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大承气汤对急性胰腺炎大鼠胰腺及回肠病理形态影响实验研究

2025-05-16 67 上传者：管理员

摘要：目的:研究大承气汤对急性胰腺炎大鼠胰腺及回肠病理形态的影响。方法:用随机分组法将雄性Wistar大鼠分为假手术组、模型组(3、6、12、24h)和中药组(3、6、12、24h),每组12只。采用国际上普遍采用的雨蛙素注射法制备急性胰腺炎模型。腹腔连续注射雨蛙素50μg/kg(雨蛙素用生理盐水溶解，浓度为10μg/mL)6次，每次间隔0.5h,制备大鼠急性胰腺炎模型；假手术组仅腹腔连续注射相同体积的生理盐水；中药组在最后一次雨蛙素注射后0.5h给予大承气汤灌胃，以后每8h一次。观察大鼠胰腺、末端回肠病理形态学变化。结果:模型组6h、12h病理学评分明显高于假手术组，中药组6h、12h病理学评分明显低于模型组；模型组12h、24h回肠黏膜厚度及绒毛高度明显低于假手术组，中药组12h回肠黏膜厚度与假手术组及模型组12h比较明显增高，中药组6h及12h回肠绒毛高度与假手术组6h、12h及模型组6h、12h比较明显增高，均差异有统计学意义(P<0.05)。结论:模型组在6h及12h急性胰腺炎病理表现显著，其中12h时病理表现最为显著，24h基本恢复。大承气汤能减轻急性胰腺炎时大鼠胰腺、回肠病理改变，增加急性胰腺炎时大鼠回肠黏膜厚度、绒毛高度。通里攻下代表方剂大承气汤具有改善急性胰腺炎大鼠胰腺及回肠病理损伤的作用。

关键词：
回肠病理
大承气汤
急性胰腺炎
胰腺病理
脏器功能
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急性胰腺炎炎症加重、继发感染和多脏器功能不全等并发症的主要原因是肠屏障破坏导致的肠菌易位和肠源性内毒素血症[1]。肠屏障具有阻止肠道内致病菌和毒素等透达肠外的功能,是除消化、吸收功能之外肠道的另一重要功能,是肠屏障的结构基础。维持物理屏障的完整性在很多疾病的防治过程中起重要作用[2]。本实验旨在应用雨蛙素建立大鼠急性胰腺炎模型,观察急性胰腺炎后胰腺、末端回肠病理形态改变及回肠黏膜厚度、绒毛高度,观察大承气汤的作用,以期为后续研究提供基础。

1、材料与方法

1.1实验动物

健康Wistar雄性大鼠,体重250~300g,于实验前12h禁食,但不限饮水。

1.2主要试剂与仪器

雨蛙素(sigma公司);酶标仪(KHB公司ST360);全自动洗板机(Rayto公司RT-3000);轮转式组织切片机(德国,莱卡2135型);超低温冰箱(海尔,DW-86L628);离心机(HealForce公司,Neofuge13R);电子天平(METTLERTOLEDO公司,AL104);光学显微镜(日本,OlympusBX60)。

1.3模型制备与分组

采用国际上普遍采用的雨蛙素注射法制备大鼠急性胰腺炎模型[3]。模型组(n=12)和中药组(n=12)按50μg/kg的剂量给予腹腔注射雨蛙素6次,0.5μg/次。雨蛙素于实验前用生理盐水新鲜配制,浓度为10μg/mL。假手术组(n=12)仅腹腔连续注射相同体积的生理盐水;中药组在最后一次雨蛙素注射后0.5h给予大承气汤灌胃,以后每8h一次。

1.4大承气汤制备、剂量及应用

大承气汤按《伤寒论》经方组成:大黄后下12g,枳实12g,厚朴15g,芒硝9g,溶服。每剂含生药48g,按成人60kg体重计算。参照《医用实验动物学》[4],按人与大鼠剂量换算,以备应用。

1.5胰腺大体病理形态学

观察各组大鼠胰腺组织固定,脱水,石蜡包埋,连续4μm切片,脱蜡,水洗,染色。OlympusBX60显微镜观察,采集病理图像并输入电脑。根据Schmidt评分标准[5]进行评分。

1.6回肠苏木精-伊红染色及分级

于接近回盲部端取1cm左右回肠组织,固定包埋,4μm切片,脱蜡,水洗,染色,常规脱水,透明,封固,光镜下观察回肠形态改变。回肠黏膜损伤按绒毛变化分为0~5级,转化为相应积分[6]。1.7末端回肠黏膜厚度和绒毛高度测定

末端回肠黏膜漂洗后,常规固定、脱水、包埋、切片、染色。应用病理图像分析仪,在×100视野下拍照后测量黏膜厚度、绒毛高度。

1.8统计学方法

采用SPSS28.0统计软件进行数据处理,计量资料均以X