯化试剂盒,DNA提取纯化后的产物用赛默飞公司的NanoDropLite分光光度计测定A260/A280比值为1.8~1.9,利用MassARRAYSNP基因分型平台(Sequenom,SanDiego,CA)进行基因分型。使用以下引物进行聚合酶链反应(PCR)扩增:正向引物5'-ACGTTGGATGGAAAGGCCTTACCCCAAGAG-3',反向引物5'-ACGTTGGATGTCTCCCTGGTAGTTACAGTC-3',SNPrs2227589的基因分型延伸引物为5'-GGAGAGCACTTGAAATGAT3'。所有引物均由Sequenom的MassARRAYDesigner软件设计。进行特异性引物延伸以检测扩增DNA中的单碱基多态性。SERPINC1基因rs2227589多态性检测结果如为C碱基单峰则基因型为CC,C和T碱基双峰则基因型为CT,T碱基单峰则基因型为TT。

1.3统计学分析

采用SPSS26.0统计软件计算SERPINC1基因rs2227589位点不同基因型的组内频次及组间差异,计数资料用例数(%)表示。对各基因型和等位基因分布频率进行χ2检验,利用双侧对称P值、OR值以及95%CI等参数进一步验证所得到的结果,P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1SERPINC1基因rs2227589位点各基因型在温州籍、非温州籍女性人群中的分布频率及Hardy-Weinberg检验

SERPINC1基因rs2227589位点在温州籍、非温州籍女性人群中均可检测出3个基因型。CC、CT、TT基因型在温州籍孕妇中的分布频率分别为42.1%、42.9%、15.0%,在温州籍非孕妇中的分布频率分别为39.5%、48.4%、12.1%;在非温州籍孕妇中的分布频率分别为44.6%、45.1%、10.3%,在非温州籍非孕妇中的分布频率分别为48.4%、37.4%、14.3%。上述3个基因型在温州籍、非温州籍女性中的分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律。在非妊娠组中,rs2227589位点CC、CT、TT基因型分布无地域差异(χ2=3.823,P>0.05),在不同籍贯妊娠组中的分布频率差异无统计学意义(χ2=2.256,P>0.05)。在非孕妇中,非温州籍女性CC基因型的检出频率高于温州籍,但差异无统计学意义(χ2=2.557,P>0.05)。

2.2SERPINC1基因rs2227589位点基因型与温州籍、非温州籍女性妊娠人群易栓风险的关联性分析

利用共显性遗传分析模型对SERPINC1基因rs2227589位点在温州籍女性妊娠组和非妊娠组、非温州籍女性妊娠组和非妊娠组中分别进行χ2检验,均P>0.05。见表1。

表1SERPINC1基因rs2227589位点多态性与温州籍、非温州籍女性人群易栓风险的关联性

为进一步分析各基因型对妊娠易栓风险的独立影响,对温州籍女性人群中3个基因型CC、CT、TT进行回归分析,发现OR值均接近1,进一步证明rs2227589位点多态性与温州籍女性妊娠易栓风险无关。TT基因型在非温州籍女性人群中的OR值为0.691,说明该基因型在非温州籍女性妊娠组中的暴露度显著低于非妊娠组,推测其对非温州籍女性妊娠易栓风险的发生具有保护作用,但χ2检验结果差异无统计学意义(P>0.05)。SERPINC1基因rs2227589位点各基因型对温州籍、非温州籍女性人群易栓风险的独立效应分析见表2。

2.3SERPINC1基因rs2227589位点等位基因对温州籍、非温州籍女性妊娠易栓风险的影响分析

SERPINC1基因rs2227589位点的等位基因C和T在温州籍、非温州籍女性妊娠组和非妊娠组中的分布频率差异均无统计学意义(均P>0.05)。SERPINC1基因rs2227589等位基因C/T与温州籍、非温州籍女性人群易栓风险的关联性分析见表3。

表2SERPINC1基因rs2227589位点各基因型对温州籍、非温州籍女性人群易栓风险的独立效应分析

表3SERPINC1基因rs2227589等位基因C/T与温州籍、非温州籍女性人群易栓风险的关联性分析

3、讨论

SERPINC1基因突变已被证实与抗凝血酶缺乏症有关[8-9],而抗凝血酶缺乏症又会导致孕妇易栓风险增加,从而导致不良妊娠结局[10]。有多篇相关研究[11]表明SERPINC1基因多态性位点变异会增加血栓形成风险。本研究显示:SERPINC1基因多态性并未明显增加孕妇易栓风险,与相关研究[12]结果不一致,仔细查阅发现相关研究均为个案报道,国内有学者[13]分析SERPINC1基因rs2227589位点对深静脉血栓形成的影响,发现该位点并未增加深静脉血栓生成风险。本研究通过人群频率大数据分析,证实SERPINC1基因多态性位点可能是良性变异位点。

本研究中,SERPINC1基因rs2227589多态性位点存在C/A与C/T两种多态性,人群中以C/T为主,是SERPINC1基因内含子碱基,位于1号染色体173917078位置,在版本号为20230706150541的ALFA等位基因频率数据库中,其等位基因T的全球分布频率为9.6%。本研究结果表明:温州籍及非温州籍的非孕妇人群中,等位基因T的分布频率分别为36.3%和33.0%,高于全球分布频率,认为基因多态性的分布可以因地域及种群不同而略有差异。为研究SERPINC1基因rs2227589基因位点多态性对温州地区孕妇易栓风险的影响,本研究选择了温州籍、非温州籍两个人群进行队列研究。

本研究显示:SERPINC1基因rs2227589位点3种基因型CC、CT、TT在温州籍孕妇人群中的频率分别为42.1%、42.9%、15.0%,在非妊娠组中的频率分别为39.5%、48.4%、12.1%,在妊娠组和非妊娠组中共显性遗传分析模型结合χ2检验结果表明3种基因型的分布频率相近,不存在显著差异。随后用隐性模型、显性模型等对单个基因型对温州籍女性妊娠易栓风险的效应进行分析,也未发现存在显著的组间差异,组间分析也未发现等位基因C和T差异存在统计学意义。上述研究结果表明SERPINC1基因rs2227589位点多态性与孕妇易栓症的发生无显著关联性。

本研究针对单个基因型与非温州籍女性妊娠易栓风险的关联性进行回归分析,显示妊娠组TT基因型的发生频率稍低于非妊娠组,说明该基因型是非温州籍女性妊娠人群易栓风险的抵抗因素。考虑到非温州籍女性人群共显性遗传模型的分析结果未达到设定的检验水准,认为该位点与非温州籍女性妊娠易栓风险的发生不存在关联性。对等位基因C和T进行分析,显示妊娠组和非妊娠组中等位基因T发生频率近似,说明等位基因T对女性妊娠易栓风险的发生无显著影响。

本研究从遗传学角度剖析了温州籍、非温州籍女性人群SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性比较结果,显示SERPINC1基因内含子多态性位点rs2227589与女性人群妊娠易栓风险的相关性不存在地域间差异,即与温州籍、非温州籍女性人群妊娠易栓风险的发生、发展无显著关联,还有研究[14-15]证实SERPINC1基因rs2227589多态性位点不增加静脉血栓的发生风险,只轻微降低抗凝血酶活性[16-17]。妊娠易栓症除与遗传学因素有关外[18-19],还与获得性因素相关,如抗磷脂综合征等多种原因导致的生理性高凝状态或病理性高凝状态[20],应通过多角度深入挖掘医疗检测大数据,进行研究归纳总结,阐明妊娠易栓症的发生机制,为妊娠易栓症的预警与干预提供循证学依据。

参考文献:

[1]中华医学会血液学分会血栓与止血学组.易栓症诊断与防治中国指南(2021年版)[J].中华血液学杂志,2021,42(11):881-888.

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[8]王海平,张素平,阙敢波,等.家族血栓与抗凝血酶Ⅲrs2227589突变研究[J].中国卫生标准管理,2019,10(12):119-122.

[9]周星星,谢耀盛,谢海啸,等.一个遗传性抗凝血酶缺陷症家系的表型与基因突变分析[J].温州医科大学学报,2022,52(12):993-998.

[13]耿力,孙冰,高波,等.CYP4V2､SERPINC1､GP6基因多态性与深静脉血栓形成的相关性研究[J].中国医学前沿杂志(电子版),2020,12(8):104-107.

基金资助:浙江省温州市科技局项目(Y20210749);

文章来源:潘晓荷,林煊,徐克,等.SERPINC1基因rs2227589单核苷酸多态性位点与孕妇易栓风险的关联性研究[J].中国妇幼保健,2025,40(13):2468-2471.