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了解河南省市售鲜活食用螺类中食源性致病菌污染状况

2021-09-01 344 上传者：管理员

摘要：目的了解河南省市售鲜活食用螺类中食源性致病菌污染状况,及时发现食品安全隐患,为政府食品安全监管提供科学依据。方法按照2018年《国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》,对河南省7个监测点采集的鲜活螺类样品开展单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌检测。对检出的沙门氏菌进行血清学分型,对检出的副溶血性弧菌进行毒力基因的检测。结果 131份鲜活食用螺类中共检出食源性致病菌阳性样品53份,总阳性率为40.46%。副溶血性弧菌的检出率最高(23.66%)。对检出的18株沙门氏菌进行血清学分型,分属于7个血清型,其中汤卜逊沙门氏菌和阿柏丁沙门氏菌为优势血清型。对检出的35株副溶血性弧菌进行3种毒力基因(tlh、tdh和trh)的检测,35株副溶血性弧菌均携带tlh,未检出毒力基因tdh,有4株携带trh(11.43%)。结论河南省内市售鲜活食用螺类食源性致病菌污染情况不容乐观,有较高的食品安全风险,相关部门应加强监管力度,以降低食品安全问题发生的可能。

关键词：
毒力基因
血清型
食源性致病菌
食用螺类
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食用螺类因其独特的口感，丰富的营养而深受大众喜爱。关于食用螺类最多的报道是感染广州管圆线虫，其被食源性致病菌污染情况的报道较为少见。为了掌握河南省鲜活食用螺类食源性致病菌的污染状况，及时发现食品安全隐患，于2018年开展了河南省市售鲜活食用螺类食源性致病菌包括单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌的监测，此类监测在河南省尚属首次。

1、资料与方法

1.1样品

样品来自河南省食品安全风险监测7个监测点，分为：济源市、漯河市、南阳市、许昌市、新乡市、信阳市、禹州市。2018年全年，分四个季度，按照随机抽样的原则，共采集131份鲜活螺类样品，采样地点类型涵盖农贸市场、超市、零售店、网店等流通环节和餐饮等各个环节。

1.2培养基及试剂和仪器类型

1.2.1培养基和试剂

各致病菌增菌、分离、鉴定用培养基，均购自北京陆桥技术股份有限公司；科玛嘉显色平板购自上海欣中生物工程有限公司，血琼脂平板购自广东环凯微生物科技有限公司。生化鉴定GN卡与生化鉴定GP卡购自法国梅里埃公司。沙门氏菌分型血清购自丹麦国家血清研究院；副溶血性弧菌三重核酸检测试剂盒（荧光PCR法）购自北京卓诚惠生生物科技股份有限公司。所用培养基均在有效期内，经质控合格后使用。

1.2.2仪器

恒温恒湿培养箱购自德国3M公司；全自动微生物生化鉴定仪Vitek2-compact购自法国生物梅里埃股份有限公司；荧光定量PCR仪CFX96购自伯乐生命医学产品（上海）有限公司。

1.3方法

按照2018年《国家食品污染物和有害因素风险监测工作手册》进行单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌、副溶血性弧菌、创伤弧菌、霍乱弧菌、溶藻弧菌的检测。对检出的沙门氏菌进行血清学分型，对检出的副溶血性弧菌按照所用试剂盒说明书进行毒力基因的检测。

2、结果

2.1总体情况

131份螺类中共检出食源性致病菌阳性样品53份，总阳性率为40.46%，有26份样品同时检出了2种及以上食源性致病菌。6种食源性致病菌检出情况见表1。共检出食源性致病菌95株，其中沙门氏菌18株，单核细胞增生李斯特氏菌2株，副溶血性弧菌35株（有四份样品中同时检出了携带不同毒力基因的两种副溶血性弧菌），溶藻弧菌28株，霍乱弧菌12株，未检出创伤弧菌。

表1 131份样品中食源性致病菌检出情况

2.2沙门氏菌血清学分型

对检出的18株沙门氏菌进行血清学分型，分别属于7个血清型：布伦登卢普沙门氏菌（2株）、汤卜逊沙门氏菌（6株）、布里赫姆沙门氏菌（1株）、德尔卑沙门氏菌（1株）、阿柏丁沙门氏菌（6株）、里森沙门氏菌（1株）、奥雷宁堡沙门氏菌（1株）。汤卜逊沙门氏菌和阿柏丁沙门氏菌为优势血清型。

2.3副溶血性弧菌毒力基因检测情况

用荧光PCR法对检出的35株副溶血性弧菌进行3种毒力基因（tlh、tdh和trh）的检测，35株副溶血性弧菌均携带属特异性基因tlh，未检出毒力基因tdh，有4株携带trh，占11.43%。见表2。

表2 35株副溶血性弧菌3种基因检出情况

3、讨论

螺类是我国常见的水产品，在我国大部分地区都有食用螺类的习俗。为追求口感，很多餐饮场所采用爆炒的方式加工螺类，很多只炒至半熟，有些甚至将螺洗净后凉拌，或者将螺肉片直接置于冰块上供食客生食。如果螺类本身被食源性致病菌污染，则极易引起人罹患食源性疾病。

本次调查共采集131份河南省内市售鲜活食用螺类，共检出食源性致病菌阳性样品53份，总阳性率为40.46%，副溶血性弧菌阳性率最高（23.66%）。调查结果表明，河南省内市售鲜活食用螺类食源性致病菌污染情况不容乐观，有较高的食品安全风险，相关部门应加强监管力度，以降低食品安全问题发生的可能。

弧菌可引发食物中毒、胃肠炎和败血症等疾病[1]。副溶血性弧菌、创伤弧菌、溶藻弧菌和霍乱弧菌为常见的嗜盐性弧菌，是我国沿海地区食物中毒的主要病原菌[2,3,4]。其中，溶藻弧菌和副溶血性弧菌因致病条件和环境较为相同，易造成水产品混合感染[5]，陈自强等[6]曾报道过一起因副溶血性弧菌和溶藻弧菌混合污染食物而引起的食物中毒事件。本次调查中，共检出16份样品同时被副溶血性弧菌和溶藻弧菌混合污染，占所检样品总量的12.21%。这提示对水产品中多种弧菌的混合感染情况应引起重视。副溶血性弧菌的毒力机制较为复杂，据大量文献报道，主要是由多种毒力基因编码的毒素引起[7,8,9]。毒素主要包括分别由tlh、tdh、trh基因编码的不耐热直接溶血素（TLH）、耐热直接溶血素（TDH）、耐热直接溶血素相关溶血素（TRH)[10]。其中，TDH和TRH是溶血素，而TLH是一种细胞毒素[11]。目前，普遍认为tlh基因是副溶血性弧菌种属特异性基因。本次调查研究中检出的35株副溶血性弧菌均携带tlh,4株携带trh，未检出tdh。郝瑞娥等[12]报道的山西省食源性疾病中分离的副溶血性弧菌的毒力基因情况是tdh基因携带率为100%，未检出trh。这与强鑫华等[13]报道的情况一致。由此可以看出，食品中分离的副溶血性弧菌的毒力基因携带率要远远低于临床分离菌株。这说明是否携带毒力基因tdh和trh与副溶血性弧菌的致病性有高度的相关性。食品分离的副溶血性弧菌的毒力基因携带率低而临床分离株的毒力基因携带率高说明携带毒力基因的副溶血性弧菌更易致病。人体在进食食品到最终发病的过程中可能起到了一部分筛选富集作用。因此，虽然本次监测中从鲜活食用螺类中分离的副溶血性弧菌的毒力基因携带率较低，也应引起相关部门足够的重视。

本次调查的鲜活食用螺类中共18株沙门氏菌，分属于7个血清型，其中汤卜逊沙门氏菌和阿柏丁沙门氏菌均为6株，为优势血清型。这与方忠意等[14]报道的河南省猪源沙门氏菌优势血清型（德尔卑沙门氏菌）不同，与崔莹等[15]结果也不同。这可能说明食源性沙门氏菌的血清型别与宿主类别有一定相关性。

本次调查的鲜活食用螺类样本中，有16份样品中同时检出了2种食源性致病菌，有8份样品中同时检出了3种食源性致病菌，还有2份样品中同时检出了4种食源性致病菌。这说明一种水产品可能同时被两种甚至多种食源性致病菌感染，需警惕多种食源性致病菌合并感染的出现。26份感染两种及两种以上食源性致病菌的样本中，有18份均采自夏季，这说明天气炎热，更有利于微生物的增殖，同时易出现交叉感染的现象。采自批发市场或农贸市场的有21份，占80.77%，这可能是因为，在这些场所，各类水产品大量聚集销售，器皿混用，加上鲜活螺类处在流动的水体环境中，极易产生交叉污染。

建议消费者不要食用在水质污染的水域里生长的螺类，因为螺类的生长特性使其容易通过水体感染致病菌。同时，提醒广大消费者应建立良好的饮食习惯，不生食螺类，尽量不选用爆炒、烧烤尤其是带壳烧烤等烹饪方式。有关部门应加大市售鲜活螺类的监督管理，尤其是对批发市场农贸市场的监管，加大对食品流通环节的监测力度，提高餐饮行业从业人员的卫生意识，做到烹饪彻底，生熟分开，防止交叉污染。

参考文献:

[1]秦生巨.弧菌及其对弧菌病的防控措施的建议(一)[J].当代水产,2015,40(6):72.

[2]胡兴娟,沈飚,张文斌.p H值及盐度对副溶血弧菌与霍乱弧菌生长影响的研究[U].中华医院感染学杂志,2011,21(22):4855-4857.

[3]梅玲玲,潘雪霞,朱敏等.浙江省副溶血性弧菌污染水平及贝类海产品风险评估[J].中国人兽共患病学报,2012,28(7):700-704+717.

[4]李庆山.副溶血性弧菌所致食物中毒的研究进展[J].中国卫生检验杂志,2009,19(2):461-463.

[5]林业杰,林勇,林金财,等.海产品携带溶藻弧菌调查[J].海峡预防医学杂志,2000,6(2);45-46.

[6]陈自强,裘先前.一起由副溶血性弧菌和溶藻弧菌引起的食物中毒调查[J].海峡预防医学杂志2003,9(2):71.

文章来源:崔莹,戚浩彧,张濛,李艳芬,吴玲玲,邱正勇,张广伟,李辉.河南省市售鲜活食用螺类中食源性致病菌污染状况调查[J].河南预防医学杂志,2021,32(09):666-668.