宫颈组织中miR-142-3p的表达水平及其临床意义

2020-06-19 423 上传者：管理员

摘要：目的：探讨miR-142-3p表达与宫颈癌患者预后的关系。方法：采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR检测miR-142-3p在宫颈癌组织及正常组织中的表达水平。然后统计分析miR-142-3p表达与宫颈癌临床特征及预后的关系。结果：宫颈癌组织中miR-142-3p表达量显著降低。miR-142-3p低表达水平与晚期FIGO阶段(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.005)和宫颈侵袭程度(P=0.006)有明显关系。此外，Kaplan-Meier生存分析显示，miR-142-3p低表达的患者总体生存期及无进展生存期较短。最后，多因素生存分析也提示miR-142-3p可能是总体生存和无进展生存的独立预后标志物。结论：MiR-142-3p低表达与宫颈癌的发生发展显著相关，可能是预测宫颈癌预后的一种潜在的新型生物标志物。

关键词：
miR-142-3p
临床意义
妇科肿瘤
宫颈癌
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宫颈癌是女性最常见的恶性肿瘤之一，是女性生殖系统癌症死亡的第四常见原因[1]。尽管近十年来宫颈癌的筛查、诊断和治疗有了显著的改善，但晚期患者的预后普遍较差[2]。因此，迫切需要新的准确的生物标志物用于诊断和预后评估。

MicroRNAs(miRNAs)是小的大约有22个碱基对的内源性非编码RNAs，与3'端非转录去结合，靶向调节mRNA的表达[3]。由于其对蛋白质编码基因的广泛调控，miRNAs调控许多重要的生物学过程，如肿瘤发生、炎症和发育[4]。越来越多的证据表明，miRNAs通常促进或抑制肿瘤的进展，转移取决于细胞类型或其目标基因[5]。

最近，有报道称miR-142-3p在肝癌等多种肿瘤中显著下调，比如肝细胞性肝癌[6]、急性髓系白血病[7]、结肠癌[8]。然而，miR-142-3p在宫颈癌中的临床意义和预后价值尚未见报道。因此，本研究的目的是观察宫颈癌中miR-142-3p的表达并探讨miR-142-3p在宫颈癌中的临床意义。

1、材料与方法

1.1一般资料

选取2018年4月至2019年4月我院收治的173例宫颈癌患者作为研究对象。宫颈癌患者均行根治性子宫切除术，但均未接受化疗。获取医疗记录以审查患者数据，包括年龄、肿瘤大小、组织学分级、国际妇产科联合会分期、淋巴结转移、宫颈浸润深度。所有样本均由资深病理学家鉴定，并根据FIGO宫颈癌分期系统进行分期。所有研究对象签署知情同意书，且该研究获得伦理委员会批准。

1.2荧光定量PCR

采用Trizol试剂从手术标本中提取总RNA，用分光光度计260/280测定RNA纯度。然后1μg的RNA被逆转录到cDNA上。采用SYBRGreenPCR试剂盒，Bio-RadC1000进行实时PCR。引物序列如下:miR-142-3p，前引物:5'-CGCCGTGTAGTGTTTCCTAC-3'，后引物:5'-CAGTG-CAGGGTCCGAGGT-3';采用通用反向引物U6作为内源标准物。用ΔCt法进行定量分析。

1.3数据统计分析

采用SPSS18.0或Prism5.0进行统计分析。组间比较采用独立样本t检验。应用卡方检验分析miR-142-3p表达与临床病理特征相关性的统计学意义。生存时间自结直肠癌诊断之日起至死亡或最后一次随访之日计算。生存分析采用log-rank检验生成Kaplan-Meier曲线。用Cox回归分析miR-142-3p的诊断意义。P<0.05为差异有统计学意义。

2、结果

2.1宫颈癌患者miR-142-3p的表达水平下调

为检测miR-142-3p在人宫颈癌中的表达是否发生变化，使用173对宫颈癌组织和邻近正常组织进行PCR分析。与正常邻近宫颈组织相比，宫颈癌组织中miR-142-3p表达水平明显下降(t=12.372,P<0.001)(图1)。

图1正常宫颈组织及宫颈癌组织中miR-142-3p表达水平

2.2宫颈癌组织miR-142-3p表达与临床病理特征之间的关系

为分析miR-142-3p表达与宫颈癌患者各种临床病理因素的关系，将miR-142-3p表达水平高于平均值的患者设为高表达组，miR-142-3p表达水平低于平均值的患者为低表达组，分析结果显示miR-142-3p低表达水平与晚期FIGO阶段(P=0.002)、淋巴结转移(P=0.005)和宫颈侵袭程度(P=0.006)有明显关系，但是与年龄、肿瘤大小和组织分级没有关系。见表1。

表1Cox回归分析宫颈癌患者预后参数的单因素分析/例

2.3miR-142-3p低表达与宫颈癌不良预后的关系

生存数据来自173名宫颈癌患者，平均随访时间为21个月，从3个月到60个月不等。从Kaplan-Meier生存曲线中，我们发现miR-142-3p低表达量的患者总体生存期和无进展生存期均较短(P<0.001)(图2)。

图2miR-142-3p表达与宫颈癌患者预后的关系

3、讨论

MiRNA已被确定为重要的发育调控因子，其异常表达可能在临床结果中发挥重要作用[9]。生长中的miRNA被认为是宫颈癌的独立预后生物标志物，比如miR-335[10],miR-664[11]和miR-1246[12]。前期研究表明，miR-142-3p在宫颈癌组织中的表达水平显著下调，过表达miR-142-3p通过靶向抑制宫颈癌细胞增殖和侵袭，提示miR-142-3p可能具有抑癌作用。

目前，我们关注miR-142-3p在宫颈癌患者中的预后价值。首先，我们检测发现了与正常对照组相比，MiR-142-3p在宫颈癌组织中的表达显著下调。接下来，我们分析了miR-142-3p表达与临床病理变量之间的关系，数据显示，miR-142-3p低表达水平与晚期FIGO、淋巴结转移、宫颈浸润深度密切相关，提示miR-142-3p可能在宫颈癌进展中发挥积极作用。此外，为了探讨miR-142-3p对宫颈癌预后的影响进行了kaplanmeier分析，研究显示，miR-142-3p低水平的宫颈癌患者总体生存期和无进展生存期较短。最后，单因素和多因素分析显示，血浆miR-142-3p低表达是总体生存和无进展生存的独立预测因子。综上所述，miR-142-3p的降低可能是预测宫颈患者生存不良的一个生物标志物。

MiR-142-3p在多种肿瘤中发挥重要作用。吴丽等[6]报道称miR-142-3p过表达通过调控RAC1抑制肝癌细胞的集落形成、迁移和侵袭。有研究发现miR-142-3p在结肠癌标本中表达明显降低，其过表达可通过下调CD133、Lgr5和ABCG2来抑制结肠癌细胞的生长[8]。所有这些结果都揭示了miR-142-3p在肿瘤中的关键作用。因此，我们推测miR-142-3p可能与宫颈癌患者的预后有关。然而，miR-142-3p调控宫颈癌发病的机制需要进一步的研究来阐明。

李红,黄立.miR-142-3p在宫颈组织中的表达及其临床意义[J].实用癌症杂志,2020,35(06):900-902.