首页 > 论文范文 > 农业科技论文 > 畜牧综合论文 > 生猪养殖论文 > 贵州省开阳县某猪场主要猪病的血清学抗体检测研究

贵州省开阳县某猪场主要猪病的血清学抗体检测研究

2021-03-04 162 上传者：管理员

摘要：为了解贵州省开阳县某猪场猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪O型口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒的免疫及感染情况，通过采用ELISA检测方法对猪场30份血清进行相关抗体检测。结果:(1)猪O型口蹄疫病毒、猪伪狂犬病毒gB、猪瘟病毒免疫抗体合格率均>70%，免疫效果较好。(2)猪口蹄疫3-ABC抗体阳性率为0，表明猪群无口蹄疫病毒感染。(3)猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫抗体合格率为26.7%，未达到国家农业农村部规定≥70%的要求，需加强免疫。(4)猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为70%，表明猪群存在伪狂犬病病毒感染。结论:猪场需加强猪繁殖与呼吸综合征的免疫和防控，同时要做好猪伪狂犬病的检疫与净化工作。

关键词：
抗体检测
猪O型口蹄疫
猪伪狂犬病
猪瘟
猪繁殖与呼吸综合征
高致病性猪繁殖
加入收藏

猪瘟、高致病性猪繁殖与呼吸综合征(又称猪蓝耳病)、猪O型口蹄疫、猪伪狂犬病是猪的重要病毒性疾病[1,2]，一旦猪群感染将给养猪场带来很大的经济损失。为了解贵州省开阳县某养猪场这4种疫病的免疫和感染情况，为防控和净化提供科学依据，特进行实验室血清学抗体检测，现报道如下。

1、材料与方法

1.1检测样品

采集该猪场的猪血液样品30份，血样凝固后，1500r/min离心取上清液至1.5L离心管中备用(血清必须清亮，无溶血)。

1.2主要试剂

猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪瘟病毒、猪O型口蹄疫病毒、猪伪狂犬病病毒gB、猪伪狂犬病病毒gE、猪口蹄疫3-ABC酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒(均购自武汉科前动物生物制品有限责任公司)。

1.3方法

1.3.1抗体检测

严格按照相应病毒ELISA抗体检测试剂盒说明书进行。(1)试验前先加入洗涤液重复洗板2次。(2)将稀释好的待检血清、阴性对照、阳性对照各取定量加至抗原包被板中，37℃温育。(3)将各孔的废液丢弃，加入洗涤液，重复洗板5次。(4)加入酶标抗体，置于37℃温育。(5)重复洗板5次后，每孔加入试剂盒中的显色液A和B，室温条件下避光反应。(6)最后加入终止液，震荡混匀后在酶标仪上测定各孔的D630nm值。S为检测样品D630nm值，P为阳性对照平均D630nm值，N为阴性对照D630nm平均值。

1.3.2结果判定

判定方法按试剂盒说明书。(1)猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体检测成立条件:P≥0.8,N<0.3。S/P≥0.2判为阳性，S/P<0.2判为阴性。(2)猪O型口蹄疫病毒抗体检测成立条件:P-N>0.5。S/P≥0.2判为阳性，S/P<0.2判为阴性。(3)猪瘟病毒抗体检测成立条件:P-N≥0.2,N≤0.3。(S-N)/(P-N)≥0.4判为阳性，(S-N)/(P-N)<0.4判为阴性。(4)猪伪狂犬病病毒gE抗体检测成立条件:N与P≥0.3。S/N≤0.4判为阳性，S/N>0.4判为阴性。(5)猪伪狂犬病病毒gB抗体检测成立条件:N与P≥0.4。S/N≤0.7判为阳性，S/N>0.7判为阴性。(6)猪口蹄疫3-ABC抗体检测成立条件:P≥0.3,N≤0.2。S/P≥0.2判为阳性，S/P<0.2判为阴性。

2、结果与分析

2.1主要猪病血清免疫抗体检测结果

由表1、图1可见:(1)检测血清中猪O型口蹄疫病毒、猪瘟病毒、猪伪狂犬病病毒gB免疫抗体合格率分别为96.7%、100%、100%，达到农业农村部规定≥70%的要求，免疫效果较好。(2)猪繁殖与呼吸综合征病毒免疫抗体合格率为26.7%，未达到规定要求，说明该养猪场猪繁殖与呼吸综合征免疫失败。分析原因可能与猪场的管理水平低、疫苗保存不当、免疫程序不合理、免疫操作不规范、品种个体差异等有关。(3)免疫抗体离散度表示群体免疫的均一性。其中O型口蹄疫免疫抗体离散度最大，免疫均一性最差，分析原因可能与疫苗及免疫操作有关。

表1病毒免疫抗体检测统计

图1免疫抗体检测柱形图

2.2猪伪狂犬病、猪口蹄疫感染抗体检测结果

由表2可见:(1)检测血清中猪口蹄疫3-ABC抗体阳性率为0，表明猪群无口蹄疫病毒感染。(2)猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为70%，提示猪群存在猪伪狂犬病病毒感染。分析原因可能是种猪群疫病净化不佳，携带有伪狂犬病病毒，且抗体离散度较大，表明感染抗体水平差异较大。

表2病毒感染抗体检测统计

3、讨论

3.1开展动物免疫抗体检测是及时了解疫苗注射后动物体内产生免疫抗体水平和免疫效果的重要手段，也是养殖场进行补充免疫和开展各项防控措施的主要依据，并为政府主管部门科学制定动物疫病预防控制规划和疫病预警提供决策依据[3]。本次对贵州省开阳县某养殖场猪群的检测结果表明，猪繁殖与呼吸综合征免疫效果不好，存在免疫空白。建议该场及时进行补免，调整免疫程序或者重新设计合理的免疫程序，并定期对猪群开展检测，提高免疫效果。同时还要完善场内消毒防疫措施，改善饲养条件，提高猪群的免疫力。

3.2开展感染抗体检测可以从抗体水平评价动物受某种疫病感染的情况，并为相应疫病的控制和净化提供依据。目前我国广泛使用的猪伪狂犬病病毒gE基因缺失弱毒疫苗不产生针对gE蛋白的抗体。雷有玲等以纯化的重组gE蛋白为包被抗原建立了检测猪伪狂犬病毒野毒感染抗体的间接ELISA方法，通过检测gE抗体即可实现对猪伪狂犬病病毒野毒感染的鉴别诊断[4]。本次检测结果表明，该场猪伪狂犬病免疫抗体合格率为100%，但是猪伪狂犬病病毒gE抗体阳性率为70%，猪伪狂犬病病毒野毒感染率很高。这种现象与其他相关研究一致，表明较高的gB抗体阳性率不能说明猪群未受到伪狂犬病野毒感染[5]。建议该场结合实际情况进一步进行病原学检测确诊，并根据检测结果分析引种检疫、日常免疫和疫病净化相关工作，逐步开展猪伪狂犬病的净化工作。

参考文献：

[1]邓银燕.佛山市高明区春防猪瘟､高致病性猪蓝耳病､猪O型口蹄疫血清学调查分析[J].广东畜牧兽医科技,2018,43(5):37-38,48.

[2]李娇,祖立闯,王金良,等.我国部分地区4种猪病毒病感染的血清学调查[J].养猪,2015(5):119-120.

[3]施思玉.做好动物免疫抗体检测工作的意义和建议[J].当代畜牧,2014(11):16-17.

[4]祖立闯.抗体检测在猪病防控中的应用[J].中国畜牧兽医文摘,2015,31(9):4-5.

[5]李海琴,康昭风,谭美芳,等.2016-2017年江西省部分地区规模化猪场猪伪狂犬病血清流行病学调查[J].江西农业大学学报,2018,40(5):1037-1041.

张倩倩,田贵刚,陈玲华,杨鹏,程振涛,陆安法.贵州省开阳县某猪场主要猪病的血清学抗体检测分析[J].贵州畜牧兽医,2021,45(01):58-59.

基金:“贵州省动物生物制品工程技术研究中心”贵州省科技平台及人才团队计划(黔科合平台人才[2018]5253号)