妇科恶性肿瘤是严重威胁女性健康的主要疾病之一,其发病率和病死率在全球范围内居高不下[1]｡尽管近年来妇科肿瘤的诊疗水平取得了显著提升,但晚期患者的生存预后仍不理想,尤其是复发及耐药患者的治疗选择十分有限｡目前,随着精准医学的发展,靶向治疗已成为改善妇科肿瘤预后的关键策略｡研究表明,妇科肿瘤的发生发展涉及多通路､多靶点的复杂分子网络,深入解析这些机制不仅可发现新型生物标志物,更能为开发特异性靶向药物提供依据,对推动个体化精准治疗具有重要价值｡蛋白酪氨酸激酶⁃2(proteintyrosinekinase⁃2,PTK2),又称黏着斑激酶(focaladhesionkinase,FAK),是一种由人8号染色体的PTK2基因编码的非受体型酪氨酸激酶｡PTK2最早是在20世纪90年代研究细胞粘附过程中发现的关键因子｡在静息状态下,PTK2通过分子内相互作用维持自抑制状态[2]｡当接收到整合素､生长因子受体等信号刺激后,PTK2发生构象变化并诱导其Y397位点发生自磷酸化,进而招募并激活磷脂酰肌醇3⁃激酶(phos⁃phatidylinositol3⁃kinase,PI3K)等下游效应分子,调控细胞运动､增殖､凋亡等多种生物学过程｡此外,PTK2还可转位至细胞核,通过调控转录因子活性影响基因表达,影响细胞周期进展及细胞凋亡过程,促进细胞存活,驱动肿瘤的发生发展[3]｡

1、PTK2的结构和功能

PTK2是一种多结构域的蛋白,主要分为以下四个区域:N端的FERM结构域､C端的FAT结构域､中心的激酶结构域和三个脯氨酸富集区域(PRR)｡每个结构域都有其独特的结构和功能,共同介导PTK2的多种生物学活性｡

FERM结构域由F1､F2､F3三个亚结构域组成,形成一个三叶草结构｡其中,F3亚结构域中包含核定位序列(nuclearlocalizationsequence,NSL),可以介导PTK2进入细胞核参与核内信号传导及基因表达调控｡此外,FERM结构域中包含了整合蛋白､生长因子等多种蛋白的结合位点,通过蛋白⁃蛋白相互作用诱导PTK2活化,激活下游多条信号通路[4]｡FAT结构域主要是为桩蛋白(paxillin)和踝蛋白(talin)提供了该结合位点,参与黏着斑复合物(focaladhesions,FAs)的形成,介导细胞内外的信号传递[5]｡激酶结构域中则包含多个关键的酪氨酸残基(如Y397､Y576和Y577),Y397作为PTK2的自磷酸化位点,对其激酶活性具有重要意义｡而PTK2的PRR区域中含有Src同源性3(Srchomology3do⁃main,SH3)结构域结合位点,通过与多种具有SH3结构域的蛋白相互结合发挥功能｡

2、PTK2在恶性肿瘤中的作用

2.1PTK2影响肿瘤细胞的增殖､凋亡

PTK2在调节癌细胞的生长､凋亡和维持癌细胞存活的过程中具有重要意义｡研究发现,PTK2在胆管癌中表达显著升高｡体内实验显示,过表达的PTK2可与激活的蛋白激酶B(proteinkinaseB,AKT)协同,共同诱导yap癌基因,促进AKT驱动的胆管癌的发生[6]｡该研究还证实PTK2可以通过靶向各种细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin⁃dependentkinase,CDK)来影响细胞周期进程｡在体外和体内胆管癌模型中,选择单独使用PTK2抑制剂或联合CDK4/6抑制剂的治疗方式,都能明显抑制胆管癌细胞的异常增殖｡此外,PTK2在乳腺癌细胞的生长和转移中也具有重要意义｡敲低PTK2或抑制其活性可显著抑制乳腺癌细胞的增殖和转移能力｡免疫组化分析显示,PTK2缺失会促进肿瘤细胞凋亡｡机制研究表明,PTK2通过激活AKT信号通路抑制凋亡并促进细胞存活｡近期研究发现,PTK2还通过F3亚结构域中的NSL序列进入细胞核[3]｡入核后,PTK2与双微体同源基因2(mousedoubleminute2,MDM2)相互作用,促进p53的泛素化降解,从而影响细胞周期调控､凋亡及DNA修复等关键过程｡细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A(cyclin⁃de⁃pendentkinaseinhibitor1A,p21)是一种主要通过抑制细胞周期蛋白依赖性激酶的活性来诱导细胞周期停滞的蛋白质,使细胞处于衰老或凋亡的慢性状态｡在结直肠腺癌中,PTK2的异常活化通过抑制p53及其下游靶标p21,促进肿瘤细胞增殖并防止衰老[7]｡

2.2PTK2影响肿瘤细胞的侵袭､转移､EMT

肿瘤转移是导致患者死亡的关键因素,其中PTK2通过调控细胞黏附和细胞骨架重组在肿瘤的迁移､侵袭及上皮⁃间质转化(epithelial⁃mesenchymaltransition,EMT)中发挥关键作用｡研究表明,PTK2通过整合素信号感知细胞外基质(extracellularmatrix,ECM)信号,促进黏着斑(FAs)的形成和动态组装,进而调控肌动蛋白骨架重组和细胞迁移[5]｡PTK2还可与SRC家族激酶(SFKs)的核心成员⁃肉瘤病毒蛋白(sarcomaviralprotein,SRC)形成双激酶复合物,该复合物通过特异性磷酸化paxillin､talin等关键适配蛋白,显著激活下游ERK､PI3K/AKT等信号通路,进而精确调控肿瘤细胞的迁移､侵袭等恶性生物学行为[8]｡研究发现,PTK2⁃SRC复合物在白介素⁃6(IL⁃6)诱导的结直肠癌细胞的EMT中起重要的作用｡抑制PTK2或SRC可抑制IL⁃6介导的ERK1/2和p38MAPK磷酸化,从而抑制癌细胞的EMT[9]｡在卵巢癌中,PTK2过表达可以通过异常激活下游的SRC信号级联反应促进了肿瘤细胞的生长和转移[10]｡这些发现为靶向PTK2⁃SRC信号轴治疗肿瘤转移提供了理论依据｡

2.3PTK2影响肿瘤细胞的微环境

PTK2在肿瘤微环境(thetumormicroenvironment,TME)的调控中也发挥着多重作用,通过调控TME中的免疫细胞和成纤维细胞等多种成分,显著影响肿瘤的免疫逃逸､血管生成及恶性进展过程｡胰腺癌的研究表明,PTK2通过抑制抗原加工及呈递促进癌细胞的免疫逃逸[11]｡此外,PTK2活性升高显著促进组织纤维化,同时增加了细胞毒性T细胞浸润｡使用选择性PTK2抑制剂可同时缓解肿瘤纤维化,减少免疫细胞浸润,有效延缓肿瘤进展｡该研究还证明,PTK2抑制剂还能协同T细胞免疫治疗和PD⁃1拮抗剂,共同抑制肿瘤进展｡在乳腺癌中,成纤维细胞中PTK2的信号传导还可以促进迁移和外泌体miRNA介导的细胞间通信[12]｡PTK2还可以通过上调血管内皮生长因子受体2(vascularendo⁃thelialgrowthfactorreceptor2,VEGFR2),显著促进肿瘤细胞的血管生成｡在舌鳞状细胞癌中,靶向抑制VEGFR2､SRC和PTK2的磷酸化可显著抑制肿瘤生长并减少肿瘤血管生成[13]｡这些研究都表明,未来PTK2抑制剂有望通过与抗血管药物联合,成为癌症治疗中一项重要新策略｡

3、PTK2在妇科恶性肿瘤中的作用

3.1PTK2与宫颈癌

宫颈癌是全球女性常见第四大恶性肿瘤,也是发展中国家女性妇科癌症死亡的主要原因[14]｡1990—2019年中国宫颈癌统计分析显示,中国宫颈癌发病率及死亡率持续上升趋势,且逐渐年轻化｡目前已有研究证实,PTK2与宫颈癌的发生发展密切相关,其在宫颈癌组织中的表达较正常宫颈组织中明显上调[15]｡PTK2过表达可促进宫颈癌细胞的快速增殖､迁移和存活及耐药性｡更重要的是,PTK2高表达能增加宫颈癌盆腔淋巴结转移风险和疾病复发率,并导致疾病预后不良｡研究发现,在宫颈癌中可以通过异常激活PTK2,可增强其细胞黏附功能,激活下游PI3K/AKT/mTOR信号传导,进而促进Hela细胞增殖､存活[16]｡脂肪酸合酶(fattyacidsynthase,FASN)作为脂质代谢的关键酶,参与宫颈癌组织的代谢重编程｡体外实验结果证实,FASN可以通过激活c⁃SRC/PTK2信号通路级联反应,增强宫颈癌细胞HeLa和CaSki的迁移和侵袭行为[17]｡最新研究发现,维甲酸能以剂量依赖性方式降低宫颈癌HT⁃3细胞中PTK2磷酸化,进而抑制宫颈癌细胞的增殖､集落形成和侵袭性[18]｡此外,PTK2特异性抑制可导致宫颈癌细胞中PI3K和ERK信号通路的下调,表明PTK2还可调控这些信号通路影响宫颈癌的进展｡

综上,PTK2在宫颈癌中表达上调,PTK2异常激活与宫颈癌的增殖､侵袭､淋巴转移､复发及预后不良等密切相关｡因此,特异性抑制PTK2可能是未来宫颈癌治疗的一个新方向｡

3.2PTK2与子宫内膜癌

子宫内膜癌是中国第二大妇科恶性肿瘤,总体预后一般相对良好｡但是,晚期或复发的子宫内膜癌患者,5年生存率会显著下降,甚至不足20%｡随着子宫内膜癌分子分型的广泛应用,分子治疗在子宫内膜癌中的重要性日益凸显｡因此,探索新的分子生物标志物,或许有望为难治型子宫内膜癌的诊治提供新思路｡研究发现,PTK2参与调控子宫内膜癌细胞的代谢重编程｡己糖激酶2(hexokinase2,HK2)可通过介导PTK2及其下游ERK1/2信号通路,增强子宫内膜癌细胞中的有氧糖酵解,为肿瘤细胞的快速增殖､侵袭转移和耐药提供能量,从而促进肿瘤进展[19]｡此外,研究显示子宫浆液性癌细胞较子宫内膜样癌细胞中的PTK2总表达量和p⁃PTK2明显上调｡子宫浆液性癌作为一种具有高度侵袭性的子宫内膜癌亚型,总体生存率明显低于子宫内膜样癌细胞｡该研究提示PTK2高表达可能与肿瘤恶性程度密切相关[20]｡PTK2还参与调控子宫内膜癌干细胞的特性｡肿瘤干细胞具有自我更新､多向分化潜能和启动肿瘤形成的能力,是肿瘤发生､发展､复发和耐药的主要原因之一｡子宫内膜癌中的外泌体组分5(exosomecompo⁃nent5,EXOSC5)可通过整合素β1/PTK2/SRC通路激活癌症干性蛋白,增强癌症干性[21]｡最新研究表明,RAF/MEK抑制剂联合PTK2抑制剂在子宫内膜样癌细胞系和异种移植模型中表现出显著的协同作用,较单药抗肿瘤效果加强[22]｡这也说明,PTK2抑制剂与RAF/MEK抑制剂的联合运用,可能在未来子宫内膜癌治疗中展现出良好的疗效｡

从上述研究中可以看出,PTK2可以通过与多种细胞分泌物的相互作用或通过多条信号通路互联,参与调控子宫内膜癌细胞的迁移､EMT及代谢重编程｡PTK2有望成为子宫内膜癌预测预后及治疗的相关靶点,为区分良恶性子宫内膜疾病和证明靶向治疗方法的必要性提供了有价值的基础｡

3.3PTK2与卵巢癌

卵巢癌是中国第三大妇科恶性肿瘤,是中国妇科癌症死亡的第二大常见原因｡由于早期临床症状并不显著,约70%患者确诊时候已是晚期,且大多数患者生存期不足5年｡研究发现,PTK2高表达与卵巢癌的分期､侵袭性及不良预后密切相关[23]｡PTK2可通过多种机制参与卵巢癌的发生发展｡在晚期高级别浆液性卵巢癌(high⁃gradeserousovariancarcinoma,HGSOC)中,PTK2可以通过CD155/TIIT信号轴促进癌细胞免疫逃逸｡体外实验证明,其过表达与HGSOC的增殖､侵袭及耐药性密切相关[24]｡最新研究证实,PTK2抑制剂可以使HGSOC细胞周期停滞于G0/G1期,降低肿瘤细胞黏附能力,抑制迁移和增殖过程｡PTK2还参与卵巢癌的代谢调控｡卵巢癌组织中的外泌体可以通过调节p53/PTK2/SRC信号通路抑制肿瘤的恶性进展[25]｡整合素/PTK2信号轴可以与原癌基因c⁃myc相互协同,通过驱动其下游的PI3K/AKT通路,进而促进HGSOC细胞增殖､EMT､耐药及致癌潜力｡此外,PTK2还参与调控卵巢癌的淋巴管生成和转移｡RNA去甲基化酶可以通过激活PTK2/SRC信号增强卵巢癌中肿瘤相关淋巴管生成和淋巴结转移,而通过使用PTK2抑制剂可有效抑制这一过程｡

卵巢癌作为死亡率最高的妇科恶性肿瘤,其治疗尤其是铂类耐药患者的治疗仍面临严峻挑战｡目前针对PTK2抑制剂的Ⅱ期临床试验在铂类耐药卵巢癌患者中显示出良好的客观缓解率,提示该靶向药物具有重要的临床应用前景,或可为铂耐型卵巢癌患者的靶向治疗提供了新的选择｡

4、PTK2特异性抑制剂

近年来,由于其在肿瘤存活､转移和侵袭中的作用,PTK2已成为一种很有前途的癌症治疗靶点｡目前已有多种靶向PTK2的小分子抑制剂被开发并进入临床试验阶段,其作用机制主要抑制PTK2磷酸化,阻断下游信号传导｡德法替尼(defactinib)和IN10018是两种重要的PTK2抑制剂｡IN10018不仅可以克服肿瘤基质纤维化屏障,进而增强药物渗透,还可以调节肿瘤免疫微环境,与多种抗肿瘤疗法协同增效｡一项IN10018联合多柔比星治疗铂耐药卵巢癌的I期研究中,患者的客观缓解率可达56.7%,中位无进展生存期为6.2个月,表明PTK2抑制剂联合化疗药物的组合对于铂耐药卵巢癌患者具有显著治疗潜力,且安全性可控[26]｡值得注意的是,PTK2抑制剂和PI3K抑制剂联合,在宫颈癌和卵巢癌中有显著的抗肿瘤效应｡阿武替尼(avutometinib)作为一种RAF/MEK抑制剂,可同时抑制RAF和MEK激酶活性,阻断MAPK信号通路｡研究显示,defactinib和avutometinib联合使用,在宫颈癌､子宫内膜癌及卵巢癌细胞中均有显著的抗肿瘤活性,并且二者联用能有效逆转耐药[21]｡因此,PTK2抑制剂与传统放化疗,或者其他靶向治疗也是未来可探究的领域,特别是对于治疗耐药性肿瘤方面展现出良好前景｡

5、总结与展望

在恶性肿瘤中,癌细胞间粘附力下降是细胞获得侵袭转移能力的重要特征｡PTK2作为一种重要的细胞黏附分子,在宫颈癌､子宫内膜癌和卵巢癌中均呈现过表达状态,且其表达水平与肿瘤分期､患者预后､转移及复发密切相关｡PTK2可以通过多重信号网络驱动肿瘤进展,如整合p53凋亡通路､SRC⁃FAK复合物形成及RAF/MEK､PI3K⁃AKT信号通路串联反应｡此外,PTK2还可参与肿瘤免疫微环境的重塑,通过介导肿瘤干性､免疫细胞的表达和趋化性､细胞外基质密度,进而促进肿瘤进展及免疫逃逸｡目前的临床研究显示,PTK2抑制剂作为单一疗法在癌症治疗中的疗效有限,但与其他药物联合使用时会出现有前景的结果｡因此未来需要进一步探索PTK2在妇科肿瘤发生发展中的分子机制,发现可以与PTK2协同作用的有前景的治疗靶点,开发更有效的PTK2靶向治疗策略,为未来妇科肿瘤的诊治提供新策略和新方向｡

参考文献:

[14]候壹颖,魏芳.BUB1B与妇科恶性肿瘤[J].基础医学与临床,2024,44:1717⁃1721.

[15]封菊,苑中甫,邱海峰.RNA干扰FAK表达抑制宫颈癌细胞侵袭､迁移能力的研究[J].癌症进展,2018,16:179⁃182.

[23]霍茜瑜,任彦松.纤维连接蛋白在卵巢癌迁移侵袭中作用的研究进展[J].现代肿瘤医学,2024,32:1935⁃1938.

基金资助:国家肿瘤区域医疗中心科教培育基金博导硕导伴飞基金(SD2023015);

文章来源:秦怡,王晓燕.蛋白酪氨酸激酶-2在妇科肿瘤中的作用[J].基础医学与临床,2025,45(08):1098-1102.