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微生物检验中应用细菌耐药性监测的临床价值分析

2025-02-24 66 上传者：管理员

摘要：目的:探讨细菌耐药性监测在微生物检验中的临床应用价值，以提升抗感染治疗的合理性和精准性。方法:在2023年6月至2024年6月期间，黔西南布依族苗族自治州妇幼保健院对845例感染病原菌的患者进行了筛选，并分析各科室送检的微生物标本中不同病原菌的耐药特性及耐药菌检出率。结果:在临床检出的病原菌中，主要分为革兰阴性菌和革兰阳性菌。革兰阴性菌中，占比由高到低依次为：大肠埃希菌(28.45%)、肺炎克雷伯菌(21.73%)、铜绿假单胞菌(19.61%)、不动杆菌属(9.36%)、枸橼酸菌属(9.19%)、变形杆菌属(6.01%)和肠杆菌属(5.65%)。革兰阳性菌的占比从高到低依次为：凝固酶阴性葡萄球菌(50.54%)、金黄色葡萄球菌(44.80%)以及肠球菌(4.66%)。在金黄色葡萄球菌中，检测出MRSA 51株和MSSA 74株。MRSA对青霉素(100.0%)、红霉素(50.98%)和克林霉素(35.29%)的耐药性最高，而MSSA的耐药性前3位药物为青霉素(81.08%)、红霉素(40.54%)和左氧氟沙星(12.16%)。在凝固酶阴性葡萄球菌中，MRCNS有94株，MSCNS有47株，MRCNS的耐药性前三位药物为青霉素(96.81%)、左氧氟沙星(72.34%)和红霉素(67.02%);MSCNS的耐药性前三位则为青霉素(70.21%)、红霉素(48.94%)和左氧氟沙星(14.89%)。肺炎克雷伯菌的耐药性前三为环丙沙星(49.59%)、头孢呋辛(45.53%)和头孢噻肟(44.72%)。大肠埃希菌的耐药性前三为环丙沙星(57.76%)、左氧氟沙星(52.17%)和头孢呋辛(49.07%)。铜绿假单胞菌的前三位耐药药物为头孢呋辛(77.48%)、左氧氟沙星(37.84%)和亚胺培南(36.94%)。结论:细菌耐药性监测在微生物检验中具有重要的临床价值，能够有效反映各病原菌的耐药谱，为临床抗感染治疗提供科学依据，有助于优化用药方案，提高治疗效果。

关键词：
临床价值
微生物检验
抗菌药物
细菌耐药性
药物失效
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细菌耐药性指的是病人体内的细菌对抗菌药物产生抵抗或使药物失效的特性[1] ｡研究显示,2019年全球约有 495 万例死亡与细菌耐药性相关,其中约 127万例(95% ui0.91 ~1.71)可直接归因于耐药细菌的感染[2] ｡细菌耐药性的发生机制复杂多样,其中获得性耐药性是细菌在抗菌药物 “压力”下长期适应和选择的结果;耐药性的发展导致新的感染性疾病不断涌现,同时增加了抗菌新药研发的难度｡并且有研究已证实,抗菌药物使用量与细菌耐药性存在相关性[3] ｡如果抗菌药物的滥用问题得不到有效控制,细菌耐药将进一步加剧,使得感染性疾病的临床治疗面临更大的挑战｡例如,杜晓露等人[4]的研究显示,铜绿假单胞菌血流感染患者死亡的独立危险因素,具有病死率高､预后差等特点｡微生物检验通过识别并确定病原菌种类,结合药敏试验,为临床医护人员制定有针对性的治疗方案提供关键信息支持[5] ｡合理使用抗菌药物,有助于有效降低院内感染率,控制疾病进程,从而提升治疗效果,进一步保障患者的健康与安全｡李丹[6] 的研究也证实了,在临床微生物检验中加强细菌耐药性监测,明确耐药性状况,有助于为后续药物治疗提供可靠依据,从而有效避免不良影响,提升临床治疗的安全性｡因此,本研究旨在通过对黔西南布依族苗族自治州妇幼保健院收集的 845例病原菌感染患者进行耐药性检测,分析不同菌种的耐药情况,探讨细菌耐药性监测在临床微生物检验中的实际应用价值｡

1、资料与方法

1.1 一般资料

纳入黔西南布依族苗族自治州妇幼保健院2023年 6月至 2024年 6月间收集的 845例病原菌感染患者资料,其中男性 448例,女性 397例,年龄 0~68岁,平均 (31.55± 12.42)岁｡样本类型包括血液 235份､痰液 211份､尿液 203 份､分泌物 104份,以及引流液或胸腔积液 92份｡

1.2 纳入与排除标准

(1)纳入标准:①标本呈阳性;②具有完整的微生物标本检测记录,并明确检测出致病菌株｡(2)排除标准:①因严重基础疾病,如晚期肿瘤､免疫缺陷病导致的院内感染;② 抗菌药物使用情况不明确或治疗依从性较差;③临床资料不完整;④凝血功能障碍｡

1.3 方法

细菌耐药性监测｡(1)标本采集与保存:完成标本采集后,立即进行密封处理,并送至实验室,同时合理控制保存的温度与湿度,以防止其他病原菌混入,确保样本的准确性｡ (2)标本处理与接种:根据标本类型进行均质化处理｡在处理完成后,将样本接种在适宜的培养基上,血液标本多用血平板,而其他标本则使用血平板､巧克力平板以及麦康凯琼脂平板｡接种后,平板置于恒温培养箱中培养,观察菌落的生长情况,包括其大小､形状､颜色､光滑度､透明度和边缘特征,以判断是否为纯菌落｡(3)菌落分离与鉴定:对培养基中疑似的单个菌落进行纯化培养后,分离处理菌落｡鉴定菌株时,使用 vitek2compact型全自动微生物鉴定系统进行鉴别,对于该系统无法识别的菌株,辅以微量生化管进行进一步分离和确认｡对大肠埃希菌及肺炎克雷伯菌进行 Β-内酰胺酶的增效确证试验,以提高鉴别的准确性｡(4)耐药性测定:使用纸片琼脂扩散法(k-b法)并借助 vitek2 compact型全自动微生物药敏系统进行细菌的耐药性监测,测定菌株对多种临床常用抗菌药物的最小抑菌浓度｡参考标准质控菌株包括大肠埃希(atcc25922)､金黄色葡萄球菌(atcc27923)､铜绿假单胞菌(atcc27853)､不动杆菌 (atcc19606)､肺炎克雷伯菌(atcc700603)和变形杆菌 (atcc13315)等,均由北京华越洋生物科技有限公司提供, 并依据《全国临床检验操作规程(第 4版)》[7] 的标准进行判断｡(5)抗生素检测:采用头孢呋辛､头孢噻肟､头孢吡肟､亚胺培南､美洛培南､氨曲南､阿米卡星､哌拉西林-他唑巴坦､青霉素､红霉素､左氧氟沙星､克林霉素､环丙沙星､庆大霉素等 14种抗生素进行耐药性检测,涵盖了广泛的临床应用抗菌药物｡

1.4 观察指标

选取排名前五的病原菌,对药敏实验结果进行分析｡将凝固酶阴性葡萄球菌细分为耐甲氧西林和甲氧西林敏感类型,即耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(mrcns)与甲氧西林敏感凝固酶阴性葡萄球菌(mscns),金黄色葡萄球菌则区分为耐甲氧西林(mrsa)和甲氧西林敏感(mssa)类型, 随后进行相应的分析｡

1.5 统计学分析

研究数据的分析采用spss24.0软件进行,计数资料用例数(N)和率(%)表示｡

2、结果

2.1 致病菌菌株类型

在临床检出的病原菌中,主要分为革兰阴性菌(566株) 和革兰阳性菌(279株)｡革兰阴性菌中,占比由高到低依次为:161株大肠埃希菌 (28.45%)､123株肺炎克雷伯菌 (21.73%)､111株铜绿假单胞菌(19.61%)､53株不动杆菌属(9.36%)､52株枸橼酸菌属(9.19%)､34株变形杆菌属 (6.01%)和 32株肠杆菌属(5.65%)｡革兰阳性菌的占比从高到低依次为:141株凝固酶阴性葡萄球菌(50.54%)､ 125株金黄色葡萄球菌 (44.80%)以及 13株肠球菌 (4.66%)｡

2.2 主要致病菌耐药性分析

通过表1可以看出,在金黄色葡萄球菌中,检测出 mrsa51株和 mssa74株｡mrsa对青霉素(100%)､红霉素(50.98%)和克林霉素(35.29%)的耐药性最高,而 mssa 的耐药性前 3位药物为青霉素 (81.08%)､红霉素(40.54%)和左氧氟沙星(12.16%)｡在凝固酶阴性葡萄球菌中,mrcns有 94株,mscns有 47株,mrcns的耐药性前三位药物为青霉素(96.81%)､左氧氟沙星(72.34%)和红霉素 (67.02%);mscns的耐药性前三位则为青霉素 (70.21%)､红霉素(48.94%)和左氧氟沙星(14.89%)｡肺炎克雷伯菌的耐药性前三为环丙沙星(49.59%)､头孢呋辛 (45.53%)和头孢噻肟(44.72%)｡大肠埃希菌的耐药性前三为环丙沙星(57.76%)､左氧氟沙星(52.17%)和头孢呋辛(49.07%)｡铜绿假单胞菌的前三位耐药药物为头孢呋辛 (77.48%)､左氧氟沙星 (37.84%)和亚胺培南 (36.94%)｡

表1 主要致病菌耐药性分析

3、讨论

2022年国家多个部门联合发布了《遏制微生物耐药国家行动计划(2022—2025年)》[8] ,强调需健全抗微生物药物的临床监测系统,也体现了对细菌耐药性的重视｡细菌耐药性监测是评估细菌对抗生素抵抗能力的过程,其基本原理是收集并分离临床样本中的细菌,使其接触不同类别的抗生素,观察细菌的反应,以此确定其耐药性水平[9] ｡细菌的耐药性可分为两种类型:天然耐药与获得性耐药｡天然耐药是由细菌染色体基因决定,且通过遗传代代相传,表现稳定不变｡例如,链球菌对氨基糖苷类抗生素不敏感､肠道 g-杆菌对青霉素类抗生素耐药等,均属于天然耐药,因其由染色体基因直接导致｡获得性耐药是指细菌在接触抗生素后,通过质粒的传递获得抗药能力,抵抗抗生素的杀灭作用[10] ｡细菌耐药性产生机制主要是因为细菌可分泌灭活酶,灭活酶在抗生素发挥抗菌作用之前即将其破坏,导致抗生素失效,常见灭活酶包括 Β-内酰胺酶､氯霉素乙酰转移酶及氨基糖胺钝化酶等[11] ｡抗菌药物靶位的改变也会形成耐药性,细菌通过产生修饰酶或发生突变而改变抗生素的作用靶位,致使药物无法有效结合｡例如,链霉素的靶位为 30s亚基上的 s12蛋白,一旦 s12蛋白结构发生变化,将影响链霉素的结合,从而产生耐药性｡同时,细菌在接触抗生素后,能通过调整通道蛋白的性质和数量,导致膜通透性变化,从而获得耐药性[12] ｡革兰阳性菌对多黏菌素类抗生素耐药性较高,因其厚细胞壁阻止了抗生素的渗透｡李虎良等人[13]的研究认为,细菌的黏附能力与其致病性密切相关,黏附是细菌形成生物膜的首要步骤｡当细菌附着于难以清除的部位时,可能再次形成生物膜,从而导致炎症长期难以消退｡

研究结果显示:mrsa 对青霉素 (100%)､红霉素 (50.98%)和克林霉素(35.29%)的耐药性最高,而 mssa 的耐药性前 3位药物为青霉素 (81.08%)､红霉素 (40.54%)和左氧氟沙星(12.16%)｡mrsa的高耐药性可能与其携带的 MECa基因有关,该基因通过改变药物靶位蛋白质使细菌对 Β-内酰胺类抗生素产生广泛耐药性｡mssa 对青霉素耐药主要因其产生 Β-内酰胺酶破坏青霉素结构, 使青霉素失去抗菌活性[14] ｡对红霉素耐药则源于核糖体位点的甲基化修饰阻碍药物结合,此酶能修饰细菌的核糖体位点,从而影响红霉素与核糖体的结合,使其无法抑制细菌蛋白合成,导致红霉素耐药性增高｡左氧氟沙星的耐药性与 dna回旋酶突变和外排泵机制相关,使药物难以有效抑菌｡ mrcns的耐药性前三位药物为青霉素(96.81%)､左氧氟沙星(72.34%)和红霉素(67.02%);mscns的耐药性前三位则为青霉素(70.21%)､红霉素(48.94%)和左氧氟沙星 (14.89%)｡因为 mrcns的广泛耐药性或与其质粒携带的多重耐药基因有关,质粒介导的基因转移加剧了细菌间耐药性的传播｡肺炎克雷伯菌的耐药性前三为环丙沙星 (49.59%)､头孢呋辛(45.53%)和头孢噻肟(44.72%);大肠埃希菌的耐药性前三为环丙沙星(57.76%)､左氧氟沙星 (52.17%)和头孢呋辛(49.07%)｡因为革兰阴性菌耐药性产生的主要机制可能是由于广谱 Β-内酰胺酶(esblS)的分泌,这些酶通过水解 Β-内酰胺环使青霉素类和头孢菌素失活,显著削弱临床治疗效果｡铜绿假单胞菌的前三位耐药药物为头孢呋辛(77.48%)､左氧氟沙星(37.84%)和亚胺培南(36.94%),表明其耐药性机制较为复杂,主要与其膜通透性降低和多药外排泵的高表达相关｡本研究结果与李振起[15] 的研究结果相似,研究表明,细菌耐药性监测在临床微生物检验中发挥了重要作用,为合理用药提供科学依据,降低了抗生素滥用的风险,有助于提高感染性疾病的治疗效果｡

总之,细菌耐药性监测能够有效反映各病原菌的耐药谱,为临床抗感染治疗提供科学依据,有助于优化用药方案, 提高治疗效果｡

参考文献:

[1]段锻,江海洋,吴聪明.质谱技术用于细菌耐药性检测的研究进展[j].中国兽医杂志,2023,59(12):94-98.

[2]杨炜英,杨丹.分析临床微生物检验和各种细菌对不同药物的耐药性检测情况[j].现代诊断与治疗,2023,34(16):2380 -2383.

[3]盛雪鹤,许锦英,王幼林,等.某三级医院常见细菌耐药性与抗菌药物使用相关性分析[j].中国临床药理学与治疗学,2019, 24(7):778-785.

[4]杜晓露,周华,符一骐,等.铜绿假单胞菌血流感染患者细菌耐药性及预后影响因素分析[j].中国感染与化疗杂志,2020,20 (2):118-124.

[5]陈贇,方松林.细菌耐药性监测在临床微生物检验中的应用效果分析[j].中外医疗,2023,42(33):59-61.

[6]李丹.细菌耐药性监测在临床微生物检验中的应用效果研究 [j].当代医药论丛,2024,22(14):110-112.

[7]尚红,王毓三,申子瑜.全国临床检验操作规程(第 4版)[m]. 北京:人民卫生出版社,2015:574.

[8]遏制微生物耐药国家行动计划(2022—2025年)[j].中国感染控制杂志,2022,21(12):1264-1266.

[9]侯万乐,李勤.细菌耐药性检测在临床微生物检验中的应用价值[j].中外医药研究,2023,2(10):106-108

文章来源:张天敏.微生物检验中应用细菌耐药性监测的临床价值分析[J].黑龙江医药,2025,38(01):154-157.